孟明耀
- 作品数：30 被引量：78H指数：6
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目云南省科技计划项目昆明市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人外周血淋巴细胞体外诱导培养前后细胞表型与细胞毒活性相关性研究被引量：6
- 2011年
- 为了分析体外细胞因子诱导培养CIK细胞过程中细胞表型的变化与其杀瘤活性的相关性及为临床过继免疫治疗提供实验依据,本研究采用体外诱导方法扩增培养正常人外周血淋巴细胞及单个核细胞,应用流式细胞术测定培养前、培养第7天和第14天的CD3^+等15种不同表型细胞百分率的变化,用CCK-8试剂检测第7天和第14天的细胞毒活性。结果显示,扩增培养后T细胞活化表型的表达和细胞毒活性在第7天最强,与其细胞表型CD3^+CD25^+、CD3^+CD28^+、CD3^+CD25^+CD28^+、CD3^+CD4^+呈正相关(P<0.05),与CD3^+CD45RA^+CD45RO^+呈负相关(P<0.05)。本研究表明测定培养细胞活化相关表型可以间接监测其杀瘤能力,为临床CIK细胞过继免疫治疗的应用提供实验依据。
- 刘运洪孟明耀解燕华刘莹魏传钰侯宗柳
- 关键词：体外诱导细胞表型细胞毒活性CIK
- 超大容量非免疫人源性Fab抗体库的构建被引量：4
- 2006年
- 目的构建超大容量非免疫人源性Fab抗体库。方法通过RT-PCR从208名不同人的外周血淋巴细胞中扩增出人IgG重链Fd段和κ、λ两轻链基因片段,将其克隆入噬粒pComb3中,构建人源性Fab段噬菌体抗体库。结果成功地构建了库容量为2.6×1012的人源性Fab段噬菌体抗体库。结论新的噬菌体抗体库对筛选不同抗原位点的抗体,提供有用的资源。
- 李晓琳侯宗柳刘建生孟明耀马进王萍
- 关键词：噬菌体抗体库
- 2种口服甲型肝炎疫苗免疫应答效果评价被引量：1
- 2006年
- 目的研究甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫效果。方法将甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫Balb/c小鼠,并检测免疫后抗甲型肝炎总抗体I、gA和sIgA,外周血淋巴细胞亚群,脾淋巴细胞增殖反应和细胞因子干扰素-γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素2(IL-2)水平。结果2种疫苗口服免疫后均能诱导体液、细胞和局部免疫应答;但含铝佐剂的甲型肝炎灭活疫苗口服免疫,诱导抗体水平较低,但可诱导较好的细胞免疫应答。结论口服免疫可以作为甲型肝炎疫苗有效的免疫途径之一。
- 邵聪文侯宗柳徐冬蕾孟明耀刘建生王萍杨丽仙马进陈统球
- 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗甲型肝炎灭活疫苗免疫应答
- 甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价被引量：3
- 2005年
- 目的 评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法 将 4个厂家的 4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后 ,检测比较HAV抗原含量 ;通过小白鼠体内效力实验 ,计算半数有效稀释倍数 ,比较评价各组疫苗的免疫效力。结果 体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离 ,传统概念上的半数有效剂量 (ED50 )不能用作比较评价指标。结论 体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。
- 刘建生庞伟孟明耀马进杨丽仙张鸣陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗
- 甲型肝炎病毒抗原定量参比品的研制
- 2005年
- 目的制备甲型肝炎病毒抗原定量参比品.方法依据<甲型肝炎灭活疫苗制造及检定规程>制备了1批甲肝病毒抗原参比品,并进行蛋白质含量测定、HAV蛋白纯度分析和酶标抗原含量标化.结果经纯化,杂蛋白去除率达99.9%,参比品的纯度大于95%;抗原含量在20～80EU/ml范围内,抗原含量的对数与其A值呈剂量-效应关系.结论该参比品可用于甲肝病毒ELISA定性及定量标定.
- 刘建生庞伟孟明耀马进王萍杨丽仙陈统球侯宗柳
- 关键词：甲型肝炎病毒蛋白质
- 肠道菌群相关代谢物丁酸的量效和时效对人脐带间充质干细胞增殖的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨人肠道菌相关代谢物丁酸对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖的影响。方法用含不同浓度丁酸(0.02、0.08、0.32、1.25和5.00 mmol/L)的干细胞培养基培养hUC-MSCs,采用CCK-8增殖实验检测24、48和72 h细胞增殖情况,并与正常对照组比较。结果 hUC-MSCs的增殖与丁酸的量效和时效均有关系,作用24 h内抑制hUC-MSCs增殖,到48 h则表现出低浓度促进细胞增殖、高浓度抑制细胞增殖的作用;当时间达到72 h,则低浓度丁酸对hUC-MSCs的促增殖作用减弱,高浓度组对其增殖抑制的作用有所增强。结论丁酸对hUC-MSCs增殖的影响存在量效和时效的共同作用,适宜的丁酸浓度和作用时间对机体肠道的功能维持及平衡有重要影响。
- 李欣欣孟明耀熊晶晶胡红卫胡红卫曾洁曹佳宋杰琴曾洁侯宗柳李檬
- 关键词：肠道菌群代谢物丁酸脐带间充质干细胞
- 诱导多能干细胞在遗传性心脏疾病模型中的应用与机制被引量：1
- 2024年
- 背景:遗传性心脏病具有较高的患病率及死亡率,至今其发病机制仍未阐明。尽管部分遗传性心脏病已经建立了相应的动物模型,为研究遗传性心脏病的发病机制提供了一定的基础,但是由于物种间的差异等原因显著降低了这些研究结果的价值,因此,需要全新的模型来探索其发生发展过程。目的:综述了目前诱导多能干细胞在构建多种遗传性心脏病模型中的作用和潜在的应用前景。方法:第一作者于2023年1-3月期间应用计算机在Pub Med数据库中检索近13年的相关文献,以“induced pluripotent stem cell,inherited heart disease,congenital heart disease”等为检索词,最终纳入76篇文献进行分析。结果与结论:自2007年诱导多能干细胞从人体体细胞中诱导建立以来,已有许多针对疾病特异性诱导多能干细胞的研究报道。由于疾病特异性诱导多能干细胞能够再现疾病表型,因此有望成为体外疾病建模的一种新研究工具,用于分析发病机制和研制辅助药物。在心血管遗传性疾病的研究方面,从患者特异性诱导多能干细胞分化得到的心肌细胞中含有参与心脏发育异常相关的基因突变,因此,其可作为一种全新的工具研究遗传性心脏病的潜在机制。到目前为止,诱导多能干细胞来源心肌细胞已被广泛用于多种遗传性心脏疾病的分子机制研究,如心脏电生理性疾病、心肌病以及一些综合征性遗传性心脏疾病。
- 马阳光张雅永孟明耀金志豪李映明黄耀萱韩燊李亚雄
- 关键词：遗传性心脏病诱导多能干细胞心肌细胞疾病模型
- 甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)诱导小鼠体液及细胞免疫应答被引量：1
- 2005年
- 目的评估甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗的免疫学效果。方法用甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)分别经腹腔免疫BALBc小鼠后,用ELISA法检测血清中抗HAVIgG、TNFα、IFNγ和IL2;用流式细胞仪对全血中T细胞亚群分类;3HTdR掺入法检测T淋巴细胞增殖。结果减毒活疫苗组在初免后诱导的体液和细胞免疫水平均低于灭活疫苗组,加强免疫后,与灭活疫苗相当。灭活疫苗组IFNγ的峰值出现时间较减毒活疫苗组晚,但水平较高。结论两种疫苗均可诱导体液和细胞免疫应答,减毒活疫苗进行加强免疫后可诱导更好的系统免疫应答。
- 徐冬蕾刘建生孟明耀庞伟马进王萍王晓辉陈统球侯宗柳
- 关键词：减毒活疫苗细胞免疫应答灭活疫苗体液肝炎甲型淋巴细胞增殖
- 细胞因子诱导外周血单个核细胞的转录和蛋白表达研究
- 2013年
- 采用干扰素-γ、抗CD3单克隆抗体和IL-2体外诱导扩增外周血单个核细胞成为CIK细胞,并于诱导培养前及培养第15 d时分别收集细胞样本。在对培养前后细胞的增殖、形态及表面标志变化检测的同时,提取总蛋白进行定量、双向电泳和银染。利用ImageMasterTM软件对培养前后表达相同和不同的蛋白质点进行分析,并选择其中24个蛋白质点进行质谱鉴定。对于部分培养前后具有代表性的蛋白,进一步采用qPCR技术分析其的转录情况。结果表明,培养前后细胞的蛋白质组学特征是完全不同的,相同表达蛋白点主要与基因的转录因子和细胞骨架相关,诱导后特异表达蛋白主要与细胞生长、增殖相关。虽然在转录与蛋白水平上呈现出部分负相关现象,由于蛋白质组才是基因表达的最终形式,结合蛋白差异研究结果提示,经细胞因子诱导后,CIK细胞的大量扩增与细胞内蛋白表达改变相关。
- 魏传钰刘运洪庞伟孟明耀解燕华薛莎侯宗柳
- 关键词：CIK细胞蛋白质谱
- 肠道菌群代谢物脱氧胆酸对人脐带间充质干细胞hUC-MSCs增殖及细胞周期的影响
- 2023年
- 目的探讨肠道菌群代谢物次级胆汁酸DCA不同浓度和不同作用时间在体外环境下对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖和细胞周期的影响。方法CCK8及流式细胞仪检测在含不同浓度DCA(0.00µmol/L、1.56µmol/L、3.13µmol/L、6.25µmol/L、12.50µmol/L、25.00µmol/L、50.00µmol/L、100.00µmol/L、200.00µmol/L、400.00µmol/L、800.00µmol/L)干细胞培养基中培养hUC-MSCs 24 h、48 h、72 h后,干细胞增殖及细胞周期的变化。结果脱氧胆酸对hUC-MSCs增殖的影响体现在DCA剂量和作用时间两方面(两者交互作用,F=6.622,P<0.001);当浓度一定时,时间越长,细胞增殖越多;当作用时间一定时,浓度越高,细胞增殖抑制。浓度一定时,随时间的增加,细胞阻滞在G0/G1期的比例增加(P<0.001);不同作用时间DCA对hUC-MSCs的细胞周期表现为低浓度组细胞阻滞在G0/G1期和S期,高浓度组细胞阻滞在S期和G2/M期(P<0.001)。结论体外环境下,DCA对hUC-MSCs增殖及细胞周期的影响与浓度和作用时间相关。
- 梁彩红孟明耀李欣欣熊晶晶李檬李檬侯宗柳刘梅
- 关键词：肠道菌群代谢物脱氧胆酸人脐带间充质干细胞细胞周期
