卫娜
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省留学归国人员基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 鹅细小病毒野毒株VP3基因的原核表达及抗原性检测被引量：7
- 2009年
- 根据发表的鹅细小病毒(GPV)基因序列设计合成了2对检测GPV的特异性引物,用其对疑似小鹅瘟的病料进行PCR检测,经序列比对后确定为GPV感染;利用引物Gs/Ga扩增获得的GPV野毒株VP3基因,测序后将VP3基因连接到原核表达载体pET-30a上,获得重组质粒pET-30a-VP3,将其转化感受态菌Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约为66 000 u的重组融合蛋白,表达的蛋白以包涵体形式存在于菌体中。表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。Western-blot分析结果显示,纯化的蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,证实表达的蛋白具有较好的抗原性。
- 鞠环宇卫娜尚绪增荆志强郭鹭马波王君伟
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因原核表达纯化抗原性
- 牛IFN-γ单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2011年
- 为进一步研究牛IFN-γ(BoIFN-γ)单克隆抗体在牛免疫学以及牛疫病诊断中的应用,用原核表达的重组牛IFN-γ(rHis-BoIFN-γ)免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,免疫3次后取其脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用建立的间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经3～5次亚克隆,最终获得12株能稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株。Ig亚类鉴定结果显示这12株杂交瘤细胞均为IgG,其中5株为IgG1,3株为IgG2a,4株为IgG2b。这12株杂交瘤细胞在体外具有稳定分泌抗牛IFN-γ单克隆抗体的能力。Western-blot及间接ELISA证明这12株单克隆抗体均可特异性地结合rBoIFN-γ蛋白。间接免疫荧光试验显示,这12株单抗均与真核细胞BHK-21表达的rBoIFN-γ产生荧光反应,证明这些单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。ELISA叠加试验表明,3C2与1H4、1G6与1G4针对不同表位,1A10、1B2、2B9、3C4四株和1C1与1G6、1G4与3C2、1A10与1G8针对相同或相近的表位。
- 曹黎黎刘丹丹卫娜高明春王君伟
- 关键词：单克隆抗体特异性鉴定
- 抗鹅细小病毒NS1蛋白单链抗体的构建、表达及活性初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 王锐鞠环宇王兆鹏卫娜霍慧仇铮马波王君伟
- 关键词：鹅细小病毒单链抗体活性核苷酸组成病毒分类
- 鹅IL-2成熟基因的表达及重组蛋白生物活性检测
- 2009年
- 从PHA活化的东北白鹅外周血淋巴细胞中分离提取总RNA,利用反转录PCR技术扩增获得鹅IL-2(GoIL-2)基因,连接至克隆载体后进行测序鉴定,结果与预期大小一致。将去除信号肽的成熟基因亚克隆至原核表达载体,构建原核重组表达质粒并转化至大肠杆菌中进行诱导表达,用表达纯化的融合蛋白制备多克隆抗血清。此外,体外淋巴细胞增殖实验结果显示,鹅GoIL-2重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性,这为进一步研究GoIL-2的功能奠定了基础。
- 卫娜鞠环宇王君伟
- 关键词：白细胞介素-2克隆多克隆抗体生物活性
