李泽民
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科技攻关项目贵州省自然科学基金贵州省农业厅兽医科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基被引量：3
- 2013年
- 为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民覃岚崔亚兰王慧
- 关键词：荧光定量PCR绵羊肺炎支原体
- 绵羊肺炎支原体LAMP检测方法的建立及初步应用被引量：6
- 2013年
- 针对绵羊肺炎支原体(Mo)16SrRNA基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)引物,通过优化反应条件与体系,建立了Mo检测LAMP方法,并对其进行特异性、敏感性及临床应用性检测。结果显示,于60℃保温60min即可最优化检测Mo,且所建方法仅能特异扩增Mo,最低检出分子拷贝数为1.0×102copies/μL,具有良好的特异性和敏感性。对4份已知阳性病料进行LAMP检测均为阳性,表明所建LAMP可初步应用于临床检测,为羊Mo感染病例诊断提供了新方法。
- 张双翔周碧君程振涛文明王开功李泽民王慧崔亚兰覃岚
- 关键词：绵羊肺炎支原体环介导等温扩增
- 猪圆环病毒继发细菌感染的实验室诊断
- 2012年
- 采集临床病死仔猪脏器组织,用分子生物学和细菌学方法进行确定性诊断。结果:在病死仔猪肺脏与淋巴结中均检测到猪圆环病毒核酸,并分离到4株埃希氏大肠杆菌;药敏试验表明:分离细菌对头孢噻呋钠敏感,对其他抗生素均表现耐药性。诊断结果为贵州省规模场防制猪圆环病毒感染提供了一定的技术支持。
- 李泽民李如举张双翔程振涛
- 关键词：猪圆环病毒细菌继发感染
- 绵羊肺炎支原体贵州分离株的鉴定被引量：10
- 2013年
- 【目的】对贵州省疑似绵羊肺炎支原体(Mo)感染山羊病例进行病原确定性诊断。【方法】采集疑似Mo感染山羊肺脏,以支原体专用培养基从其中分离致病支原体,并通过形态学观察、生化试验、血清学试验及分子生物学方法对分离菌株进行鉴定。【结果】分离菌株菌落呈无中心脐圆形凸起,菌体呈多形性,大小在0.2～0.4μm;分离株表现出了与Mo标准株Y98相同的生化特性,在含抗Mo血清培养基中不生长;分离株16SrRNA基因序列与Mo Y98株同源性达99.55%,系统进化树分析与MoGH3-3株进化关系最近。【结论】成功分离到了Mo,为确定本地山羊支原体肺炎病原种类提供了理论依据,并为后续围绕病原进行防控工作研究奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民王慧崔亚兰覃岚夏鹏
- 关键词：绵羊肺炎支原体肺炎
- 山羊传染性胸膜肺炎病原快速诊断方法的建立被引量：10
- 2012年
- 为准确快速鉴定临床疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原,针对丝状支原体山羊亚种(Mmc)与绵羊肺炎支原体(Mo)16S rRNA基因设计两对特异性引物Ps/Pa、Ms/Ma,通过优化反应条件及体系,建立检测CCPP两种主要致病支原体的双重PCR方法,并检测了所建方法特异性、敏感性及临床应用。当引物、Mg2+及dNTP浓度分别为0.8 pmol/μL、1.5 nmol/μL、0.2 nmol/μL,Ps/Pa与Ms/Mo比例为1 1时,于54℃退火40 s,可最小检出Mmc与Mo核酸量分别为0.1 ng、0.01 ng,敏感性良好。通过特异性与临床疑似病例检测,证明所建方法具较好特异性,可初步应用于临床诊断。
- 张双翔周碧君程振涛文明王开功崔亚兰李泽民覃岚钟文彬
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎病原双重PCR
