沈俊杰
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重点资助项目国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝癌细胞系Huh7中肿瘤干细胞分离及鉴定被引量：2
- 2011年
- 利用肿瘤干细胞具有自我更新能力的特点,首次采用悬浮培养技术从Huh7细胞系中得到肝癌(干)细胞球,并通过RT-PCR、流式细胞术和免疫荧光等方法检测它们的干细胞标记和分化标记。结果显示Huh7(干)细胞球的干性相关基因表达上调;分化相关基因表达下调;流式细胞仪检测结果表明88.82%的Huh7(干)细胞球表达EpCAM基因,与正常Huh7细胞相比表达上调。表明该方法具有富集肝癌干细胞的效果,为以后肝癌干细胞建立更高效的分离方法提供了一种新的技术方法。
- 梁晨单娟娟沈俊杰刘立钱程
- 关键词：肿瘤干细胞EPCAM
- 靶向PSCA的缺氧诱导型CAR-T的构建及体外效能研究被引量：1
- 2019年
- 该文针对肿瘤微环境中的缺氧环境,利用缺氧相关的启动子,设计和制备在缺氧环境中诱导表达靶向前列腺干细胞抗原(PSCA)的嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T),研究缺氧条件下其嵌合抗原受体(CAR)的表达及对肿瘤细胞的体外杀伤作用。研究者通过基因合成缺氧启动子(5H1P)和CAR的DNA片段,利用酶切方法将其插入到慢病毒载体中,然后感染T淋巴细胞。在体外用CoCl2构建缺氧模型,通过流式细胞术检测CoCl2未诱导组CAR有42%的弱阳性表达,诱导后阳性率增加到84.4%,且荧光强度显著增加。结果表明,诱导组比不诱导对照组抗肿瘤效果更好。综上所述,该实验成功构建了靶向PSCA的缺氧诱导型CAR-T,使其在缺氧的环境中效能增强,这为CAR-T在实体瘤的治疗方面提供了新的方案。
- 朱秀秀王玲沈俊杰陈雪娇钱程
- 关键词：缺氧PSCA抗肿瘤
- 构建多顺反子表达载体系统的新策略被引量：4
- 2009年
- 利用pSM155-GFP载体为骨架质粒,构造IRES-2A联用结构,成功实现该结构向2A结构的简单切换,得到可以同时表达shRNA和多基因、可切换多功能的真核表达载体。克服目前在单基因或多基因功能机制的研究中,普遍需要构建多个真核表达载体才能完成的研究过程。并进一步将p53基因克隆至载体中,通过多种方法证实构建得到的IRES-2A和2A元件均能有效介导多顺反子的表达,且表达的蛋白具有完好的生物活性。
- 沈俊杰单娟娟骆菁菁刘立钱程
- 关键词：多顺反子IRESSHRNA
