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王亚楠: 作品数：23 被引量：49H指数：4; 供职机构：河南科技学院动物科学学院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划河南省科技攻关计划更多>>; 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生天文地球更多>>

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食品总铬质量浓度icELISA试剂盒的研制及初步应用被引量：1: 2017年; 为研制食品中总铬质量浓度检测间接竞争ELISA(icELISA)试剂盒(Cr-Kit)。利用蛋白质连接技术合成免疫原Cr^(3+)-iEDTA-BSA,紫外扫描(UV)和电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)进行鉴定;用Cr^(3+)-iEDTA-BSA免疫BALB/c小鼠,细胞融合技术筛选抗Cr^(3+)-EDTA mAb细胞株,体内诱生腹水法制备Cr^(3+)-EDTA mAb,并对其特性进行分析;应用Cr^(3+)-EDTA mAb研制Cr-Kit,测定其性能并进行初步应用。结果表明,免疫原制备成功,Cr^(3+)-iEDTA-BSA中Cr^(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L;筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5共3株杂交瘤细胞株,其中2A11G5最好,经6次传代分泌抗体稳定,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,与其他重金属离子无交叉反应;Cr-Kit标准曲线的线性范围为1.0~264μg/L,检测限为1.0μg/L,IC50为8.37μg/L,河水样、大米样、面粉样和猪肉样的平均加标回收率分别为101.7%、96.47%、95.8%和84.3%,Cr-Kit与国标(GB5009.123-2014)石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)的符合率为100%。本研究成功研制了Cr-Kit,可满足食品总铬残留的检测要求。; 王亚楠王晓斐王晓斐张海棠张海棠; 关键词：CR3+单克隆抗体

铬离子单克隆抗体的制备及食品总铬含量检测胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：4: 2016年; 目的:制备三价铬离子螯合物单克隆抗体(Cr^(3+)-EDTA m Ab),研制胶体金免疫层析试纸条(Cr-Strip)。方法:用异硫氰酯法合成Cr^(3+)-i EDTA-BSA,UV和ICP-AES进行鉴定;细胞融合技术筛选Cr^(3+)-EDTA m Ab细胞株,体内诱生腹水法制备Cr^(3+)-EDTA m Ab,并对其特性进行分析;应用Cr^(3+)-EDTA m Ab研制Cr-Strip,并测定其性能。结果:筛选出3株杂交瘤,最好的是2A11G5,Ka为2.69×109L/mol,对Cr^(3+)-EDTA的IC50为9.84μg/L,与其他重金属离子无交叉反应;Cr-Strip的检测时间为10 min,检测限为5μg/L,其检测结果与ICP-AES符合率为100%。结论:制备出了高质量的Cr^(3+)-EDTA m Ab,研制出更为灵敏的Cr-Strip。; 王亚楠王晓斐丁菡张海棠范国英王自良; 关键词：单克隆抗体胶体金免疫层析

一种基于直接竞争酶联免疫法检测镉离子试剂盒及其应用: 本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法镉离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Cd‑IT...; 姜金庆刘长忠王磊贺永惠杨雪峰王自良范国英胡建和雷壮牛琳琳王亚楠刘耀东

Hg^(2+)人工免疫原的制备及免疫特性鉴定: 2017年; 为了建立重金属汞离子(Hg^(2+))免疫学检测方法,试验采用异硫氰酯法将双功能螯合剂ITCBE与Hg^(2+)螯合形成半抗原,然后将其与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(0VA)耦联合成人工免疫原Hg^(2+)-ITCBE-BSA和包被原Hg^(2+)-ITCBE-OVA,用紫外扫描分析(UV)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用Hg^(2+)-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法测定多克隆抗体(p Ab)效价,阻断ELISA法鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明:免疫原Hg^(2+)-ITCBE-BSA和包被原Hg^(2+)-ITCBE-OVA制备成功,Hg^(2+)-ITCBEBSA中BSA和Hg^(2+)的含量分别为9.09 g/L和45.88 mg/L;间接ELISA法检测效价达到1∶1.024×105,阻断ELISA法检测Hg-EDTA的IC50为45.49 g/L。说明Hg^(2+)人工免疫原制备成功。; 秦保亮姜金庆孙勇付世杰王亚楠范国英王自良; 关键词：半抗原人工免疫原

汞的毒性作用及在动物性食品中的检测现状被引量：5: 2017年; 随着汞的广泛使用,其对环境的污染越来越严重,通过食物链进行循环富集作用,对人类健康构成威胁。文章简述汞在不同形态下对动物和人的危害机理,分析重金属汞的污染来源和残留情况,分析目前国内外对动物性食品的重金属汞限量标准,并对汞的检测现状和发展趋势进行展望分析。; 秦保亮姜金庆孙勇付世杰王亚楠范国英王自良; 关键词：毒性作用污染

一种人工抗原乳化器: 本实用新型公开了一种人工抗原乳化器，主要由底座、固定于底座上的立柱和固定于立柱上的电机构成，其中底座的上部设有载物台、定时开关、调速开关和电源开关，底座的侧壁设有储物柜和电源插头，底座的内部设有控制电路板，该控制电路板分...; 姜金庆王亚楠王自良范国英王方明秦保亮齐红霞孙勇付世杰; 文献传递

一种镉离子直接竞争ELISA试剂盒及其应用: 本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法镉离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Cd‑IT...; 姜金庆刘长忠王磊贺永惠杨雪峰王自良范国英胡建和雷壮牛琳琳王亚楠刘耀东; 文献传递

B族黄曲霉毒素抗原合成设计及特异性、广谱性抗体制备与特性分析被引量：3: 2019年; 为制备B族黄曲霉毒素(BGAFs)特异性强、广谱性好的抗体,本研究根据黄曲霉毒素B1(AFB1)的分子结构和活性位点,采用肟化活泼酯法(OAE)、氨甲基化法(MOA)、混合酸酐法(MA)、半缩醛法(SA)、环氧化物法(EP)和烯醇醚衍生物法(EED)6种方法合成BGAFs人工抗原AFB1-BSA,并通过UV和SDS-PAGE进行鉴定;采用AFB1-BSA免疫新西兰白兔制备多克隆抗体(AFB1 pAb),间接ELISA检测AFB1 pAb效价,间接竞争ELISA(icELISA)分析其敏感性,交叉反应试验(CR)分析其特异性和广谱性。结果表明,AFB1-BSA合成成功,在BGAFs抗原合成的6种方法中OAE效果最好,AFB1与BSA的分子结合比为8.46∶1;AFB1 pAb的间接ELISA效价为1∶(1.28×104),IC50为10.32μg·L-1,与AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2的CR分别为75.21%、44.13%、14.72%、16.36%、1.44%。本研究制备出了高效价、敏感、特异、广谱的AFB1 pAb,为BGAFs免疫检测方法的建立奠定了物质和技术基础。; 张海棠王晓斐职爱民王亚楠王自良; 关键词：多克隆抗体特性分析

重金属锌离子人工抗原的合成及抗体特性被引量：1: 2017年; 研究锌离子人工抗原的合成及其多克隆抗体(pAb)的制备。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)螯合Zn^(2+)合成Zn-ITCBE半抗原、异硫氰酯法制备免疫抗原Zn-ITCBE-BSA和包被原Zn-ITCBE-OVA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行鉴定;用Zn-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA测定Zn pAb效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验其特异性。结果表明,Zn-ITCBE-BSA偶联成功,Zn-ITCBE和BSA的分子结合比为25∶1,Zn pAb效价达到1∶(2.56×104),对Zn^(2+)的IC_(50)为9.23,与其他重金属离子的交叉反应率低,获得高价、敏感、特异的Zn pAb,为锌离子残留污染的免疫学检测方法的建立奠定基础。; 付世杰孙勇王亚楠王自良; 关键词：半抗原人工抗原抗体

抗重金属Cr^(3+)单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析被引量：3: 2016年; 旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr^(3+)单克隆抗体(Cr^(3+)mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr^(3+)形成Cr^(3+)-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr^(3+)-ITCBE-BSA和检测抗原Cr^(3+)-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)进行免疫原鉴定;用Cr^(3+)-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立Cr^(3+)mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cr^(3+)mAb,并对其免疫学特性进行分析。结果表明,免疫原制备成功,Cr^(3+)-ITCBE-BSA中Cr^(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L,筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5 3株杂交瘤细胞,其中最好的2A11G5间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(2.56×103)、腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,对Cr^(3+)的半数抑制质量浓度(IC50)为16.6μg/L,与其他重金属离子无交叉反应。表明成功研制亲和力高、特异性强、稳定性好的Cr^(3+)mAb,为铬离子残留免疫学检测方法的建立奠定基础。; 王亚楠丁菡王晓斐雷壮牛琳琳王自良; 关键词：CR^3+人工免疫原单克隆抗体免疫学特性

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