郑云梅
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 树突状细胞与黑色素瘤细胞体外共培养体系对小鼠黑色素瘤形成的影响被引量：4
- 2017年
- 目的探讨树突状细胞(DC)与黑色素瘤细胞(B16)体外共培养后对小鼠黑色素瘤形成的影响。方法提取小鼠骨髓细胞,分化DC,培养至第6天,将细胞分为4组,脂多糖(LPS)组、聚肌胞[Poly(IC)]组、Melan-A抗原肽(Melan-A)组分别加入DC佐剂LPS(终浓度100 ng/m L)、Poly(IC)(终浓度20 ng/m L)、Melan-A抗原肽(终浓度5μmol/L)进行处理,未处理组未进行干预。采用流式细胞术检测DC成熟状态。B16细胞与培养第6天的DC共培养2 d。取C57BL/6J小鼠皮下注射B16细胞(8只),DC+B16细胞(8只),LPS(8只)、poly(IC)(8只)、Melan-A抗原肽激活(8只)的DC+B16细胞,接种B16细胞1周再接种DC+B16细胞(5只),对照组(3只)不接种细胞。于接种第14天取部分小鼠处死,取脾脏,镜下观察其组织形态;接种第28天测算肿瘤体积。结果 LPS组、Poly(IC)组、Melan-A组成熟DC多于未处理组。接种DC+B16细胞的小鼠未见肿瘤生长;接种第28天,与接种B16细胞的小鼠比较,接种LPS、poly(IC)、Melan-A抗原肽激活的DC+B16细胞及接种B16细胞1周再接种DC+B16细胞的小鼠肿瘤体积减小(P均<0.05)。与对照组比较,第14天接种DC+B16细胞小鼠脾脏滤泡结构无明显变化,而接种B16细胞及LPS、poly(IC)、Melan-A抗原肽激活的DC+B16细胞小鼠,脾脏滤泡结构增加。结论DC与B16共培养可抑制小鼠黑色素瘤的形成。
- 郑云梅和晨辰王世忠沈万秋李海东
- 关键词：黑色素瘤树突状细胞免疫治疗小鼠
- 细胞胆固醇外流率的测定以及细胞外胆固醇和脂多糖对其的抑制作用被引量：4
- 2016年
- 背景:胆固醇与动脉粥样硬化等疾病的发生、发展密切相关。目前研究细胞胆固醇动态变化的方法有局限性。目的:通过BODIPY-Cholesterol标记RAW 264.7小鼠巨噬细胞,检测细胞胆固醇的外流率,并研究细胞外胆固醇浓度和脂多糖对其的影响。方法:RAW264.7细胞采用含有体积分数10%FBS的DMEM培养基体外培养,再用0.025 mmol/L的BODIPY-Cholesterol标记细胞1,2,4,8 h,以无血清DMEM洗涤细胞后,再孵育细胞6,12,24,48,96 h,优化标记细胞的时间及孵育时间。分别采用胆固醇、脂多糖、异常高胆固醇人血清和正常胆固醇人血清处理细胞,再对其胆固醇外流率进行测定和比较。结果与结论:BODIPY-Cholesterol标记细胞2-8 h后,测定胆固醇外流率的结果较好。RAW 264.7小鼠巨噬细胞经过BODIPY-Cholesterol荧光染料标记2 h后,测定胆固醇外流率,发现其随外加胆固醇浓度(0.1,0.5,2.5 mmol/L)的增大呈递减趋势(P<0.01)。脂多糖刺激后细胞的胆固醇外流率降低(P<0.05)。采用高胆固醇人血清处理细胞后,胆固醇的外流率降低(P<0.05)。结果说明,利用BODIPY-Cholesterol可以定量测定细胞胆固醇外流率,并能研究环境中胆固醇和脂多糖对其的影响。
- 刘杰郑云梅田志辉常光明李海东
- 关键词：胆固醇脂多糖RAW
