刘文
- 作品数：14 被引量：31H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
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- 辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的体内外研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过体内、外实验研究辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的影响,探讨辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的可能机制。方法体外培养CML细胞株K562细胞,做以下实验:①用流式细胞术(FCM)检测辛伐他汀处理K562细胞后其凋亡率的变化,②18只Balb/c-nu/nu裸小鼠皮下接种K562细胞,构建裸鼠的K562细胞移植瘤模型,③TUNEL法检测辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞早期凋亡的变化,④RT-PCR检测裸鼠体内外K562细胞N-ras、c-Raf-1、ERK1mRNA水平的变化。结果辛伐他汀在体外能明显诱导K562细胞凋亡,Ras-MAPK通路大多数基因出现差异表达。不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞凋亡,并随剂量的增加凋亡率逐渐增高(P<0.01);辛伐他汀能够引起N-ras、c-Raf-1、ERK1mRNA水平的明显差异表达(P<0.01)。结论辛伐他汀在体内外均能够引起参与K562细胞凋亡的Ras分子和Ras分子下游分子mRNA水平的变化,从一定角度说明辛伐他汀能依赖Ras-MAPK信号通路诱导K562细胞凋亡。
- 刘文黄文芳周定安杨永长传良敏曾娅莉余招焱
- 关键词：辛伐他汀K562细胞
- 热休克蛋白70在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡过程中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察热休克蛋白70基因和蛋白在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡过程中的变化,推测热休克蛋白70与细胞凋亡之间的关系。方法20μmol·L-1辛伐他汀处理K562细胞24、48和72h;流式细胞技术检测细胞凋亡率;比色法测定caspase-3蛋白活性;RT-PCR检测caspase-3和热休克蛋白70基因;免疫组织化学法和Western blot技术检测热休克蛋白70蛋白。结果20μmol·L-1辛伐他汀作用K562细胞24、48和72h,细胞凋亡率变化分别是(6.1±s0.4)%,(14.2±0.4)%和(30.7±0.6)%。与相同时间对照组比较,处理组细胞的caspase-3基因和蛋白活性均显著升高(P<0.05);热休克蛋白70的基因和蛋白表达均不同程度下降(P<0.05)。结论辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡,降低的热休克蛋白可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制之一。
- 曾娅莉黄文芳刘华杨永长周定安昔国强刘文
- 关键词：辛伐他汀半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞凋亡HSP70热休克蛋白质类
- 辛伐他汀抑制K562细胞MAPK1、cyclin D1、E2F1、c-myc mRNA的表达被引量：1
- 2009年
- 目的探讨辛伐他汀抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的分子机制。方法不同浓度辛伐他汀作用K562细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,RT-PCR测定MAPK1、cyclinD1、E2F1、c-myc mRNA表达。结果辛伐他汀能抑制K562细胞增殖,增殖抑制效应随药物浓度增加和作用时间延长而增大(P<0.05)。与对照组比较,5、10、20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞48h和72h后能明显增加细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.05),表明辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡。10、20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞72h后,MAPK1、cyclinD1、E2F1、c-mycmRNA表达水平明显降低。结论辛伐他汀可能通过调节Ras-MAPK途径抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡。
- 杨永长传良敏黄文芳刘华曾娅莉胥国强刘文
- 关键词：辛伐他汀K562细胞CYCLINE2F1C-MYC
- 活性氧与谷胱甘肽在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时的变化及机制探讨被引量：3
- 2009年
- 目的:研究辛伐他汀(simvastatin)诱导K562细胞凋亡过程中细胞内活性氧与谷胱甘肽的变化及凋亡中发生的时间顺序,以探讨辛伐他汀诱导K562凋亡的机制。方法:20μmol/L浓度辛伐他汀处理K562细胞,48h光学显微镜观察细胞形态学。12、24、48、72hMTT法检测细胞活力,荧光染料流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧,化学比色法检测细胞内谷胱甘肽。结果:辛伐他汀作用K562细胞48h后出现典型的凋亡形态学改变;12、24、48、72h细胞抑制率为0、(19.02±0.92)%、(56.4±3.20)%、(74.4±5.54)%,K562细胞生长被抑制;细胞凋亡率升高为:(2.55±0.25)%、(6.1±0.35)%、(14.15±0.42)%、(30.70±0.65)%;活性氧的荧光强度升高为:1.61±0.15、13.1±1.54、10.0±1.05、8.10±0.87,与不同时间的对照组相比较均显著升高(P<0.05)。细胞内谷胱甘肽含量为:274.7±11.5、262.5±9.8、272.4±10.5、(357.2±16.8)mg/gprot,与不同时间的对照组相比较均显著降低(P<0.05)。结论:辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时细胞内发生了氧化还原体系失衡,它可能是细胞凋亡的早期上游事件。
- 曾娅莉黄文芳杨永长邓建军何静昔国强刘文
- 关键词：辛伐他汀细胞凋亡活性氧谷胱甘肽
- 辛伐他汀对K562细胞端粒酶活性及人端粒酶逆转录酶表达的影响
- 2008年
- 目的探讨辛伐他汀治疗慢性粒细胞白血病可能的作用机制。方法辛伐他汀10和20μmol.L-1与K562细胞作用48或72 h后,用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡百分率;提取细胞端粒酶,用PCR-ELISA检测端粒酶活性;实时荧光定量PCR检测人端粒酶逆转录酶(hTERT),c-myc和bcl2-mRNA表达。结果辛伐他汀10和20μmo.lL-1与K562细胞作用48 h后,细胞凋亡率分别为(6.24±0.18)%和(9.41±0.22)%,与对照组(1.88±0.14)%比较明显增加;作用72 h后细胞凋亡率分别为(12.41±0.32)%和(19.08±0.26)%,与对照组(4.20±0.19)%比较明显增加。辛伐他汀10和20μmo.lL-1与K562细胞作用48或72 h后,端粒酶活性,hTERT,c-myc和bcl-2 mRNA表达明显低于对照组。结论辛伐他汀可使K562细胞端粒酶活性降低,其机制可能与下调hTERT mRNA表达有关。
- 杨永长黄文芳刘华曾娅莉胥国强刘文
- 关键词：辛伐他汀端粒酶
- P53途径在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨辛伐他汀处理后的P53通路和细胞周期的分子水平变化,以说明P53途径在辛伐他汀抑制K562细胞增殖和诱导细胞凋亡中的作用。方法体外培养和用辛伐他汀处理K562细胞,用流式细胞仪检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化,用RT-PCR检测P53通路和细胞周期相关基因的变化。采用免疫组化LDP法检测P21蛋白变化的水平。结果辛伐他汀能使K562细胞停滞在G0/G1期,明显诱导K562细胞凋亡,大多数P53通路基因和细胞周期相关基因出现差异表达。P21蛋白随药物作用时间的延长,表达上调。结论P53通路可能在辛伐他汀诱导的K562细胞增殖抑制和凋亡发生的过程中起重要作用。
- 周定安黄文芳刘文胥国强杜琼赵慎许毅
- 关键词：K562细胞P53通路凋亡
- 辛伐他汀对人慢性粒细胞白血病细胞K562基因表达的影响
- 2008年
- 目的应用基因芯片技术研究辛伐他汀对K562细胞基因表达的影响,初步探讨其作用机理。方法辛伐他汀作用K562细胞48h后,提取细胞总RNA。纯化mRNA后再逆转录为cDNA,将cDNA在体外转录合成cRNA,用随机引物反转录为cDNA,用Klenow酶标记Cy3、Cy5,与定制的包含人全基因组的基因芯片杂交,扫描芯片荧光信号,用GenePixPro4.0图像分析软件对芯片图像进行分析。定量RT-PCR验证芯片结果中两个差异表达基因。结果基因芯片检测发现共有176条基因表达发生明显改变,包括16条未知基因表达改变。其中151条基因表达上调,25条基因表达下调。根据基因功能的不同,我们初步将其分为凋亡相关、信号转导相关、细胞周期相关等几大类。定量RT-PCR验证的基因表达变化趋势与表达谱芯片的结果相吻合。结论辛伐他汀作用K562细胞后能引起多种基因表达改变,这为探讨其作用机制提供了新的依据。
- 黄文芳杨永长传良敏刘华曾娅莉周定安胥国强刘文
- 关键词：K562细胞辛伐他汀基因芯片慢性粒细胞性白血病
- 辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的体内外研究
- 目的通过体内外实验研究辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的影响.探讨辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的可能机制。方法体外培养CML细胞株K562细胞.做以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测辛伐他汀处理K56...
- 黄文芳刘文周定安杨永长传良敏曾娅莉
- 文献传递
- 辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞凋亡过程中NF-κB通路的分子变化被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨辛伐他汀在裸鼠体内引起的K562细胞NF-κB信号通路的分子变化,以说明辛伐他汀是否依赖NF-κB信号通路参与K562细胞凋亡发生。方法:体外培养慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,接种于18只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下,构建移植瘤模型。随机分为3组,每组6只。对照组腹腔注射生理盐水0.2 ml,两个处理组分别注射0.2 g/L的辛伐他汀0.25 ml(0.05 mg)和0.4 ml(0.08 mg)。均隔日注射,连续6次。采用TUNEL法检测K562细胞早期凋亡的变化,RT-PCR检测K562细胞中NF-κB信号通路IKK-βI、κB-α、NF-κB1 mRNA的差异表达。结果:不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的凋亡,且高剂量组凋亡率高于低剂量组(P<0.01);不同剂量的辛伐他汀能够引起IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的表达下调(P<0.01)。结论:辛伐他汀可诱导K562细胞凋亡,可能与NF-κB通路基因的表达下调有关。
- 周定安黄文芳曾亚莉刘文胥国强李林海
- 关键词：辛伐他汀细胞凋亡
- 辛伐他汀通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡被引量：6
- 2007年
- 目的观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡不同时间的膜电位(Δψm),caspase-3、9和细胞色素C的改变,以推测其凋亡通路。方法采用浓度为20μmol.L-1的辛伐他汀处理K562细胞24、48、72 h,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位,分光光度法检测caspase-3、9蛋白活性,免疫组织化学法检测细胞色素C蛋白。结果浓度为20μmol.L-1辛伐他汀作用K562细胞24、48、72 h后,凋亡率分别为(6.1±0.35)%、(14.15±0.42)%(、30.70±0.65)%,随着凋亡率增加线粒体膜电位降低分别为(39.6±4.80)%,(24.4±2.45)%,(6.0±1.62)%;caspase-3、9蛋白活性与对照组相比上调,细胞浆内细胞色素C升高。结论辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时线粒体膜电位下降,caspase-3、9活性增高和细胞色素C释放,推测辛伐他汀诱导K562细胞的凋亡可能经过线粒体凋亡途径。
- 黄文芳曾娅莉刘华杨永长刘文胥国强
- 关键词：辛伐他汀细胞色素C线粒体膜电位凋亡
