陈玲
- 作品数:20 被引量:36H指数:4
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 禽腺病毒的分离鉴定及LMH细胞适应毒的生物学特性研究被引量:9
- 2018年
- 为了对采集自北京平谷某养殖场发病鸡中出现心包积液综合征症状的病料进行病毒分离和鉴定,将病料接种LMH细胞进行病毒分离,并在LMH上连续传代,取C5和C15代细胞毒分别接种3周龄SPF鸡进行致病性试验。根据分离病毒在LMH上的CPE特征、病毒血清中和试验、Hexon基因序列比对分析、SPF鸡致病性回归试验,表明从发病鸡病料中分离的一株病毒为血清4型禽腺病毒;病毒在LMH细胞盲传3代后,就能很好地适应细胞培养,出现禽腺病毒典型的CPE;培养至第10代,病毒在接种后72 h,病毒含量即可达到107.4TCID50/0.1m L的峰值滴度;接种细胞毒的SPF鸡出现4型禽腺病毒导致的典型临床症状和特异性剖检病理变化,两组接种鸡的死亡率分别为100%和70%。结果表明,研究分离到的4型禽腺病毒毒株对SPF鸡具有高致死率,但病毒经过细胞连续传代后对鸡的致死率降低。
- 陈玲张兵宋亚芬刘月焕蒋桃珍
- 关键词:禽腺病毒
- 一种表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组病毒载体的构建与应用
- 本发明构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组火鸡疱疹病毒,将该重组病毒株制备成活疫苗,可预防马立克氏病和传染性法氏囊病;通过同源重组的方法,应用该载体表达外源基因,为火鸡疱疹病毒作为载体构建抗马立克氏病和其他病原...
- 蒋桃珍张勇宋亚芬杨宵玥陈玲陈光华杨承槐
- 3型鸭甲型肝炎病毒逆转录环介导等温扩增技术快速检测方法的建立被引量:3
- 2016年
- 为建立一种3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)的快速检测方法,本研究针对DHAV-3 VP1基因序列中的8个不同区段设计了3对特异性引物,并对反应体系进行优化,通过加入羟基萘酚蓝(HNB)实现对反应结果的可视化观察,建立了检测DHAV-3的逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)方法,采用已建立的方法对人工感染雏鸭的血清样品和病死鸭肝组织样品提取的核酸进行了检测。结果显示,该方法仅对DHAV-3的RNA进行扩增,而对1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)以及鸭常见的病原RNA均无扩增反应;可以检测出10拷贝/μL的DHAV-3 RNA,其敏感性为RT-PCR的1 000倍;最低能够检测到相当于1.1个DELD50的DHAV-3;能够检测到人工感染雏鸭血清和病死鸭肝组织中的DHAV-3;上述结果表明该方法能够特异、灵敏、快速地检测DHAV-3,而且使用方便。
- 张映范书才张兵陈玲秦义娴
- 关键词:RT-LAMP
- 一株鸡传染性喉气管炎病毒流行毒株的鉴定与致病性分析
- 2023年
- 为评价一株鸡传染性喉气管炎病毒流行毒株在疫苗效力评价中的应用表现,对制备的一株强毒株进行了系统鉴定,包括性状、纯净性、真空度、病毒含量、特异性等,尤其重点关注不同病毒含量对不同日龄鸡只的致病力情况。结果显示,本研究制备的鸡传染性喉气管炎病毒冻干物性状良好,无细菌、支原体和外源病毒污染,可被特异性血清完全中和,病毒含量稳定在105.1EID50/0.2mL。该毒株致病力表现稳定,100 EID50可使80%鸡只发病或死亡,可作为一株良好的检验用强毒,为后续疫苗评价奠定基础。
- 王静文张敏陈玲杨承槐蒋桃珍
- 关键词:鸡传染性喉气管炎效力检验
- 鸡滑液支原体的分离鉴定与多位点序列分型
- 2022年
- 为研究国内鸡滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的流行情况,2016-2021年间从山东、四川、河北等9省份共计分离到54株MS,通过多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)方法对分离株进行基因分型,同时结合国内外的分离株信息,进一步分析了不同菌株间的进化关系。结果表明,54株MS分离株可分为9种ST型,分别是34、44、93、95、96、102、103、148、153,主要流行的ST型为ST34和ST93;按照进化关系可分为A-I共9类,其中最主要的流行株为A类和E类。通过对国内外MS流行株进行遗传进化分析,可依据地域将其分为亚洲株、欧洲株、北美株和其他株,其中中国分离株有独特的地域进化分支。本研究结果丰富了国内的MS流行病学数据,对防控与净化MS具有重要意义。
- 田野朱杰陈玲杜鹏飞
- 关键词:多位点序列分型
- 致病性大肠杆菌HPI毒力岛及其水平转移的研究进展
- 2023年
- 致病性大肠杆菌作为肠杆菌科成员和人兽共患病病原体之一,在一定条件下可通过多种途径引起人和动物感染并引发不同的大肠杆菌病病型。由于致病性大肠杆菌的血清型和毒力因子众多、耐药趋势严峻、存在生物被膜等因素导致大肠杆菌病的流行趋势复杂且疫苗研发困难,给国内外的畜禽养殖业带来一定的经济损失。高致病性岛(high-pathogenicity island,HPI)最早发现于耶尔森菌,被证实是其毒力表型所必需的基因组岛,为强毒力岛。由于细菌的水平转移机制让该毒力岛在其他肠杆菌科中被广泛检出。其中HPI毒力岛也在致病性大肠杆菌如肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhage Escherichia coli,EHEC)、产志贺毒素大肠杆菌(shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)等中被大量检出,被证实影响致病性大肠杆菌毒力,参与致病性大肠杆菌铁元素摄取和介导宿主免疫反应等。为进一步了解HPI毒力岛在致病性大肠杆菌中的铁元素调控机理、致病特性、介导的细胞免疫反应和水平转移途径,现从HPI毒力岛结构、如何调控耶尔森菌素铁载体、HPI毒力岛致病性及调控细胞免疫反应、HPI毒力岛的水平转移进行概述,以期望为大肠杆菌的致病机理及大肠杆菌病的防控提供帮助。
- 邹宏罗干陈玲杜鹏飞张乾义杨承槐田野
- 关键词:致病性大肠杆菌
- 一株1型非洲马瘟疫苗毒种的初步鉴定被引量:1
- 2022年
- 为做好非洲马瘟疫苗的储备性研究,以更好应对我国周边地区非洲马瘟疫情传入风险,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心的一株1型非洲马瘟病毒鼠脑组织毒进行了复壮和细胞适应性培养,并对其病毒含量、特异性、对小鼠毒力等进行测定。结果显示,该毒种在Vero细胞连续传代至F10代后病变产生明显,病毒含量可稳定在10^(6.5) TCID_(50)/0.1mL以上;对小鼠毒力表现稳定,细胞适应毒也可达10^(6.5) TCID_(50)/0.1mL。根据OIE参考引物进行RT-PCR鉴定,序列比对证实该毒株为血清1型,与泰国毒株THA2020/01拥有99.7%的同源性。血清学试验结果表明,该毒株可被非洲马瘟1型特异性血清中和。本研究获得了一株Vero细胞适应毒,可作为良好的疫苗毒株候选株,适用于规模化生产,为疫苗储备奠定良好基础。
- 王静文张敏宋亚芬张兵张桂铭王磊苗清新陈玲杨承槐
- 关键词:非洲马瘟病毒VERO细胞
- 一株鸡传染性支气管炎病毒的鉴定及S1基因序列分析被引量:2
- 2017年
- 将分离到的一株疑似鸡传染性支气管炎病毒接种SPF鸡胚增殖,通过致鸡胚矮小化试验、红细胞凝集试验、对新城疫病毒增殖干扰试验、动物回归试验及RT-PCR分子鉴定,结果证实该病毒为鸡传染性支气管炎病毒(IBV)。应用MEGA5分析软件,与Gen Bank上IBV常见疫苗株、流行毒株和部分参考株进行序列比对,其S1基因序列与近年来我国流行毒株同源性较高,为95%~99%,与传统疫苗株H120、H52、M41和W93同源性较低,仅为77%~79%。
- 张敏王静文陈玲蒋桃珍
- 两株H3N2亚型猪流感病毒的遗传进化及分子特征分析被引量:1
- 2020年
- 为了对2012年广州规模化养猪场疑似流感病料中分离鉴定的2株猪流感病毒A/swine/Guangdong/1519/2012(H3N2)(简称GD1519)和A/swine/Guangdong/1520/2012(H3N2)(简称GD1520)进行遗传进化及分子特征分析,对两株病毒进行了全基因组的测序分析。通过对其8个基因片段的基因来源进行分析,构建系统进化树,遗传进化分析结果显示GD1519 HA、PB2、PA和NP基因片段均来源于近期人源H3N2亚型Moscow/99-like亚分支;其NA和PB1基因片段来源于早期人源H3N2亚型Victoria/75-like亚分支;其M和NS基因片段来源于近期人源H3N2亚型New York/99-like亚分支。GD1520病毒的HA基因片段来源于近期人源H3N2亚型Moscow/99-like亚分支;其NA和PB1基因来源于近期人源H3N2亚型New York/99-like亚分支;其PB2、PA、NP、M和NS基因片段均来源于早期人源H3N2亚型Victoria/75-like亚分支。分析结果暗示2株病毒可能均由不同时期的类人源H3N2亚型流感病毒间基因重排而产生的新型H3N2亚型猪流感病毒。本研究结果进一步证明猪可能是不同来源流感病毒的基因“混合器”,因此开展猪流感病毒相关分子流行病学研究具有重要的公共卫生意义。
- 张勇宋亚芬陈玲张兵张敏王静文杨承槐蒋桃珍
- 关键词:猪流感病毒H3N2亚型遗传进化分析分子特征分析
- 一种鸭肠炎病毒毒株及其制备方法与应用
- 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种鸭肠炎病毒毒株及其制备方法与应用。本发明的鸭肠炎病毒毒株的US4基因缺失第468‑1362位碱基。其对鸭无致病性,且具有良好的免疫原性,能够实现抗鸭肠炎病毒的免疫保护。其可作为疫苗候...
- 杨承槐苗清新宋亚芬杨宵玥张敏张兵陈玲王静文