张鹏飞
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：石河子大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转GhB301基因烟草的防御酶活性及抗病相关基因表达分析被引量：2
- 2019年
- 为了明确棉花ERF-B3亚族转录因子基因GhB301在烟草异位表达后(抗枯萎病中)的功能,该研究以过表达GhB301基因烟草和野生型烟草为材料,采用枯萎病菌孢子悬浮液接菌方法,分析病原菌侵染前后防御酶活性变化以及防卫相关基因的表达变化与抗病性的关系。结果显示:(1)棉花枯萎病菌处理15 d后,2个转基因株系烟草叶片黄化程度与野生型相比较轻。(2)棉花枯萎病菌处理后,过表达GhB301转基因烟草和野生型烟草叶片过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)的活性较未接菌对照显著提高,并且酶活峰值出现均早于野生型材料;转基因材料叶片的POD、PAL、PPO活性均在处理3 d后达到峰值,而野生型材料叶片的POD、PAL活性在处理5 d后才达到峰值。(3)接种棉花枯萎病菌后活性氧相关基因、乙烯(ET)/茉莉酸(JA)途径相关基因、病程相关基因的表达量在转基因株系OE1和OE2中均受到明显影响。研究推测,GhB301在烟草中的异位表达激活了防卫相关基因的表达,提高了防御酶的活性,从而增强了烟草对枯萎病菌的抗性。
- 刘戈辉朱金成郭文婷张鹏飞张薇
- 关键词：烟草枯萎病防御酶活性
- 陆地棉(Gossypium hirsutum L.)GhWRKY75的克隆及表达载体构建
- 2018年
- 目的从棉花抗病品种中克隆WKKY转录因子基因,为棉花抗枯萎病分子育种提供重要的基因资源。方法以枯萎病菌诱导后棉花基因表达谱中差异表达的WRKY基因片段为探针序列,以陆地棉的抗枯萎病品种'中棉所12'的根部c DNA为模板。运用电子拼接及RT-PCR技术,克隆得到一个新的基因,将该基因命名为GhWRKY75(登录号:MH138002)。结果序列分析发现,GhWRKY75基因开放阅读框全长为513bp,编码一个含170个氨基酸残基的蛋白,具有1个WRKY结构域及1个典型的C2H2型锌指结构,属于第Ⅱ类WRKY转录因子家族。该基因编码蛋白分子量为19.51kd,等电点为9.30,脂肪指数为60.12,属于疏水性蛋白,基因的蛋白二级结构由α螺旋、延伸链和无规则卷曲组成。同源基因进化树分析表明该基因与雷蒙德氏棉亲缘关系最近。结论:从棉花中克隆得到一个新的GhWRKY75基因,构建了该基因的植物过表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础。
- 张鹏飞刘戈辉郭文婷张薇
- 关键词：陆地棉基因克隆WRKY转录因子
- 棉花EIN3/EIL家族基因序列分析及GhEIL3基因克隆被引量：6
- 2017年
- 该研究以拟南芥AtEIN3基因为探针,从陆地棉TM-1全基因组测序数据库中筛选其同源序列,序列分析得到16条具有EIN3结构域的基因序列。对陆地棉EIN3/EIL家族基因的基因结构、系统进化、序列相似性及结构域分布情况进行分析,发现它们与拟南芥EIN3/EIL家族基因在N端具有较高相似度,其中15条基因序列包含5个保守结构,1条包含4个保守结构。在此基础上,采用RT-PCR方法从抗枯萎病的陆地棉品种‘中棉所12’中克隆得到一个新的EIN3/EIL家族基因,命名为GhEIL3(GenBank登录号为KY072936)。序列分析表明:GhEIL3基因开放阅读框长1 092bp,编码363个氨基酸,含有一个EIN3结构域。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,GhEIL3基因在枯萎病菌诱导后呈上调表达,诱导后1h其相对表达量达到最大值,推测GhEIL3基因可能参与棉花对枯萎病菌的防御反应。
- 张析李潇玲郭文婷张鹏飞张薇
- 关键词：棉花枯萎病基因克隆
- 棉花ERF-B3亚组转录因子基因GhERF5-1的克隆及表达被引量：1
- 2018年
- 为海岛棉抗病提供新的基因资源和作物抗病分子育种提供有用的理论依据,以前期获得的枯萎病病菌诱导陆地棉根部基因表达谱中获得差异性表达ERF片段为探针,用电子克隆及RT-PCR技术,从陆地棉抗枯萎品种中棉所12根部c DNA克隆得到1个新的ERF转录因子。通过进化树分析属于B3亚组,命名为Gh ERF5-1(登录号:MF145657)。Gh ERF5-1基因的序列分析表明,其c DNA全长为990 bp,编码的氨基酸329个,分子量36. 52 ku,等电点为6. 15,含有1个保守的AP2的结构域。qRT-PCR分析结果表明,枯萎病病菌侵染后,随着侵染时间的延长,Gh ERF5-1基因的表达趋势是先增加后降低,在处理后2 h基因的相对表达量达到最大。推断Gh ERF5-1基因可能参与枯萎病的防御反应。
- 郭文婷张鹏飞李潇玲张析张薇
- 关键词：棉花ERF转录因子基因克隆
- 棉花抗枯萎病相关转录因子基因的克隆与表达被引量：5
- 2017年
- 以枯萎病菌诱导棉花基因表达谱中获得的差异表达bZIP作为探针,采用电子克隆结合RT-PCR方法从棉花抗枯萎病品种‘中棉所12’中克隆了1个TGA转录因子基因,命名为GhTGA2.2。序列分析表明,该基因的cDNA全长1 356bp,编码451个氨基酸,预测分子量为50.04kD,等电点为5.85,含有保守的bZIP结构域。系统进化树分析表明,GhTGA2.2属于bZIP亚家族的TGA转录因子,与拟南芥AtTGA2、烟草NtTGA2.2亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,经枯萎病菌诱导后,GhTGA2.2基因在抗病品种中呈上调表达,随处理后时间的推移,其相对表达量呈先升高后降低的趋势,并于处理后24h表达量达到最大;水杨酸诱导后1h,GhTGA2.2基因相对表达量迅速增加;茉莉酸和乙烯诱导后GhTGA2.2基因的相对表达量明显降低,呈下调表达。研究推测,GhTGA2.2基因可能通过水杨酸信号传导途径参与对枯萎病菌的防御反应。
- 李潇玲张析郭文婷张鹏飞张薇
- 关键词：棉花枯萎病菌克隆表达
- 棉花ERF-B3亚组转录因子基因GhERF5-3的克隆及表达被引量：3
- 2018年
- 植物在受到病原菌侵染时,ERF转录因子被诱导调控抗病相关基因的表达。为了研究棉花AP2/ERF-B3类转录因子在棉花抗病调控中的作用,用电子克隆及RT-PCR技术,从陆地棉抗枯萎品种‘中棉所12’根部c DNA克隆得到一个新的ERF转录因子Gh ERF5-3(登录号:MF197875)。利用q RT-PCR检测枯萎病及不同激素处理后该基因的表达。结果表明:其c DNA全长为672 bp,编码223个氨基酸,分子量24.95 k D,等电点为9.04,含有一个典型的保守AP2结构域,通过进化树分析属于B3亚组。枯萎病菌侵染后,随着侵染时间的延长,Gh ERF5-3基因呈现出先增后降的趋势,在24 h时间点,其相对表达量达到峰值;ET和Me JA处理后,Gh ERF5-3基因呈上调表达。SA处理后为下调表达。推断Gh ERF5-3基因响应枯萎病菌。
- 郭文婷李潇玲张析张鹏飞张薇
- 关键词：棉花ERF转录因子枯萎病菌
