韩颖颖
- 作品数：38 被引量：86H指数：4
- 供职机构：上海理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白(PGRP-LB)序列分析及其原核表达被引量：1
- 2020年
- 目的分析斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白PGRP-LB的序列,表达和纯化PGRP-LB蛋白。方法采用生物信息学方法分析PGRP-LB蛋白的序列。以斯氏按蚊的cDNA为模板PCR扩增PGRP-LB,采用无缝克隆的方法将其克隆到原核表达载体pET28a中,然后转化入大肠埃希菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE凝胶电泳及考马斯亮蓝染色检测PGRP-LB的表达情况。经镍离子亲和层析纯化后,Bradford法检测洗脱液的浓度。通过MEGA7软件构建系统进化树,进行PGRP-LB的进化分析。结果成功获得pET28a-PGRP-LB的重组质粒,37℃、0.5mmol/L的IPTG能诱导出大量的包涵体PGRP-LB重组蛋白,相对分子质量约为26×103,纯化后的蛋白浓度为0.5mg/ml。进化分析显示,斯氏按蚊PGRP-LB与同科物种间亲缘关系较近。结论成功使用大肠埃希菌原核表达系统表达斯氏按蚊PGRP-LB蛋白,为该蛋白在按蚊体内的定位及功能研究奠定了基础。
- 姜欣伶宋秀梅王敬文韩颖颖
- 关键词：斯氏按蚊原核表达
- 真空冷却鸡胸肉优势腐败菌生长模型的预测被引量：3
- 2021年
- 为探究真空冷却对鸡肉保质期的影响,预测鸡胸肉内的微生物生长规律。对鸡胸肉进行了冷风冷却和真空冷却,测量其在贮藏期间菌落总数变化,证明真空冷却有助于延长鸡肉保质期。采用巢式PCR-DGGE结合传统测定微生物的方法研究了真空冷却后的鸡胸肉在5℃冷藏期间,鸡胸肉的表面菌相变化,确定了假单胞菌为贮藏期间的优势腐败菌。并以菌落总数、优势腐败菌总数作为微生物指标,以TVB-N、pH作为理化指标,确定了冷鲜鸡胸肉中微生物的最小限量为5.373(lg(CFU/g))。通过将冷却的鸡胸肉置于0~25℃不同的温度下,建立了微生物生长的一级模型和二级模型,并对其进行了验证和评价,结果表明,所建立的数学模型可以较好地预测优势腐败菌的生长趋势。
- 莫凡李玲韩颖颖刘宝林
- 关键词：真空冷却鸡胸肉假单胞菌动力学模型
- 程序降温过程中吲哚乙酸对生菜种子抗低温胁迫的影响被引量：2
- 2017年
- 种子是植物越冬的重要生存策略,种子低温保存是种质资源保存的主要方式。选取含水生菜种子作为研究对象,利用程序降温仪制造不同的降温速率(3℃/h和60℃/h),研究吲哚乙酸(IAA)对种子抗寒性的影响。结果表明,相比于快速降温(60℃/h),慢速降温(3℃/h)有利于生菜种子内源IAA的积累。外源施加IAA可以降低程序降温(经慢速降温后更显著)过程中生菜种子的冷冻伤害,其中以200μm的IAA对种子进行预处理效果最显著。无论降温速率如何,生菜种子遇到低温胁迫后SOD活性和脯氨酸含量会显著增加。外源施加IAA浓度越高,对SOD活性产生抑制作用,而IAA对脯氨酸含量有促进作用。降温速率以及外源IAA浓度也会对冷相关的ICE 1、HOS 1基因的相对表达量产生影响。
- 张晨雪韩颖颖李维杰刘宝林沈梦琪周强
- 关键词：吲哚乙酸抗寒性低温胁迫
- 小白菊内酯及降温速率对含水生菜种子抗冷性的影响被引量：1
- 2016年
- 以生菜Lactuca sativa含水种子为试材,通过添加外源动物泛素E3连接酶激活剂小白菊内酯(Parthenolide),及不同降温速率的程序降温处理,研究Parthenolide对程序降温过程中生菜种子抗冷性的影响。结果表明,无论在快速(60℃·h^(-1))还是慢速(3℃·h^(-1))降温过程中,添加Parthenolide都会抑制生菜种子对低温的耐受性,而且发芽率明显比对照组低,这种降低程度在降温至-20℃时最为明显,说明在程序降温过程中,泛素化调控通路参与种子对冷冻的响应。通过实时定量荧光PCR对泛素化相关基因和ICE1基因的表达分析表明,Parthenolide抑制了慢速降温过程中环指型E3连接酶COP1和抗冻因子ICE1的m RNA表达水平。Parthenolide对SOD活性的影响进一步证明其影响种子在程序降温过程中的耐冻性机制。
- 沈梦琪韩颖颖周强李维杰刘宝林
- 关键词：生菜种子小白菊内酯
- 分子生物学教学技巧——分子生物学相关的轶事趣闻
- 2017年
- 分子生物学是一门比较抽象的学科。在课堂教学中容易出现枯燥、学生难以集中注意力听讲的现象,所以在分子生物学教学中,如果能够加入一些与分子生物学发展相关的名人趣事,则会起到调动气氛,同时帮助理解一些基本原理的作用。本文就分子生物学技术原理和应用中的典型趣事趣闻进行总结,为从事相关教学的教师提供借鉴。
- 韩颖颖刘宝林周国燕周新丽李维杰
- 关键词：分子生物学教学
- 蝴蝶兰PhAP3基因的表达特性研究被引量：11
- 2010年
- 为了探索蝴蝶兰中MADS盒基因在花发育过程中对花器官发育的调控机制,目前从蝴蝶兰中克隆出一个MADS盒基因家族B族基因PhAP3,并对其进行了序列分析和基因表达研究.聚类分析结果表明PhAP3是拟南芥AP3基因的同源基因,但基因表达分析表明PhAP3可以在植物的营养器官和生殖器官中均有表达,这与典型的AP3类基因有所不同.
- 张浩郭滨李敏韩颖颖明凤
- 关键词：MADS盒基因
- 蝴蝶兰花质性状优良蝴蝶兰的分子育种技术建立与应用
- 明凤韩颖颖李敏郭滨周学青邹好敏张友彬胡楠
- 该项目属花卉基因工程和分子标记辅助性育种技术。素有“兰花皇后”美誉的蝴蝶兰，在观赏方面和国际花卉市场上都占有重要地位。蝴蝶兰栽培以及无性繁殖研究占据主导地位，但对其花质遗传特征在国内外领域中的研究却很薄弱。该项目系统地从...
- 关键词：
- 关键词：分子育种基因表达
- 拟南芥Argonaute1/2/4/5序列分歧以及与特定miRNA的协同表达(英文)被引量：1
- 2015年
- Argonaute(Ago)是RNA诱导的基因沉默复合体(RISC)中的一个重要组成部分,在RNA沉默通路中结合小RNA发挥着关键的作用.本文对12个物种的85个Ago/Ago-like基因序列进行了系统发育进化分析.结果表明,植物Ago可被分为3大分支,且基因在物种产生分歧之前就已经发生了重复.3个分支之间高同义和非同义突变频率揭示了Ago蛋白家族功能的高度保守性.采用实时荧光定量PCR对拟南芥Ago1/2/4/5在不同发育阶段和胁迫条件下的表达情况进行了分析.结果显示,Ago1在拟南芥幼苗和成熟组织中表达显著;与23℃(最适温度)相比,16℃(亚适温度)条件下,Ago1表达量显著下调,Ago5表达量则显著上调;在脱水胁迫下,Ago5表达量下调,Ago4表达量上调.另外,根据5'端碱基类型不同,188 954个幼苗miRNAs和2 047 843个成熟组织miRNAs被分类.结果显示,5'端为U的miRNAs在植物中的含量最多,这与Ago1表达量最高是协同的;16℃条件下,5'端为C的miRNAs和Ago5表达协同上调.这些结果都表明,Ago蛋白及其偏好的miRNAs是协同表达的.
- 赵文文韩颖颖刘宝林王志翠
- 关键词：系统发育分析ARGONAUTE脱水胁迫
- 植物低温应答机制及其泛素化修饰研究进展被引量：1
- 2017年
- 植物在低温条件下的机体应答主要依赖于植物内部的细胞调控机制。文中综述低温胁迫对植物细胞内信号转导、基因表达、泛素化等修饰方式以及脯氨酸、可溶性糖、SOD酶活性等代谢调节的影响,以期为植物抗低温研究提供借鉴。
- 周强韩颖颖
- 关键词：低温胁迫信号基因表达泛素化修饰代谢
- 鲅鱼贮藏过程中的品质变化和货架期预测被引量：6
- 2016年
- 将感官、微生物和化学变化作为检测指标,对鲅鱼(Scomberomorus niphonius)在0℃、4℃、15℃、22℃和25℃贮藏过程中的品质变化和货架期进行研究。通过化学分析研究,对菌落总数(TVC)、挥发性盐基氮(TVB-N)、三甲胺(TMA)与感官评价的一致性进行探讨。结果表明,在0℃、4℃、15℃、22℃和25℃贮藏过程中鲅鱼较好品质的时期分别为192h、144h、24h、18h和12h,货架期终点分别为240h、192h、48h、24h和20h。各个温度条件下,鲅鱼贮藏过程中较好品质期和货架期终点的TVB-N平均值分别为(22.88±1.98)mg/100g、(49.40±2.40)mg/100g;TMA均值为(11.67±1.88)mg/100g、(18.88±2.75)mg/100g;菌落总数分别为(4.01±0.49)lg(CFU/g)、(6.17±0.49)lg(CFU/g);产H2S菌数分别为(3.28±0.63)lg(CFU/g)、(5.78±0.65)lg(CFU/g),、假单胞菌数分别为(3.60±0.39)lg(CFU/g)、(6.12±0.50)lg(CFU/g)。可知TVB-N、TMA、菌落总数、产H2S菌、假单胞菌作为鲅鱼贮藏过程中的鲜度指标与感官评价具有一致性。
- 张晨雪韩颖颖王晓
- 关键词：感官评价货架期
