张璇 作品数:2 被引量:1 H指数:1 供职机构: 浙江理工大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
稳定下调SIRT1基因表达的肝癌细胞系的构建 2011年 SIRT1(silent information regulator 1)与多种肿瘤的发病过程关系密切,但是其在肝癌中的作用尚不明确。为了研究SIRT1与肝癌的关系,通过构建慢病毒载体,病毒转染和包装,嘌呤霉素的筛选等实验方法,成功构建能稳定下调SIRT1基因表达的肝癌细胞系Hep3B和PLC/PRF/5,为后期进一步研究SIRT1在肝癌发病过程中的功能奠定了基础。 张璇 刘佳 马蕾娜 胡徐庞 刘立 钱程关键词:SIRT1 嘌呤霉素 慢病毒载体 肝癌细胞系 真核表达Hsa-miR-1基因及其检测方法的建立 被引量:1 2011年 获得Hsa-miR-1的方法主要由人工合成,需耗费很高的成本与时间。文章通过将Hsa-miR-1前体部分连接至pcDNA3.0,可实现Hsa-miR-1基因的高表达。构建含有Hsa-miR-1基因表达前体的表达载体pcDNA-Hsa-miR-1和含有与Hsa-miR-1基因完全互补序列的检测载体pEGFP-C1-CM1。通过共转染pcDNA-Hsa-miR-1和pEGFP-C1-CM1检测Hsa-miR-1基因的表达,并采用Taqman探针法定量检测Hsa-miR-1基因表达水平,成功构建了可高效表达Hsa-miR-1基因的真核生物质粒pcDNA-Hsa-miR-1,并首次建立起Hsa-miR-1基因的检测系统pEGFP-C1-CM1,该检测系统的建立将为今后Hsa-miR-1在肿瘤细胞中的研究提供准确、快捷的检测方法。 胡徐庞 李伟 曹跃芬 张璇 黄青红 徐科 杨耿兵 魏旭斌 钱程 刘立