丁小江
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- ^(99)Tc^m标记VPAC1配体TP1724及其在动物体内分布与显像研究被引量：1
- 2016年
- 目的制备同位素^(99)Tc^m标记血管活性肠肽受体(vasoactive intestinal peptide receptor,VIPR)结合肽TP1724(标记率>90%),鉴定其理化性质,并探讨其在正常动物体内的生物分布特点、示踪动力学及显像表现。方法制备G(D)AGG-Aba-VP2(TP1724);^(99)Tc^m间接标记TP1724(Sn Cl2·2H2O还原法),纸层析法测定标记率和比活度;稳定性实验(体外)、人血浆蛋白结合实验、半胱氨酸置换实验及脂/水分配实验等鉴定标记多肽的理化性质;35只正常小鼠分成7组,每只尾静脉注射3.7 MBq^(99)Tc^m-TP1724后于不同时间处死,收集9种组织器官并称取质量、分别测定各种组织器官的放射性,换算为%ID/g(每克组织百分注射剂量);9只健康家兔各静脉注射37 MBq^(99)Tc^m-TP1724后不同时间取血,测定血液放射性并换算为k Bq/L,经DAS 3.1.6软件处理判断最佳房室模型,并得出动力学参数;5只健康家兔分别静脉注射37 MBq^(99)Tc^m-TP1724,SPECT动态显像观察体内放射性分布变化。结果^(99)Tc^m-TP1724的标记率(96.57±0.71)%,比活度(25.52±0.29)TBq/mmol。室温下隔绝空气放置4 h,放化纯度为(93.64±2.25)%;Sephadex G-50柱层析示,^(99)Tc^m-TP1724血浆蛋白结合率约为6.61%;^(99)Tc^mTP1724与不同浓度半胱氨酸37℃温育1 h后,未结合^(99)Tc^m含量无明显变化;脂/水分配系数lg P为-(1.99±0.02)。^(99)Tc^m-TP1724在健康家兔体内的动力学符合权重为1的二室模型,分布半衰期t1/2α为(2.64±1.32)min,消除半衰期t1/2β为(78.36±13.38)min。体内生物分布和/或动态显像示:血液放射性清除迅速;颈部及胃区未见异常放射性聚集,脑部显示低放射性分布;放射性大部分通过肾脏排泄,少量经肝胆分泌。结论^(99)Tc^m-TP1724标记方法简便、标记率和比活度高、稳定性好、体内动力学性质优良。
- 丁小江郑磊黄定德潘登谢来平刘杰陈杰郭威厉红民李前伟
- 关键词：同位素标记生物分布
- 两条肿瘤靶向抑制肽的修饰及作用靶点的初步研究
- 2016年
- 目的探讨两条肿瘤靶向抑制肽(QKRKRKKSRKKH、RKRKRKKSRYIVLS)经化学修饰后(N端乙酰化、C端酰胺化)的稳定性,并初步探讨其作用靶点。方法3H-TdR掺入法、CCK-8法分别探讨多肽修饰前后对A549细胞增殖、活力的影响;高效液相色谱法(HPLC)测定多肽在10%血清条件下,不同时间点(12、24 h)的剩余量,评价其修饰前后在血清中的稳定性;构建GST标签的多肽(GST-多肽)融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中诱导表达、纯化;免疫共沉淀法鉴定GST-多肽融合蛋白能否与VEGFR-1、VEGFR-2结合。结果多肽RKRKRKKSRYIVLS经化学修饰后在10%血清环境下对A549细胞增殖的抑制率由(2.63±6.19)%提高至(48.50±7.14)%(P<0.01),对A549细胞活力的抑制率由(1.30±7.90)%提高至(20.80±5.90)%(P<0.01),24 h后多肽在血清中的剩余量由(56.04±1.81)%提高至(64.64±0.30)%(P<0.01);多肽QKRKRKKSRKKH化学修饰前后在10%血清环境下对A549细胞增殖的抑制率分别为(28.38±5.63)%、(34.25±10.90)%(P>0.05),对A549细胞活力的抑制率分别为(8.09±5.84)%、(15.07±8.09)%(P>0.05),24 h后多肽在血清中的剩余量由(72.72±2.60)%提高至(77.43%±1.78)%(P<0.05);免疫共沉淀表明这两条多肽均能与VEGFR-1、VEGFR-2结合。结论 VEGFR-1、VEGFR-2为这两条肿瘤靶向抑制肽的作用靶点;多肽RKRKRK KSRYIVLS、QKRKRKKSRKKH修饰后在血清环境下稳定性明显提高,修饰后的RKRKRKKSRYIVLS对A549细胞增殖及活力的抑制能力明显增强。
- 刘杰丁小江郑磊李前伟黄定德
- 关键词：血管内皮生长因子受体GST融合蛋白免疫共沉淀3H-TDRCCK-8
