杨莹莹
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目公益性行业(农业)科研专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 虎源FPV主要抗原表位区基因的原核表达及免疫原性分析
- 2014年
- 为筛选出制备猫瘟热亚单位疫苗的最佳佐剂类型与首选抗原片段,本试验对虎源FPV-HLJ株VP2全长基因及其截短基因片段PAB进行原核表达,切胶法纯化的表达蛋白经Western blot分析后,分别与氢氧化铝胶佐剂及弗氏佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠体液免疫水平,初步评价各疫苗的免疫效果。结果表明:VP2、PAB融合蛋白主要以包涵体形式表达,切胶法获得的高纯度表达蛋白均能与鼠抗虎源FPV阳性血清发生特异性反应。纯化蛋白各佐剂免疫组免疫小鼠后均引起较强的特异性抗体IgG反应,其中PAB蛋白各免疫佐剂组抗体水平明显高于VP2蛋白相应免疫佐剂组,且PAB蛋白+氢氧化铝胶组与PAB蛋白+弗氏佐剂组抗体水平无显著差异(P>0.05),但与未加佐剂组差异显著(P<0.01)。研究证实,PAB蛋白具有良好的免疫原性,可与氢氧化铝胶佐剂协同用于FPV亚单位疫苗的制备。
- 杨莹莹田丽红曾祥伟
- 关键词：猫瘟热病毒原核表达VP2蛋白免疫原性
- 特种野生动物防御素的研究进展
- 2015年
- 防御素是一类富含半胱氨酸的内源性小分子阳离子抗菌肽,广泛分布于黏膜上皮细胞和中性粒细胞中,在先天性免疫和获得性免疫中具有重要作用。迄今为止,防御素在人、鼠、家畜、家禽等物种中的研究比较深入,但在野生动物及特种经济动物领域的研究还很有限,文章结合已有的研究成果,对防御素在特种野生动物体内的来源与分布、种类与功能等方面进行了综述,并对其应用前景作出了展望。
- 郭华杨莹莹田丽红
- 关键词：野生动物经济动物防御素
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达、纯化及抗原性分析被引量：6
- 2016年
- 为了获取大量的有良好抗原性的猪圆环病毒2型（PCV-2）重组Cap蛋白,用于PCV-2抗体检测试剂盒的研制,试验对PCV-2 ORF2全长基因进行扩增,构建重组表达质粒p ET-30a-Cap,转化E.coli BL21（DE3）,在SDS-PAGE分析基础上,结合Image J和Graphpad prism 5.0软件的分析,对重组菌E.coli BL21（p ET-30a-Cap）表达条件进行了优化,诱导产物纯化后,经SDS-PAGE分析及Western-blot鉴定其抗原性。结果表明：重组Cap蛋白的最佳表达条件是当菌体浓度（OD600值）达到1.0~1.5时,加入终浓度为0.2 mmol/L的IPTG,37℃恒温摇床175 r/min振荡培养5 h;纯化获得高纯度的重组Cap蛋白,且该蛋白具有良好的反应原性。说明表达的重组Cap蛋白具有良好的抗原性,能为检测PCV-2抗体的间接ELISA试剂盒的研制提供诊断抗原。
- 杨莹莹刘永刚郝立沙王刚涂亚斌佟杰田丽红蔡雪辉
- 关键词：PCV-2ORF2CAP蛋白抗原性
- 猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2015年
- 为了快速准确检测猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）并对病毒拷贝数进行定量,试验根据Gen Bank中PCV-2保守序列（登录号为FJ644559.1）设计1对特异性引物和Taq Man探针,制备标准品,建立PCV-2的荧光定量检测方法,并对临床样品进行检测。结果表明：该方法在1×10^1~1×10^8拷贝/μL的模板范围内具有良好的线性关系,相关系数可达0.999;敏感性是常规PCR方法的100倍;对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）均为阴性,没有交叉反应;批内、批间重复试验变异系数均小于2.50%;在临床检测中,比常规PCR方法检测PCV-2的阳性检出率高出38%。说明试验成功建立了PCV-2 Taq Man荧光定量PCR检测方法,可用于临床检测PCV-2感染及对其拷贝数进行定量。
- 郝立沙张璐佟杰于颖杨莹莹张武超涂亚斌蔡雪辉
- 关键词：探针标准品拷贝数
