陶冶
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- S-腺苷甲硫氨酸合成酶的可溶性表达
- 2012年
- 系统考察了pET可溶性表达系统对酵母来源的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因的表达情况,结果显示:当采用含Nus.Tag融合标签的pET-44a为载体,trxB和gor双突变的Ori-gami为宿主时最适合目的蛋白的可溶性表达。进一步考察不同来源(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌)SAM合成酶的可溶性时,也得到了相似的结论;比较发现酵母来源的SAM合成酶可溶性表达的比活力最高达60.9U/mg。
- 陶冶周佳佳张书翠付水林宫衡
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶宿主菌可溶性比活力
- Red重组系统在克雷伯氏肺炎杆菌中的应用研究被引量：5
- 2011年
- 通过改造pKD46与pCP20质粒为含四环素抗性标记的pKD46-Tc与pCP20-Tc重组质粒,初步建立了一套能在K.pneumoniae菌株中运用的Red重组系统。以荚膜基因中的高保守基因wzi为敲除对象,导入同源臂为250 bp的打靶片段△wzi::FK,转化后得到6个重组子,初步确定敲除了K.pneumoniae菌株的荚膜基因wzi。
- 莫隽颖陶冶周佳佳高黎荣付水林宫衡
- 关键词：克雷伯氏肺炎杆菌RED重组基因敲除
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：4
- 2010年
- 根据GenBank报道的黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因序列设计两对特异性引物,分别以黑曲霉H7总RNA及基因组DNA为模板,扩增出β-葡萄糖苷酶基因bgl全长及活性中心所在的外显子5序列E5,分别将其连接到pMD18-T载体并转化到大肠杆菌DH5α测序。结果表明,bgl序列全长2583 bp,与β-葡萄糖苷酶基因(XM001398779.1)核苷酸序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%,E5与bgl外显子5区域同源性为100%。进一步构建表达质粒pET32a(+)-bgl、pET32a(+)-E5、pET28a(+)-E5,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳分析。
- 周晓明莫隽颖陶冶付水林宫衡
- 关键词：黑曲霉Β-葡萄糖苷酶蛋白表达
