王俊伟
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 癌基因Ras及其常见突变与p53协同作用对结肠癌细胞化疗药物敏感性的研究
- 目的：Ras是一种原癌基因，其突变广泛存在于多种肿瘤细胞中，在结直肠癌中突变率可达30％以上，与结直肠癌发生、发展以及靶向治疗疗效预测等均有密切关系。突变后的Ras结构发生改变引起下游多条信号通路激活，并且与肿瘤的侵袭和...
- 王俊伟
- 关键词：K-RAS基因P53基因化疗药物
- 癌基因Ras及其常见突变与P53协同作用对结肠癌细胞化疗药物敏感性的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨P53与Ras及常见Ras突变协同作用对结肠癌细胞化疗药物敏感性的影响。方法 P53-/-的结肠癌细胞(HCT116 P53-/-)中分别单转染Ras野生型、Ras V12、Ras N17质粒,另外3组细胞分别转染以上质粒后感染P53腺病毒。用奥沙利铂处理12 h后分别用钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(PI)染色、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、免疫印迹(WB)检测各组凋亡水平。结果 Calcein-AM/PI染色显示,Ras V12转染组凋亡率[(16.8±1.7)%]显著高于Ras[(8.3±1.5)%,P<0.01]和Ras N17转染组[(4.4±1.6)%,P<0.01],Ras N17转染组凋亡率最低(P=0.016);P53腺病毒处理3组凋亡率均显著增高,仍以Ras V12转染组凋亡率[(25.9±2.2)%]为最高,Ras N17转染组最低[(7.6±1.2)%]。Real-time PCR和WB显示,P53存在与不存在条件下,Ras V12转染组Bax m RNA和蛋白表达均显著高于Ras和Ras N17转染组;Bcl-2水平则与Bax水平相反(P均<0.05)。结论 Ras突变体Ras V12过表达能够引起奥沙利铂作用下细胞凋亡的增加,而突变体RAS N17能够降低细胞凋亡;P53与Ras有协同作用,能够提高Ras的促细胞凋亡作用,提高细胞对奥沙利铂化疗药的敏感性。
- 王俊伟石英乔录新寇卜心陈德喜郭洪亮
- 关键词：结肠癌RASP53基因
- 乙肝病毒核心启动子区和前C区突变与肝细胞自噬的关系被引量：5
- 2014年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)核心启动子区和前C区突变与肝细胞自噬的关系。方法构建前C区和C启动子区突变的1.3mer HBV质粒G1613A、A 1762T/G1764A、,G1896A;HepG2细胞分别转染GFP-LC3质粒和突变的HBV质粒。免疫荧光染色法检测HBV感染的细胞LC3荧光颗粒表达水平,免疫印迹法分析内源性LC3表达水平,实时定量PCR检测转染后细胞内自噬相关基因Atg5、Atg7和Beclin-1 mRNA的转录水平。结果免疫荧光显示,转染HBV G1613A、A 1762T/G1764A、G1896A质粒的细胞LC3荧光颗粒表达水平分别为(12.5±0.2)%、(11.7±0.2)%、(8.5±0.2)%,低于转染野生型HBV质粒的细胞[(14.5±0.2)%],差异有统计学意义(P﹤0.05)。实时定量PCR显示,自噬相关基因Atg5 mRNA在转染HBV G1613A、A 1762T/G1764A、G1896A质粒的细胞中的转录水平均明显低于野生型HBV(P﹤0.01),Atg7和Beclin-1在转染G1896A HBV质粒细胞中的基因转录水平低于野生型HBV转染的细胞,且Beclin-1的降低具有统计学意义(P<0.05)。结论 HBV前C区和C启动子区G1613A、A 1762T/G1764A、G1896A突变能够降低HBV感染的肝细胞自噬。
- 王安娜闫晓东封晓昆王俊伟陈德喜石英
- 关键词：乙型肝炎病毒突变自噬
