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李磊
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
湖南大学生物学院
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发文基金:
中央高校基本科研业务费专项资金
国家重点实验室开放基金
湖南省自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
杜长青
湖南大学生物学院
刘泓
福建农林大学资源与环境学院
朱咏华
湖南大学生物学院
刘选明
湖南大学生物学院
杨远柱
湖南亚华种业科学研究院
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福建农林大学
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湖南亚华种业...
作者
1篇
林建中
1篇
杨远柱
1篇
刘选明
1篇
朱咏华
1篇
刘泓
1篇
杜长青
1篇
李磊
传媒
1篇
生命科学研究
年份
1篇
2013
共
1
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金针菇谷氨酸脱氢酶基因的克隆及原核表达
被引量:3
2013年
利用简并引物和RT-PCR方法从金针菇(Flammulina velutipes)幼嫩子实体中克隆获得FvGDH全长cDNA序列.构建入门载体pGWC-FvGDH,利用Gateway克隆技术的LR反应构建原核重组表达载体pDESTl7-FvGDH,转化大肠杆菌BL21(DE3).通过IPTG法诱导表达融合蛋白并进行表达条件优化.SDS-PAGE蛋白电泳分析表明,融合蛋白相对分子质量约为53 kD,与预测的一致.最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.4mmol/L、诱导4 h.融合蛋白表达量较高,实现了FvGDH的高效表达,并利用Western blotting对其特异性进行鉴定.FvGDH基因高效原核表达体系的成功建立,为进一步研究FvGDH的酶促动力学奠定了基础.
李磊
杨远柱
刘泓
杜长青
林建中
朱咏华
刘选明
关键词:
原核表达
SDS-PAGE
WESTERN
BLOTTING
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