方圆
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血浆氧化应激标志物水平与慢性精神分裂症患者认知障碍的关系被引量：6
- 2020年
- 目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)、胆红素、白蛋白、尿酸等氧化应激标志物水平与慢性精神分裂症患者认知障碍之间的关系。方法测定208例慢性精神分裂症患者血浆Hcy、胆红素、白蛋白及尿酸水平。通过蒙特利尔认知评估量表(MoCA)的评估结果,将慢性精神分裂症患者分为认知障碍组和非认知障碍组,对结果进行统计分析。结果认知障碍组血浆Hcy水平高于非认知障碍组,白蛋白水平低于非认知障碍组,差异有统计学意义(Z=-3.279,P<0.01;t=2.265,P<0.05)。两组间胆红素、尿酸水平差异无统计学意义(Z=-0.346、Z=-1.800,均P>0.05)。对于精神分裂症患者的认知功能,血浆Hcy是危险性因素(OR=1.097,95%CI为1.015~1.185,P<0.05),血浆白蛋白是保护性因素(OR=0.844,95%CI为0.745~0.956,P<0.01)。结论氧化应激可能参与精神分裂症认知障碍的发病过程,血浆Hcy、白蛋白水平可作为潜在的临床评价指标。
- 王磊张玲朱梅唐述龙宋苏琪袁秋雨方圆王寒周晓琴
- 关键词：精神分裂症氧化应激蒙特利尔认知评估量表
- KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定
- 2016年
- 目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15P_(ex8)多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15P_(ex8)多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15P_(ex8)制备的抗K15P_(ex8)多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15P_(ex8)蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。
- 陈伟方圆汪小五许常青朱晨辰杨宇张龙龙王林定
- 关键词：多克隆抗体
- 甘肃省敦煌地区普通人群卡波肉瘤相关疱疹病毒感染的血清学分析被引量：5
- 2017年
- 目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在甘肃敦煌地区普通人群中的血清阳性率,并分析KSHV感染的危险因素。方法随机收集1 000例敦煌地区普通人群血清,以KSHV 3个基因片段orf65、orf73、orf k8.1编码蛋白为抗原,间接ELISA检测样本中KSHV抗体,SPSS软件分析危险因素。结果 1 000份血清中,KSHV抗体总阳性率为19%,男性阳性率(22.9%)高于女性(16.6%)(P=0.016);KSHV感染与梅毒螺旋体(P=0.004)和丙肝病毒(P=0.027)感染间有相关性,而与年龄、乙肝五项无关。多因素Logistic回归分析显示梅毒螺旋体感染的OR(95%CI)为10.142(1.920~53.577)。结论甘肃敦煌地区普通人群中KSHV的感染率较高,且与性别有关;梅毒螺旋体感染是该地区KSHV感染最重要的独立危险因素。
- 方圆许常青周畅陈伟王林定
- 关键词：血清阳性率
- KSHV K15P及其突变体的慢病毒包装与稳定细胞株的筛选及其对内皮细胞增殖迁移的影响被引量：1
- 2019年
- 目的包装包含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15P及其突变体K15P(YF)基因的慢病毒颗粒,并对此基因在EA.hy926细胞内稳定表达进行研究。方法通过PCR方法扩增获得KSHV K15P、K15P(YF)基因片段,使用限制性内切酶Not I与BamH I酶切和TA克隆法构建T载体与慢病毒表达载体pHAGE-CMV-MCS-K15P-Puro、pHAGE-CMV-MCS-K15P(YF)-Puro,通过lip2000将构建好的慢病毒表达载体与两种辅助包装质粒PSPAX2和pMD2.g共转染HEK 293T细胞,48 h后收集慢病毒。慢病毒感染EA.hy926细胞并通过嘌呤霉素筛选稳定表达株,Western blot检测K15P与K15P(YF)蛋白的表达。Transwell与CCK8实验检测K15P对内皮细胞的增殖迁移影响。结果成功构建慢病毒表达载体,筛选出稳定表达K15P、K15P(YF)蛋白的EA.hy926细胞。在EA.hy926细胞Transwell迁移实验中,与空载体组和K15P突变体组(0.98±0.23)比较,K15P组(2.25±0.15)的EA.hy926细胞的迁移能力明显增强(P<0.01),三组细胞迁移量差异有统计学意义(F=113.5,P<0.01);CCK8增殖活性实验中,与空载体组和K15P(YF)组(109.23±12.58)比较,K15P组(138.69±7.47)的EA.hy926细胞的增殖能力明显增强(P<0.01),三组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=40.78,P<0.01)。结论K15P蛋白增强了内皮细胞的增殖与迁移,而K15P(YF)突变体的促进细胞增殖迁移能力减弱,提示K15P蛋白可能在KS的发生发展中参与重要作用。
- 周畅许常青许方玮方圆陈伟文志林康王林定
- 关键词：慢病毒
- KSHV K15P慢病毒载体的构建及其滴度测定被引量：1
- 2016年
- 目的构建含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)ORF K15P基因的慢病毒载体,并对其在293T细胞内的表达进行研究。方法 PCR法扩增获得KSHV K15P基因,限制性内切酶Nhe I酶切和无缝克隆法构建重组慢病毒载体p CDHCMV-K15P-GFP,通过脂质体转染试剂将重组慢病毒载体与3种辅助质粒p MDL-PRRE、pRSV-Rev和p MD2.g共转染HEK 293T细胞包装产生慢病毒,Western blot法检测K15P蛋白的表达。结果经酶切及测序鉴定,成功构建慢病毒载体,重组慢病毒质粒与辅助质粒共转染HEK 293T细胞可见有荧光表达,说明K15P基因在细胞内有表达并且96 h后产生4×106TU/ml滴度为慢病毒。结论成功构建了KSHV K15P慢病毒表达载体p CDH-CMV-K15P-GFP,获得高效表达K15P基因的慢病毒颗粒,为后续其在细胞内的功能研究奠定实验基础。
- 许常青陈伟方圆汪小五王林定
- 关键词：慢病毒
