王会兰
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 供职机构：广东医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种独特的fⅦa/TF抑制剂:线虫抗凝血蛋白c2被引量：7
- 2006年
- 线虫抗凝血蛋白c2(NAPc2)是从犬钩虫中分离出来的一种蛋白,它通过结合于fXa的催化活性中心以外的部位而进一步特异性抑制fVⅡa/TF复合物。在国外,rNAPc2正作为一种新型抗凝药运用于临床试验中,它抗凝效果明显,半衰期长(>50 h),副作用小。此外,它还可能在治疗D IC、肿瘤等疾病方面具有潜在应用价值。本文就NAPc2的结构与功能、作用机制和临床应用研究进展做一综述并展望其应用前景。
- 王会兰彭礼飞
- 钩虫抗凝血肽的研究现状被引量：6
- 2006年
- 彭礼飞王会兰邓莉戴世忠
- 关键词：钩虫抗凝血肽
- 线虫抗凝血蛋白AcaNAP7基因克隆、表达及抗凝活性鉴定被引量：10
- 2007年
- 目的在大肠杆菌中表达犬钩虫线虫抗凝血蛋白NAP7(AcaNAP7)成熟蛋白,并鉴定表达产物的抗凝活性。方法根据AcaNAP7的核苷酸序列设计引物,从克隆质粒pUCm-T/AcaNAP7中扩增编码AcaNAP7成熟蛋白的基因;扩增产物经双酶切定向克隆到原核表达载体PET-32a中;构建的重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;表达产物经镍琼脂糖凝胶FF纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测体外抗凝血活性。结果克隆了编码AcaNAP7成熟蛋白的基因并构建了重组表达质粒pET-32a/AcaNAP7;在大肠杆菌BL21(DE3)中高效地表达了融合有硫氧还蛋白(Trx)的目的蛋白,产物主要以可溶形式存在;镍琼脂糖凝胶亲和纯化获得了纯度高达92%的目的蛋白;纯化产物能明显延长PT及aPTT,其延长PT比延长aPTT更有效。结论在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP7融合蛋白,表达产物具有抗凝活性。该实验为进一步研究AcaNAP7的功能及应用奠定了基础。
- 彭礼飞杨陈王会兰吴亚敏邓莉吴铁胡晶晶
- 关键词：克隆抗凝活性
- 犬钩虫抗凝肽AcaNAP8的原核表达及其抗凝活性被引量：2
- 2010年
- 目的在大肠杆菌中重组表达犬钩虫抗凝肽AcaNAP8基因,并检测表达产物抗凝活性。方法设计引物,将AcaNAP8成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒;成功构建的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况;诱导表达的重组蛋白用Ni亲和层析进行纯化;用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测重组产物体外抗凝活性。结果成功构建了pET32a/AcaNAP8原核表达重组质粒,在大肠杆菌中成功表达并获得了重组AcaNAP8,表达产物能明显延长PT及aPTT。结论在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP8融合蛋白,表达产物具有显著抗凝活性。该实验为进一步探讨AcaNAP8的作用机制及应用奠定了基础。
- 殷环邓莉王会兰吴亚敏彭礼飞
- 关键词：活性
