万文杰
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中南民族大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 谷氨酰胺转胺酶基因的结构分析及定点突变
- 2015年
- 根据分离得到的吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因,预测其三维结构,确定其酶活中心,并构建定点突变体。用PCR扩增谷氨酰胺转胺酶基因,通过SWISS-MODEL在线预测三维结构,找到酶活中心,确定突变位点,将361位的组氨酸(CAC)突变成赖氨酸(AAA),将突变后的基因片段连接到pET-22b(+)上得到重组质粒pET-22b(+)-MTG,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。结果显示,通过对比已有的三维结构模型,找到了酶活中心,并通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术成功构建了突变体。
- 代风娇詹锐覃桂万文杰何冬兰
- 关键词:谷氨酰胺转胺酶定点突变