张乐
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 不同代次牛成肌细胞的诱导分化及相关基因的表达分析
- 究利用初生龄荷斯坦胎牛的成肌细胞,在不同代次通过含2％马血清的DMEM进行诱导分化,并在诱导分化后0、2、4、6、8、10天观察细胞的形态变化并收集细胞提取总RNA,检测成肌相关基因的表达情况,为进一步研究牛肌肉发生过程...
- 张乐刘扬付常振王洪宝昝林森
- 关键词：成肌细胞诱导分化基因表达
- 秦川牛CROT基因启动子活性分析及转录调控元件分析
- 旨在筛选调控秦川牛肉碱O辛基转移酶基因(CROT)的启动子活性区域及转录因子,为研究该基因的表达调控机制提供理论依据.本研究根据NCBI数据库已公布的牛CROT基因的5'侧翼区序列,以秦川牛外周血基因组DNA为模板,利用...
- 宁越张乐昝林森
- 关键词：黄牛启动子活性转录调控元件
- 腺病毒载体介导Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默被引量：2
- 2018年
- 旨在通过在秦川牛前体脂肪细胞中过表达和沉默Smad3基因,探讨其在秦川牛前体脂肪细胞分化过程中的生物学功能,从而为阐明TGF-β信号通路在牛脂肪组织生长发育过程中发挥的作用提供理论依据。本试验采用Ad5腺病毒改建的AdMaxTM重组腺病毒包装系统成功重组获得了过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3和干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405。感染牛前体脂肪细胞后,利用实时荧光定量检测Smad3基因及脂肪形成相关基因mRNA的表达。结果表明,将获得的具有较高滴度的过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3感染秦川牛前体脂肪细胞3、6、9d后,分别较对照组Smad3基因表达量显著上调了1 031、1 286、633倍(P<0.001)。与对照组相比,高滴度干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405感染牛前体脂肪细胞3、6、9d后,Smad3基因的表达量分别下调了70%、55%、57%(P<0.01)。油红O染色和实时荧光定量结果均证明,Smad3基因抑制了前体脂肪细胞脂质积累并促使标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPα和C/EBPβ的表达显著下调。综上所述,腺病毒载体介导体外表达载体可以成功的实现Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默,并对秦川牛前体脂肪细胞的成脂分化具有一定的调控作用。
- 张乐宁越李佩韦王洪宝昝林森
- 关键词：SMAD3基因前体脂肪细胞腺病毒载体
- 牛Rybp基因的表达特性分析被引量：2
- 2018年
- 【目的】研究牛Rybp基因时空表达图谱,为Rybp基因的功能研究奠定基础。【方法】利用实时定量PCR方法,检测Rybp基因在秦川牛16种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、睾丸、腹膜脂肪、心包脂肪、背最长肌、里脊、大肠、小肠、瘤胃、网胃、皱胃和瓣胃)、5个不同发育阶段(6,12,18,24和60月龄)肌肉、脂肪组织以及不同分化阶段(第0,2,4,6,8和10天)牛成肌细胞中的表达特性。【结果】Rybp基因在成年秦川牛睾丸组织中的表达量远远高于其他组织,是背最长肌的365倍,而在背最长肌、里脊、心脏等组织中的表达量相对较低。Rybp基因在60月龄肌肉组织中表达量是6月龄的7倍,在6,12,18,24月龄表达量呈微弱上升趋势,但差异不显著;Rybp基因在6,12,18,24月龄脂肪组织中的表达量分别是60月龄的8.5,6.5,5.6和2.1倍,差异达显著水平;Rybp基因在成肌细胞分化第2,4,6,8,10天的表达量分别是第0天的3.6,5.0,9.9,7.0和4.3倍。【结论】随着秦川牛年龄的增加,Rybp基因在肌肉组织中的表达水平逐渐升高,在脂肪组织中的表达水平显著下降;在不同分化阶段成肌细胞中,随着成肌细胞分化进程的推进,Rybp基因表达水平逐渐升高,而当分化减速后,Rybp基因表达水平逐渐降低。牛Rybp基因可能对牛肌细胞分化起抑制作用。
- 赵艳芳张乐王亚宁宁越王洪宝昝林森
- 关键词：实时荧光定量PCR肌肉脂肪成肌细胞
- 成肌细胞融合相关机制的研究进展被引量：1
- 2017年
- 成肌细胞融合对于机体生长发育肌肉的生成和受伤后肌管的再生至关重要。它是一个十分复杂的过程,有一个精确的调控网络控制这一过程的进行与终止。早期研究认为成肌细胞融合需要细胞外钙离子参与、细胞膜形态改变和细胞支架的构建。随着进一步的研究,了解到各种相关信号通路的相互交流,一系列分子的严密调控都在成肌细胞融合过程中扮演重要的角色。论文主要就近年来发现的成肌细胞融合过程中的一些信号通路及调控该过程的影响因子进行综述,以期为改善牛肉品质奠定理论基础。
- 昝林森董梦宇王洪宝张乐
- 关键词：信号通路调控分子
- 腺病毒载体介导Smad2基因在秦川牛成肌细胞中的超表达和沉默
- 本实验旨在研究转化生长因子β1(TGF-β1)信号转导通路下游信号分子Smad2基因在秦川牛成肌细胞细胞的表达情况及生物学功能的发挥,从而为研究TGF-β信号通路在秦川牛肌肉和脂肪形成过程中的功能研究奠定基础.本试验首先...
- 张乐宁越李佩韦王洪宝昝林森
- 关键词：SMAD2基因肌肉生长
- 不同代次牛成肌细胞的诱导分化及相关基因的表达分析
- 2014年
- 利用初生荷斯坦牛的成肌细胞,在不同代次以含体积分数为2%马血清的DMEM进行诱导分化,在之后0、2、4、6、8、10d观察细胞的形态变化并收集细胞提取总RNA,检测成肌相关基因的表达情况,为进一步研究牛肌肉发生过程及相关基因的表达调控提供依据。同时利用实时荧光定量PCR分别检测肌性相关基因MyoD(生肌决定因子)、MyoG(肌细胞生成素)以及非肌性相关基因A-FABP(脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白)表达水平的变化。研究表明:1各代细胞在诱导培养4d后开始有肌管形成,其后越来越多,8d时达高峰。2成肌细胞向成熟肌细胞分化过程中,MyoD、MyoG、A-FABP基因都呈先上升然后下降的趋势。3高代次成肌细胞比低代次细胞增殖慢,而且在诱导分化后,肌管的数目明显变少;MyoD、MyoG、A-FABP随着代次的升高而下降。故推断MyoD、MyoG以及A-FABP基因会在成肌分化开始后的不同阶段被激活,从而发挥不同的调控作用,而且随着传代次数的增加成肌细胞的分化能力减弱。
- 张乐刘扬付常振王洪宝昝林森
- 关键词：诱导分化A-FABPMYODMYOG
- IRX3基因在秦川牛不同组织中的表达分析被引量：1
- 2018年
- 【目的】研究IRX3(Iroquois homeobox 3)基因在秦川牛各组织中的表达规律,为通过现代分子技术手段改良秦川牛肉用性状提供理论依据。【方法】根据秦川牛IRX3的mRNA序列设计实时定量特异性引物,采用实时荧光定量PCR方法,检测IRX3基因在秦川牛不同生长发育阶段(胎儿、6月龄、24月龄)不同组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、肌肉(背最长肌))及在6月龄、18月龄、24月龄、60月龄秦川牛脂肪组织中的表达水平。【结果】IRX3基因在秦川牛胎牛、6月龄、24月龄3个阶段均在肺部组织中表达量最高(P<0.01)。IRX3基因在秦川牛心脏、肝脏中的表达量随年龄的增长而极显著增加(P<0.01);在背最长肌中的表达量随生长发育过程的推进而极显著减少(P<0.01);在大肠、肺脏组织中的表达量从胎牛到6月龄逐渐降低,从6月龄到24月龄极显著增加(P<0.01)。随着年龄的增长,秦川牛脂肪组织中IRX3基因的表达量呈先升高后降低最后再升高的变化趋势,18月龄表达量最高,极显著高于其他年龄段(P<0.01);其次是6月龄,表达量极显著高于24~60月龄(P<0.01)。【结论】IRX3基因在不同阶段秦川牛的肺部组织中均有较高水平的表达;IRX3基因在脂肪组织中的表达量与牛生长速度正相关,推测IRX3基因在秦川牛发育过程中与脂肪沉积有密切联系。
- 宁越吴森张乐昝林森
- 关键词：实时荧光定量PCR脂肪基因表达
- 牛A-FABP与SREBP1基因的组织表达规律研究被引量：9
- 2014年
- A-FABP(脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白)和SREBP1(固醇调节元件结合蛋白)是动物体内参与脂肪沉积和脂质合成的重要基因。为了研究这两种基因在牛组织中的表达规律,研究利用qRT-PCR技术检测A-FABP和SREBP1在荷斯坦牛13种组织中表达水平,并进一步比较了这两个基因在秦川牛和雪龙黑牛脂肪、肌肉和肝脏的组织中表达差异。研究结果表明A-FABP基因在脂肪组织中的表达水平远远高于其他组织,SREBP1基因在各组织中均有表达,脂肪组织的相对表达量最高。A-FABP基因在雪龙黑牛肌肉和肝脏组织中的表达量显著高于秦川牛的肌肉和肝脏(P<0.05),而在脂肪组织中,秦川牛和雪龙黑牛该基因表达量无显著差异(P>0.05)。SREBP1基因在雪龙黑牛肌肉和肝脏组织中的表达量显著高于秦川牛的肌肉和肝脏(P<0.05),而在脂肪组织中,秦川牛表达量显著高于雪龙黑牛(P<0.05)。由于A-FABP和SREBP1在脂肪中表达量最高,且它们的表达量在脂肪沉积能力不同的秦川牛和雪龙黑牛肌肉和肝脏组织中存在显著差异,故推断这两种基因在牛脂肪组织的脂质代谢过程中发挥重要作用,对脂肪的沉积和大理石花纹牛肉的形成起到一定的调控作用。
- 张乐彭燮刘扬付常振王洪宝昝林森
- 关键词：A-FABP基因QRT-PCR
