龙高波
- 作品数：12 被引量：4H指数：1
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- 亲水磁性微纳米材料的制备及其应用
- 用马来酸酐和琥珀酸酐与不同链长聚乙二醇(PEG-1540，PEG-400)反应，制备聚乙二醇-1540-双-马来酸单酯、聚乙二醇-400-双-马来酸单酯和聚乙二醇-1540-马来酸单酯-单琥珀酸单酯作为自由基聚合的单体;...
- 龙高波
- 关键词：自由基聚合
- 用两端带羧基的直链亲水聚合物包被纳米磁芯制备微纳米磁性材料的方法及其应用
- 一种用两端带羧基的直链亲水聚合物包被磁流体制备微纳米磁性材料的方法及其应用；具体涉及将两端为羟基或氨基的聚乙二醇或寡聚甘氨酸链与马来酸酐、琥珀酸酐反应得两端有羧基但仅有一个或两个碳碳双键的单体；用化学共沉淀法制备纳米磁芯...
- 廖飞杨晓兰龙高波蒲军刘红博李元丽
- 文献传递
- 用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法
- 本发明公开了一种用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法；基于光吸收线性加和性及酶显色底物与其对应显色产物的等吸收波长，建立多波长吸收同步测量单通道同步测定多种酶活性所需显色底物组合设计原理及消除吸收光谱重叠干扰的数据...
- 廖飞杨晓兰刘红博党济政龙高波李元丽刘霖
- 联用酶反应过程分析法和终点平衡法测定酶底物量的方法
- 一种联用终点平衡法和酶反应动力学过程分析法处理酶反应过程数据测定酶底物量的方法；连续记录的酶反应曲线中相邻数据间信号变化超过仪器噪声两倍者为有效数据；测定加入少量酶液前的检测信号，校正酶液稀释效应得校正后起点信号；酶反应...
- 廖飞杨晓兰龙高波刘红博廖娟
- 文献传递
- 用两端带羧基的直链亲水聚合物包被纳米磁芯制备微纳米磁性材料的方法及其应用
- 一种用两端带羧基的直链亲水聚合物包被磁流体制备微纳米磁性材料的方法及其应用；具体涉及将两端为羟基或氨基的聚乙二醇或寡聚甘氨酸链与马来酸酐、琥珀酸酐反应得两端有羧基但仅有一个或两个碳碳双键的单体；用化学共沉淀法制备纳米磁芯...
- 廖飞杨晓兰龙高波蒲军刘红博李元丽
- 文献传递
- 融合标签谷胱甘肽S-转硫酶高亲和配体的设计与筛选被引量：3
- 2012年
- 目的:设计与筛选融合标签血吸虫谷胱甘肽S-转硫酶(Glutathione S-transferase,GST)的高亲和配体。方法:将原核融合表达载体pGST-MOLUC转入大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导GST标签表达,用Glutathione Sepharose 4B亲和纯化此标签GST。初速度法测定GST对底物1-氯-2,4-二硝基苯(1-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的Km;测定GST产物S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)、3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸及3者对应的对称双酰丁二胺对标签GST的抑制作用。结果:纯化标签GST对GSH和CDNB顺序结合且Km都高于0.10mmol/L;GS-DNB相对CDNB的竞争性抑制常数约5μmol/L,相对GSH的非竞争性抑制常数约33μmol/L。3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸对此GST抑制常数都大于0.20 mmol/L;N,N’-双依他尼酰-1,4-丁二胺和N,N’-双对丁基苯甲酰-1,4-丁二胺都为GST相对GSH的强竞争性抑制,抑制常数分别为31 nmol/L和(0.61±0.43)μmol/L(n=3)。结论:将标签GST低亲和力芳香羧酸用柔性短链连成对称结构,可获得结合于单个活性中心的高亲和力标签GST抑制剂。
- 杨宪峰张灵杨晓兰龙高波张奕廖飞
- 关键词：抑制剂配体
- 2种聚乙二醇不饱和酸单酯共聚合包被Fe_3O_4制备磁性微球及其表征被引量：1
- 2012年
- 目的:用两种聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)不饱和酸单酯经自由基共聚包被纳米Fe3O4磁芯制备磁性微球,考察其功能化后特异性和非特异性结合作用。方法:水解沉淀法制备纳米Fe3O4磁芯;用PEG-350单甲醚丙烯酸酯和PEG-1540单顺丁烯酸单酯为单体,在正庚烷-水组成的油包水体系自由基共聚制备磁性微球;将微球表面来自PEG-1540的羟基经甲磺酸酯活化、连接乙二胺后再用活化生物素修饰。透射电镜观察其外貌;测定与碱性磷酸酶标记链亲和素(Streptavidin labeled byalkaline phosphate,AP-SAV)的特异性结合、与4-硝基-1-萘酚苯甲酸酯等的非特异性结合。结果:所得Fe3O4粒径60 nm左右,生物素修饰后粒径接近200 nm。此磁性微球可从混合蛋白中选择性分离碱性磷酸酶酶标记的链亲和素,结合容量约51 ng蛋白/g磁性微球;4-硝基-1-萘酚苯甲酸酯在浓度很低时同此磁性微球的结合低于检测限,在浓度高达64μmol/L时仍无显著结合。结论:用两种PEG不饱和酸酯共聚包被Fe3O4可制备表面亲水磁性微球,功能化后有特异相互作用且非特异性作用很弱,但还需提高此磁性微球功能化后的特异性结合容量。
- 刘冬龙高波杨晓兰蒲军赵华廖娟廖飞
- 关键词：磁性微球自由基共聚合
- 终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸
- 2011年
- 目的：考察终点平衡尿酸酶法和动力学尿酸酶法联用测定尿酸的可行性和线性范围。方法：在25℃下1.2 ml硼酸钠缓冲液（0.20 mol/L,pH 9.2）中用293 nm吸收跟踪尿酸酶反应;测定加入5μl尿酸酶液前反应体系吸收,加入5μl苛求芽孢杆菌尿酸酶液后记录5.0 min内吸收变化。终点平衡法以尿酸酶反应前吸收为起点而尿酸完全氧化后吸收为本底,二者之差为尿酸净吸收且同尿酸浓度成正比;动力学法分析尿酸酶反应过程预测本底。分析模拟尿酸酶反应曲线,探索从终点平衡法转换为动力学法的尿酸浓度界限值;实验测定联用法的可行性和线性范围。结果：分析40 U/L苛求芽孢杆菌尿酸酶模拟反应曲线,发现两种方法转换的尿酸浓度界限值可为5.0μmol/L;分析实验反应曲线证实此界限值可行。在40 U/L尿酸酶时终点平衡法测量范围1.0~6.0μmol/L;联用法测量范围1.5~60μmol/L且对30μmol/L黄嘌呤有抗性;在5.0μmol/L以下变异系数小于10%而5.0μmol/L以上可小于5%。结论：这种联用法测定尿酸成本更低、线性范围更宽且效率高。
- 龙高波杨宪峰刘红博蒲军杨晓兰廖飞
- 关键词：尿酸联用法
- 联用酶反应过程分析法和初速度法测定谷胱甘肽-S-转硫酶活性
- 2011年
- 目的:考察联用谷胱甘肽-S-转硫酶(Glutathione-S-transferase,GST)产物抑制反应过程分析法和初速度法测定GST活性的有效性。方法:阳离子交换层析纯化猪肝碱性GST同工酶。在25℃,用1.0 mmol/L 2,4-二硝基氯苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和50.0 mol/L谷胱甘肽(Glutathione,GSH)跟踪产物在340 nm吸收的变化。5.0 min内底物消耗比例低于设定界限时测定初速度;否则,用以反应时间为自变量且包含产物抑制的积分速度方程分析反应过程确定最大反应速度,再换算成优化GSH浓度下的初速度。结果:优化GST产物抑制常数后,只要被分析数据中GSH消耗55%以上,所得最大反应速度对被分析数据范围不敏感。用48 mol/L GSH将最大反应速度换算成初速度,联用策略所得GST活性的线性下限略高于初速度法,而线性上限提高4倍。结论:用积分速度方程分析酶反应过程并优化最大速度换算成初速度所需底物浓度,联用策略测定酶活性线性范围更宽,有望成为测定酶活性的新方法。
- 廖娟赵利娜龙高波杨晓兰蒲军廖飞
- 用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法
- 本发明公开了一种用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法；基于光吸收线性加和性及酶显色底物与其对应显色产物的等吸收波长，建立多波长吸收同步测量单通道同步测定多种酶活性所需显色底物组合设计原理及消除吸收光谱重叠干扰的数据...
- 廖飞杨晓兰刘红博党济政龙高波李元丽刘霖
- 文献传递
