陈建林
- 作品数:9 被引量:16H指数:2
- 供职机构:广东海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金深圳市科技计划项目广东省国际科技合作项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 鰤鱼诺卡氏菌HYD基因的克隆及亚细胞定位研究被引量:2
- 2018年
- 鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原。鰤鱼诺卡氏菌水解酶(hydrolase,HYD)可能是鰤鱼诺卡氏菌的毒力因子。研究结果表明鰤鱼诺卡氏菌HYD的肽段不是分泌蛋白。亚细胞定位研究发现HYD-GFP融合蛋白均匀地分布在胖头鲤(FHM)细胞的细胞质中。亚细胞定位和过表达研究都显示HYD蛋白在FHM细胞中表达后,细胞核出现固缩浓染、凋亡小体等细胞凋亡特征,但Caspase-3活性检测表明HYD并未显著增加细胞凋亡水平。研究为进一步了解鰤鱼诺卡氏菌的致病机理奠定了基础。
- 陈建林陈建林鲁义善徐亮鲁义善徐亮
- 关键词:水解酶亚细胞定位
- 鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的组织病理学研究
- 人工养殖乌斑杂交鳢(Channa maculate♀×C. argus♂)受鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)侵害日益严重,为深入研究该菌的致病机理,鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的感染模型亟待建立。本研究通...
- 王文基陈建林侯素莹鲁义善夏立群
- 文献传递
- 鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的组织病理学研究被引量:12
- 2019年
- 人工养殖乌斑杂交鳢(Channa maculate♀×C.argus♂)受鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)侵害日益严重,为深入研究该菌的致病机理,鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的感染模型亟待建立。本研究通过对菌液浓度与吸光值、半致死剂量、组织病理学和病理组织切片等方面进行研究。结果表明菌液浓度为4.75×10^4~4.75×10^7 cfu/mL范围时与其吸光值呈线性关系。通过人工感染实验,确定鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的半致死剂量(LD50)为1.52×10^5 cfu/尾。组织病理学分析发现,鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢会引起皮肤溃烂、内脏器官肿大,形成白色结节。病理组织切片显示,结节中心呈干酪样坏死,周围有大量细胞浸润。研究结果为建立鰤鱼诺卡氏菌感染乌斑杂交鳢的动物模型及研究鰤鱼诺卡氏菌致病机制提供科学依据。
- 王文基王文基侯素莹陈建林夏立群
- 鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株及其应用
- 本发明涉及一种鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株及其应用,属于菌株诱变技术领域;具体为一株鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株,命名为鰤鱼诺卡氏菌NSX1 (Nocardia seriolae NSX1),菌种保藏号为CGMCC NO.9437;...
- 夏立群陈建林鲁义善简纪常蔡佳张红莲
- 文献传递
- 鰤鱼诺卡氏菌SOD基因克隆与表达及其酶活性质测定被引量:1
- 2019年
- 鱼类的诺卡氏菌病主要由鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)引起。为探讨鰤鱼诺卡氏菌的毒力因子及其感染致病机制,本研究通过对鰤鱼诺卡氏菌全基因组序列的分析,发现了一个编码超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的基因。生物信息学分析显示该基因编码一个分泌蛋白,可能是鰤鱼诺卡氏菌潜在的毒力因子。本研究通过基因克隆获取了鰤鱼诺卡氏菌SOD基因(NsSOD),其长度为624 bp。利用双酶切技术在含有GST标签的原核表达载体pGEX-6P-1中插入NsOD基因片段,成功构建了其重组表达载体并命名为pGEX-SOD。将pGEX-SOD导入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,获得了原核表达菌株BL21/pGEXSOD并对其诱导表达条件进行了摸索,确定25℃、IPTG(1 mmol/L)诱导14 h,可成功获得具有生物活性的可溶性NsSOD重组蛋白。随后利用GST标签亲和柱纯化NsSOD重组蛋白,并进行酶活性质测定,确定NsSOD重组蛋白的活性为2.76酶活力单位。通过对NsSOD进行基因克隆、原核表达、重组蛋白纯化及体外酶活性质测定,为进一步研究NsSOD的功能和深入了解鰤鱼诺卡氏菌的致病机理奠定了基础。
- 侯素莹黄嘉慧陈建林陈建林鲁义善王文基
- 关键词:超氧化物歧化酶原核表达蛋白纯化
- 鰤鱼诺卡氏菌与黄粉色诺卡氏菌原生质体融合的研究
- 2016年
- 鰤鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原,黄粉色诺卡氏菌为一种近缘无毒环境诺卡氏菌.本实验研究主要以鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌为两亲本,开展了原生质体融合研究.针对诺卡氏菌细胞壁厚的特性,本实验对原生质体制备时的溶菌酶脱壁时间进行了筛选,确定鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌的最佳脱壁时间分别是65 min和100 min.用聚乙二醇促使两亲本菌的原生质体融合后,通过选择性培养基培养、菌落形态筛选、革兰氏染色观察、16S rRNA测序等方法,对融合菌株进行了初步鉴定.鉴定结果表明:融合菌株的菌落形态较两亲本发生了改变,为革兰氏阳性菌,通过16S rRNA基因序列比对,其与鰤鱼诺卡氏菌的同源性为99%.融合菌株的毒力较鰤鱼诺卡氏菌野生株有所降低.本研究为鰤鱼诺卡氏菌活疫苗的研制提供了新思路,对鱼类诺卡氏菌病的防治具有一定的潜在价值.
- 王英华陈建林徐亮张红莲夏立群
- 关键词:原生质体融合
- 鰤鱼诺卡氏菌HYD基因的克隆及亚细胞定位研究
- 鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原。有研究表明水解酶是病原微生物的重要致病因子之一。鰤鱼诺卡氏菌全基因组序列分析发现了一个水解酶(hydrolase,HYD)基因,生物信息学分析...
- 陈建林苏泽杰鲁义善徐亮张红莲夏立群
- 关键词:水解酶亚细胞定位
- 鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株及其应用
- 本发明涉及一种鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株及其应用,属于菌株诱变技术领域;具体为一株鰤鱼诺卡氏菌诱变弱毒株,命名为鰤鱼诺卡氏菌NSX1(NocardiaseriolaeNSX1),菌种保藏号为CGMCCNO.9437;一种免疫...
- 夏立群陈建林鲁义善简纪常蔡佳张红莲
- 文献传递
- 鰤鱼诺卡氏菌与绛红色诺卡氏菌的融合菌研究被引量:1
- 2017年
- 鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)为鱼类诺卡氏菌病的主要病原,绛红色诺卡氏菌(N.purpurea)是分离自土壤中一种无毒诺卡氏菌。以鰤鱼诺卡氏菌和绛红色诺卡氏菌为亲本进行原生质体融合,获取融合菌。经生长特征观察、革兰染色、16SrRNA测序分析,对融合菌进行初步鉴定,并通过斑马鱼模型评估融合菌毒力检测和免疫保护效果。结果表明,融合菌的菌落形态与亲本菌株不同,为诺卡氏菌属革兰阳性菌,融合菌的毒力较鰤鱼诺卡氏菌野生株降低70%,免疫保护率约为50%。
- 陈建林严聪羚张红莲苏泽杰夏立群
- 关键词:原生质体融合毒力免疫保护