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张玲: 作品数：75 被引量：217H指数：7; 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金工业生物技术教育部重点实验室基金更多>>; 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程理学更多>>

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挖掘专业应用拓宽就业渠道: 2008年; 面对不断变化的就业新形势,生物工程领域的人才要有新理念、新思路,在充分认清本专业应用范围及求职面的基础上,还要正确认识其职业生涯及其发展规律。只有突破传统的就业观念的束缚,并且树立正确的就业态度,才能够进一步拓宽就业渠道。; 杨海麟孔静静张玲王长城王武; 关键词：专业人才需求拓宽就业渠道就业态度

高密度培养重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶的策略: 2009年; 以重组大肠杆菌发酵生产胆固醇氧化酶,依据溶解氧的变化控制底物的流加速率,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,最高密度达85(OD600)。在此基础上确定了最佳的诱导时机为发酵中期,菌体产酶水平达.583(1.6U/L,产酶速率为971.77 U·L-1·h-1,生产强度为388.71U·L-1·h-1,实现了胆固醇氧化酶的高效生产。; 王长城孙艳张玲王武杨海麟; 关键词：胆固醇氧化酶分批补料

基于温控载体表达胆固醇氧化酶被引量：2: 2016年; 胆固醇氧化酶在医药检测、食品加工、农业生产等方面都有重要的应用价值。以来源于Rhodococcus sp.的胆固醇氧化酶基因为研究对象,构建于温控表达载体p Hsh上,免去了诱导剂的使用,采用温度调控使胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中成功表达。在摇瓶水平对酶的表达量进行优化,最终的酶量为855 U/L。使用镍柱将酶纯化,得到单一条带,相对分子质量约为55 k Da。分析其酶学性质,最适p H 7.0,在p H 5.0～7.0稳定;最适反应温度40℃,在50℃保温,其半衰期为6.9 min。以胆固醇为底物,在p H 7.5、37℃条件下测酶活,计算得动力学参数K_m为3.38 mmol/L,k_（cat）/K_m为6.09 s-1·（mmol/L）。; 袁晔张玲邵蔚蓝王武杨海麟; 关键词：胆固醇氧化酶

环糊精促进Burkholderia cepacia转化胆固醇生成胆甾-4-烯-3,6-二酮被引量：1: 2021年; Burkholderia cepacia可转化胆固醇生成甾体激素药物前体。通过质谱、红外光谱、核磁共振光谱等技术鉴定出一种有较高医药用价值的转化产物为胆甾-4-烯-3,6-二酮,但胆固醇的疏水性导致其转化得率较低。添加环糊精提高目标产物的转化得率,并考察环糊精对细胞生长及底物包埋情况的影响。分别选取多种环糊精(与胆固醇的摩尔比为1∶1)添加到转化体系,结果表明,甲基-β-环糊精和羟乙基-β-环糊精对提高胆甾-4-烯-3,6-二酮摩尔转化得率效果显著,分别是对照组的27.55倍和37.95倍。进一步优化羟乙基-β-环糊精的添加比例,当其添加量与底物胆固醇的摩尔比为2∶1时,产物胆甾-4-烯-3,6-二酮转化得率是摩尔比为1∶1时的1.59倍。红外光谱表征2 mol羟乙基-β-环糊精与1 mol底物胆固醇的包结络合情况,发现2 mol的羟乙基-β-环糊精可有效对胆固醇甾核的A环、侧链的26-C和27-C进行包被,形成稳定的包结物。羟乙基-β-环糊精可有效包被底物胆固醇,进而提高产物胆甾-4-烯-3,6-二酮的产率,为微生物转化生产胆甾-4-烯-3,6-二酮提供借鉴。; 武迪张玲吴梦棋孙柳青王武杨海麟; 关键词：环糊精胆固醇生物转化

保护剂对胆固醇氧化酶稳定性机理的研究被引量：3: 2013年; 利用荧光光谱、圆二色性光谱及凝胶电泳等方法,研究液态胆固醇氧化酶失活机理。根据失活机理,选择添加两种不同保护剂提高酶稳定性,研究提高酶稳定性的机理。37℃下,添加15%甘油的液态酶稳定性较佳,45 h后酶活保留率提高58%,核黄素对酶基本无保护作用。经研究分析,甘油主要通过有效抑制分子间聚集,维持二级结构,增强酶稳定性;核黄素不能抑制酶自身聚集,对酶保护作用不明显。; 陈亦辛瑜杨海麟张玲张玉然仝艳军王武; 关键词：胆固醇氧化酶稳定性保护剂

His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响被引量：1: 2012年; 为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacterium sp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(Cho-A_b)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoA_b(不带His-tag),pETChoA_bn(His-tag位于N端)和pETChoA_bc(His-tag位于C端)并在大肠杆菌中进行表达。对重组酶进行酶活检测,结果表明His-tag位于ChoA_6的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72 U/mL分别提高到4.03 U/mL和11.36 U/mL。利用软件QuantityOne对SDS-PAGE电泳条带进行灰度分析,结果显示与不带His-tag的COD相比,His-tag位于ChoA_b的C端和N端,COD表达量由8.8%增加到16.4%与72.3%。同时菌体浓度分别提高了1.2倍和3.2倍。作为纯化标签,该研究结果对His-tag用于诊断用酶COD的分离纯化可以提供一定的理论指导。; 程晨辛瑜张玲王武杨海麟; 关键词：组氨酸标签胆固醇氧化酶大肠杆菌

3α-羟类固醇脱氢酶的亲和纯化及化学修饰提高酶稳定性: 2016年; 研究了3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)经化学修饰后的稳定性变化。已构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a-hsd经诱导表达、镍柱亲和纯化得到电泳纯的3α-HSD酶,酶蛋白得率是16.5%,活性回收率为64.7%,纯化倍数约为3.8,15%SDS-PAGE结果显示3α-HSD酶为单一条带,相对分子质量在28 000左右。采用邻苯二甲酸酐(PA)作为修饰剂,对3α-HSD纯酶进行化学修饰,与对照组相比,修饰酶抵抗p H波动的能力有所增强,50℃水浴10 min后酶的热稳定性明显提高,37℃贮藏40 h后修饰酶的贮藏稳定性比原酶提高9倍。; 方亚男段敬霞张玲杨海麟; 关键词：邻苯二甲酸酐化学修饰稳定性

多聚赖氨酸对双亚基肌酸酶表面的修饰被引量：1: 2019年; 利用多聚赖氨酸(poly-lysine)对同源二聚体肌酸酶进行化学修饰,研究该法对酶稳定性的影响。选用L9(34)正交试验方案,研究不同修饰条件对修饰酶的催化效率和热稳定性的影响,确定多聚赖氨酸修饰肌酸酶(CRE)的最佳条件为CRE-COOH与poly-lysine-NH2、EDC的摩尔比分别为1∶100和1∶10,pH为7.0。通过SDS-PAGE鉴定,探测多聚赖氨酸可在酶分子表面产生共价结合。修饰酶的催化动力学参数Km和kcat分别为4.75×10-2 mol/L和2.50×102 S-1。与游离酶相比,修饰酶的热稳定性和pH稳定性均明显提高。修饰酶比游离酶的Tm值高了2.07℃,当pH值为4.0和10.0时,修饰酶的酶活力仍保留在50%以上,而游离酶活性几乎丧失。进一步优化研究表明,多聚赖氨酸表面修饰法有可能成为有效提高肌酸酶稳定性的一种方法。; 高亚楠辛瑜张玲杨海麟王武; 关键词：肌酸酶 PSEUDOMONAS PUTIDA 多聚赖氨酸表面修饰

果醋发酵液残留乙醇含量的快速检测被引量：3: 2012年; 在康维皿比色法的基础上,建立了一种快速测定果醋发酵液残留乙醇的新方法。结果表明:采用康维皿作为反应容器,乙醇反应体系在580nm处具有最大吸收峰。果醋中的乙醇浓度在0.5%～10%(v/v)之间呈良好线性,回归方程为Y=0.07389X-0.00886,相关系数R2=0.9995。该方法具有取样量少、快速、准确、无需复杂仪器等优点,不仅适于测定果酒或果醋终产品的乙醇含量,也便于跟踪果酒或果醋生产过程的乙醇含量动态变化,具有较好的应用推广价值。; 刘志鹏杨海麟夏小乐张玲王武; 关键词：果醋

“微生物学”一流课程教学改革与实践被引量：1: 2023年; “微生物学”课程是酿酒工程、生物工程、生物技术等专业的必修课程,也是一门重要的专业核心课程。基于培养具有科学探究能力的创新型人才的教学目标,我们教学团队深入改革“微生物学”课程,建设一流本科课程。通过贯彻“以学生为中心”和“科研反哺教学”的教学理念,深入挖掘课程育人价值,开展课程思政建设工作,建设慕课(massive open online course,MOOC)平台“微生物学”课程线上教学全套资源,构建“夯实基础-解构问题分析训练-研讨课”的教学模式,改进学生学习模式,改革学习过程评价体系,以及指导学生参加科创竞赛等教学改革实践,全面提高学生的科学探究能力,为社会储备具有科学探究能力的创新型人才,为工科院校建设一流课程提供借鉴。; 周丽曹钰张玲陈献忠李华钟段作营; 关键词：微生物学在线教学平台工科院校科学探究能力

张玲

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