吕智美
- 作品数：26 被引量：68H指数：4
- 供职机构：山东大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教委科研基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 罗格列酮对阿霉素肾病大鼠足细胞nephrin表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的建立阿霉素肾病模型,探讨罗格列酮对阿霉素肾病大鼠足细胞nephrin的表达的影响。方法21只大鼠随机分为3组。阿霉素肾病组和罗格列酮组大鼠予0.1%阿霉素溶液7 mg·kg^(-1)一次性尾静脉注射,罗格列酮组次日予罗格列酮5 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,每日1次,共8 wk。另外2组每日予等量自来水灌胃。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、血清清蛋白、血脂、肾功能及肾脏病理改变,并检测肾组织nephrin和TCFβ_1的表达。结果给药后2、4、6、8 wk,罗格列酮组大鼠24 h尿蛋白定量明显低于阿霉素肾病组(P<0.05),8 wk时其血清清蛋白高于阿霉素肾病组[(26.7±s 2.6)g·L^(-1)vs(21±4)g·L^(-1),P<0.05],血三酰甘油和胆固醇水平低于阿霉素肾病组(P<0.05)。与阿霉素肾病组比较,罗格列酮组大鼠肾组织中nephrin蛋白表达增高19%(P<0.05),而TGFβ_1蛋白表达明显降低(P<0.01),肾脏病理损害也明显减轻。结论罗格列酮可上调阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin表达,减少尿蛋白排泄,抑制其TGFβ_1表达,从而减轻肾组织病理损害。
- 陈利群甘华吕智美
- 关键词：肾病足细胞转化生长因子Β2多柔比星NEPHRIN罗格列酮
- 骨形成蛋白7能减轻TGF-β1诱导的人足细胞损伤被引量：4
- 2018年
- 目的:观察骨形成蛋白(bone morphogenie protein 7,BMP-7)抑制转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人足细胞转分化作用及其机制研究。方法:构建及鉴定pc DNA 3.1rh BMP-7质粒,体外培养人足细胞,先后予10、20、50、100、200μg/m L重组的BMP-7诱导足细胞,分别在培养24、48、72 h收集细胞,流式细胞试验检测细胞凋亡率,以此选择重组BMP-7最适的刺激浓度和最适的作用时间点。实验分为正常对照组、TGF-β诱导组(TGF-β)及质粒转染组(PEGF-BMP-7),质粒转染组加入重组BMP-7 100μg/m L预处理48 h后,而TGF-β诱导组和PEGF-BMP-7组分别予5 ng/m L TGF-β1处理足细胞后,通过免疫荧光观察足细胞Podocin、α-SMA、VIM的表达变化;收集细胞抽取总RNA和总蛋白,应用RT-PCR和Western blot观察重组BMP-7对人足细胞Podocin、α-SMA、VIM的m RNA和蛋白表达的影响。结果:(1)本实验成功构建pc DNA 3.1rh BMP-7质粒,转染的人足细胞能稳定表达BMP-7,质粒转染组BMP-7蛋白表达水平(0.487±0.012)较正常对照组(0.251±0.012)和TGF-β诱导组(0.151±0.015)明显增高(P<0.001);(2)Real-time PCR检测结果显示TGF-β诱导组足细胞Podocin的m RNA表达水平(0.285±0.013)较正常对照组(1.057±0.090)明显降低(P<0.001),而质粒转染组足细胞Podocin的m RNA表达水平(0.693±0.077)较TGF-β诱导组有升高趋势(P=0.003);TGF-β诱导组和质粒转染组足细胞的α-SMA(1.257±0.039和1.028±0.093)、VIM(1.114±0.097和0.821±0.059)的m RNA表达较正常对照组(0.357±0.089和0.403±0.020)明显升高(P<0.001),质粒转染组足细胞α-SMA和VIM的m RNA较TGF-β诱导组有下降趋势(P=0.011,P=0.002)。Western blot检测结果显示TGF-β诱导组足细胞Podocin的蛋白表达水平(32.923±5.301)较正常对照组(101.807±9.208)明显降低(P<0.001),而质粒转染组足细胞Podocin的蛋白表达水平(90.507±7.810)较TGF-β诱导组有升高趋势(P<0.001);TGF-β诱导组和质粒转染组足细胞的α-SMA(116.1
- 陈利群吕智美葛俭俭余心逸甘华
- 关键词：骨形成蛋白7转化生长因子Β1上皮细胞转分化
- UCP2通过调控mTOR对LPS诱导的HK2细胞自噬产生影响被引量：3
- 2020年
- 目的探讨线粒体解耦联蛋白2(uncouplingprotein2,UCP2)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肾小管上皮细胞(HK2细胞)自噬中的作用机制。方法以HK2细胞为研究对象,采用不同质量浓度LPS(0,0.1,0.5,1,5μg/ml)干预不同时间(0,12,24,48 h),Western blot检测HK2细胞UCP2蛋白水平变化。并将HK2细胞分为4组:正常对照组,LPS组(LPS induced),UCP2shRNA组(UCP2 shRNA+LPS)和UCP2 scramble组(UCP2 scramble+LPS),LPS为1μg/ml,24 h。利用Real-time PCR和Western blot检测HK2细胞UCP2 mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测线粒体动力相关蛋白1(Drp1)表达变化,Western blot检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)、Drp1,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B,凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved-Caspase-3以及mTOR的蛋白表达水平。结果 Western blot结果显示,1μg/ml LPS处理的HK2细胞,在12 h和24 h UCP2蛋白的水平较对照组明显增加(P<0.05);0.1,0.5和1μg/ml的LPS刺激24 h,UCP2水平与对照组相比逐渐增加。使用1μg/ml的LPS刺激24 h,免疫荧光和Western blot发现,UCP2, Drp1较对照组明显增加,Mfn2表达减少(P<0.05),而转染UCP2 shRNA后,可显著抑制UCP2, Drp1水平的增加以及Mfn2水平的降低(P<0.05)。同时,Western blot发现LPS组自噬相关蛋白Beclin-1,LC3B,促凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3明显增加(P<0.05),抗凋亡相关蛋白Bcl-2水平降低(P<0.05),而转染UCP2 shRNA后,Beclin-1,LC3B,Bcl-2表达水平降低,Cleaved-Caspase-3水平进一步增加(P<0.05)。Western blot结果显示转染UCP2 shRNA组p-mTOR水平较正常组和LPS组明显增加(P<0.05);而mTOR蛋白水平各组间无统计学差异(P>0.05)。结论 UCP2在LPS诱导的HK2细胞损伤中通过自噬发挥保护作用。
- 乔娇苏红吕智美
- 关键词：肾小管上皮细胞UCP2自噬
- 代谢综合征与肥胖相关性蛋白尿及临床处理
- 2005年
- 邓华聪吕智美
- 关键词：代谢综合征腹型肥胖蛋白尿危险因素聚集脂代谢紊乱
- 辛伐他汀降低脂质肾损害大鼠肾组织中骨调素表达
- 2010年
- 目的观察高脂血症肾损害大鼠肾组织中骨调素(OPN)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达变化及辛伐他汀对其表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、高脂组、辛伐他汀治疗组,每组10只。观察12周。实验监测尿蛋白量、血脂、肾功能及肾组织病理学改变;免疫组化技术检测肾组织MCP-1表达,用RT-PCR、免疫印迹检测OPNmRNA和蛋白表达。结果实验结束时,高脂模型组及辛伐他汀组血清TC、TG、LDL-C、24 h尿蛋白显著高于对照组(P<0.01);辛伐他汀组血清TC、TG、LDL-C、24 h尿蛋白明显低于高脂组(P<0.01),而HDL-C则明显高于高脂组(P<0.01);高脂组大鼠肾小球系膜细胞增生,系膜区增宽,小管间质炎性细胞浸润,而辛伐他汀组病理改变较高脂组有所减轻;高脂组和辛伐他汀组大鼠肾组织中MCP-1、OPNmRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01);而辛伐他汀组大鼠肾组织中上述指标的表达较高脂组有明显下调(P<0.05);肾组织中OPN蛋白表达与其MCP-1表达和尿蛋白量呈高度正相关。结论辛伐他汀可能通过降低大鼠肾组织中OPN和MCP-1的表达而减轻小管间质巨噬细胞浸润,从而降低了高脂血症肾损害。
- 陈利群甘华吕智美
- 关键词：高脂血症辛伐他汀骨调素
- 糖尿病血管并发症的分子机制及干预研究
- 邓华聪邱鸿鑫郑丹魏倩萍曹文富葛倩郑宏庭刘东方李启富杨刚毅兰丽珍李丙蓉刘金波诸葛福媛吕智美程伟
- 本项目建立了多项可在临床广泛应用的新检测手段，如测定红细胞膜磷脂成分的正相HPLC法、外周血磷酸化P38MAPK测定方法等和多项经临床和动物实验证实有效的治疗措施。该项成果对提示糖尿病血管并发症的分子机制，开辟新的治疗途...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病血管并发症干预分子机制
- 血浆置换对系统性红斑狼疮患者外周血中高迁移率族蛋白-1水平的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨血浆置换(Plasmapheresis)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血高迁移率族蛋白-l(highmobility group box chromosomal protein l,HMGBl)、肿瘤坏死因子-α(tu-mornecrosis factor-α,TNF-α)等炎症介质水平的影响,同时观察血浆置换对患者临床症状及预后的影响。方法随机选取2008～2010年收治于山东大学附属省立医院肾内科的重症狼疮患者22例,依据1997年修订的SLE分类标准的诊断标准,在糖皮质激素及其冲击疗法基础上给予血浆置换。分别留取血浆置换治疗前(T0)、治疗开始后2 h(T1)及血浆置换停止后12 h(T2)各时间点的右侧桡动脉血标本5 mL,高速离心后取血清-20℃保存,采用ELSIA方法检测动脉血清的HMGB1浓度,放射免疫法检测其中TNF-α的浓度。结果患者血浆置换前血清的HMGB-l浓度为(6.924±2.832)ng/mL,血浆置换2 h为(4.166±2.172)ng/mL,下降到最低,血浆置换停止后12 h稍有回升,为(4.872±2.098)ng/mL,仍低于血浆置换前浓度,差异均有统计学意义(P<0.05)。血浆置换前血清中的TNF-α浓度为(81.11±14.06)pg/mL,血浆置换2 h为(50.46±12.99)ng/mL,血浆置换停止后12 h稍有回升,为(61.87±14.09)ng/mL,仍低于血浆置换前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血浆置换可显著降低系统性红斑狼疮患者外周血中HMGB-1及TNF-α浓度,有利于控制患者病情恶化,为进一步应用免疫抑制剂治疗争取时间。
- 胡梦思吕智美林建功王荣王群
- 关键词：血浆置换系统性红斑狼疮高迁移率族蛋白-1炎症介质
- 266例成人及儿童肾小管酸中毒临床特征分析被引量：4
- 2018年
- 目的分析和比较成人及儿童肾小管酸中毒（RTA）的临床特征。方法收集山东省立医院1991年1月至2017年9月收治的RTA患者的临床资料，按照患者年龄分为成人组和儿童组。回顾性分析成人及儿童肾小管酸中毒临床表现和特点。结果成人组206例，儿童组60例。成人组RTA以继发性（89．81％）多见，最常见病因为原发性干燥综合征。儿童组RTA以原发性（81．67％）多见，继发病因多为系统性遗传代谢病。成人组及儿童组RTA均以Ⅰ型最为常见，Ⅱ型多见于儿童原发性肾小管疾病。首发／主诉症状常为多饮、多尿（41．4％）和疲乏、肌无力（35．3％）。儿童组以生长发育迟缓、佝偻病和胃肠道症状等表现突出。RTA误诊及漏诊率为41．4％。治疗包括对症、病因治疗及防治并发症。95．5％的患者经治疗后病情好转。结论RTA病因复杂，临床表现多样。成人以继发性多见，儿童以原发性多见。应提高对儿童RTA的重视程度，降低漏误诊率及致畸率。
- 申丛榕于澈张璐苏文燕吕智美王荣
- 关键词：肾小管酸中毒成人儿童干燥综合征
- P38MAPK在脂多糖引起的腹膜间皮细胞损伤中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨脂多糖(LPS)引起人腹膜间皮细胞(HPMC)损伤中分泌MCP-1以及LPS、P38MAPK、MCP-1三者之间可能存在的关系。方法体外培养永生化人腹膜间皮细胞(HPMC),随机分为正常对照组、LPS作用24 h组、LPS作用48 h组、特异性P38MAPK阻断剂SB203580+LPS作用24 h组、SB203580+LPS作用48 h组;Western blot法检测各组MCP-1和磷酸化P38MAPK蛋白表达水平;Real-time PCR法检测各组MCP-1 mRNA表达水平。结果 1.10 mg/L LPS刺激使HPMC的MCP-1 mRNA和蛋白质表达均较正常对照组增加(P<0.05)。10 mg/L LPS作用48 h后MCP-1 mRNA和蛋白质表达水平均高于24 h组(P<0.05);Western blot结果显示,与正常组对比,10 mg/L LPS作用使磷酸化P38MAPK蛋白水平明显升高(P<0.05)。10 mg/L LPS作用48 h与作用24 h对比升高不明显(P>0.05);经5μmol/L SB203580预处理30 min后再予以LPS刺激与单纯LPS刺激相比较,MCP-1蛋白质和mRNA均明显降低(P<0.05);SB203580预处理后再予以LPS分别刺激24 h和48 h 2组相比较,MCP-1蛋白及mRNA水平差异不明显(P<0.05)。结论 LPS通过磷酸化P38MAPK,导致MCP-1表达水平升高,诱发腹膜间皮细胞的损伤。
- 任晓旭吕智美王荣王群
- 关键词：P38MAPKMCP-1腹膜间皮细胞脂多糖
- FLT-1启动子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:为探索FLT-1启动子靶向调控活性分析,克隆FLT-1启动子基因序列,构建并鉴定FLT-1启动子调控的荧光素酶报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增FLT-1启动子序列,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic-luc中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc,通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定。结果:通过酶切鉴定及基因测定证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变。结论:成功构建了含有FLT-1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及血管疾病的基因治疗奠定基础。
- 诸葛福媛吕智美郑宏庭邓华聪
- 关键词：启动子基因治疗
