公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

人COX6B1在哺乳动物细胞株中转染表达与定位的初步研究被引量：4: 2012年; 目的构建带FLAG标签的人野生型细胞色素氧化酶亚基COX6B1表达载体,转染至HEK 293T、COS7细胞观察COX6B1蛋白在细胞内表达与定位。方法以含人COX6B1全长cDNA序列的质粒为模板,通过上游带有FLAG标签的引物,PCR方法扩增出COX6B1全长序列,然后插入真核表达载体pCDNA3.1中构建pCDNA3.1-FLAG-COX6B1表达载体。将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位。结果成功构建了pCD-NA3.1-FLAG-COX6B1表达载体,其在HEK 293T细胞中能有效地表达;在COS7细胞中呈斑点状分布,且主要在胞质内分布,细胞核中未见其明显表达。结论 COX6B1在HEK293T、COS7细胞中均有表达,且主要分布在胞质内,这为进一步了解COX6B1的功能提供了一定的基础。; 刘君耿慧武陈应炉刘晓颖范礼斌; 关键词：基因表达转染细胞定位

孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp在哺乳细胞株的转染表达与定位被引量：2: 2011年; 目的将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pC-DGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况。方法用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的质粒转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位;转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,利用GFP抗体进行Western blot检测。结果荧光显微镜观察表明,Depp蛋白主要分布在COS7细胞的胞质内,在细胞核周呈斑块状分布,在细胞核未见到明显表达,在HEK293T细胞中能有效表达。结论成功构建pCDGFP-Depp表达载体并确定Depp蛋白在哺乳细胞株中能有效表达。; 陈应炉朱恒锐杨军耿慧武刘君刘晓颖范礼斌; 关键词：转染蜕膜孕酮蛋白质类

人cystatinB基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达被引量：2: 2012年; 目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人cystatinB真核表达载体,用其转染COS-7和HEK 293 T细胞观察cystatin B在增殖细胞内的定位;转染HEK 293 T细胞检测其表达。方法设计带FLAG-tag的引物,以人cystatin B全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增cystatin B全长序列,然后插入pCDNA 3中构建pCDNA 3-cystatin B-FLAG(CSTBF)质粒;脂质体法转染至COS-7、HEK 293 T细胞,荧光显微镜下观察其在细胞内定位;转染至HEK 293 T细胞,提取细胞总蛋白进行Western blot。结果正确构建了pCD-NA 3-cystatin B-FLAG质粒;定位实验表明在COS-7和HEK293 T细胞中,cystatin B主要分布在细胞核内,核膜处更集中,胞浆内也有广泛分布;Western blot结果表明该质粒能在细胞中有效表达。结论该研究结果为了解cystatin B在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。; 耿慧武刘君陈应炉杨军刘晓颖范礼斌; 关键词：细胞定位转染免疫荧光

人MT2A基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达被引量：2: 2013年; 目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人金属硫蛋白2A(MT2A)真核表达载体,用其转染HEK 293T,COS-7细胞观察MT2A在增殖细胞内的表达和定位。方法设计带FLAG-tag的引物,以人MT2A全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增MT2A全长序列,然后插入pCDNA 3.1中构建pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;将构建的质粒转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;脂质体法转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察MT2A表达的蛋白在细胞内定位。结果正确构建了pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;其在HEK 293T细胞中能有效地表达;免疫荧光实验表明在COS-7细胞中,MT2A主要分布在细胞质内。结论该研究结果为了解MT2A在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。; 李新颖潘林鑫耿慧武刘君刘晓颖范礼斌; 关键词：金属硫蛋白细胞定位转染免疫印迹

COX6B1蛋白与Sedlin蛋白相互作用及COX6B1蛋白对细胞色素氧化酶功能影响的初步研究: 目的运用酵母双杂交技术研究COX6B1蛋白与Sedlin蛋白的相互作用；构建带FLAG标签的COX6B1蛋白及COX6B1蛋白R20H、D74A两个点突变体的真核表达载体，分别转染至COS7细胞，观察它们在哺乳动物细胞内...; 刘君; 关键词：酵母双杂交系统免疫共沉淀蛋白相互作用; 文献传递

全选清除导出

共1页<1>

刘君