海藻糖是昆虫的血糖,在昆虫体内主要通过海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)催化合成。本研究通过同源克隆和cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术,从异色瓢虫Harmoniaaxyridis中克隆得到了TPS基因的cDNA全长序列,命名为HaTPS(GenBank登录号:FJ501960),全长2949bp,包含3'非翻译区为505bp,5'非翻译区为26bp,开放阅读框长2418bp,共编码805个氨基酸。软件分析显示该基因编码蛋白的分子量为90.58kD,等电点为7.01,包含两个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构。同源比对分析发现,昆虫中TPS基因高度保守,包含两个保守的结构域。同时,采用实时荧光定量PCR技术对异色瓢虫HaTPS在不同发育阶段、低温诱导条件下的表达量进行了研究。结果表明:HaTPS在预蛹期的表达量最高;在短时低温诱导条件下,HaTPS的表达量随着温度的降低而显著升高,在降温和升温处理条件下,HaTPS的表达量呈现先升高后下降的表达趋势。结果表明,TPS基因在昆虫抗逆中起到了重要的调节作用。昆虫经过低温诱导,其TPS基因的调控能力得到提升。
