郭强
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RunX2的真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响被引量：2
- 2015年
- 目的构建人Run X2真核表达载体,观察Run X2对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法运用逆转录PCR(RT-PCR)扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Run X2基因插入pc DNA3.1真核表达载体中;并经酶切、PCR、测序鉴定;将构建的Run X2真核表达载体瞬时转染MCF-7细胞,利用Western blot法检测Run X2蛋白表达,用MTT实验和细胞划痕实验检测其对乳腺癌细胞的生物学影响。结果构建的Run X2真核表达载体在MCF-7细胞中高表达Run X2蛋白;发现高表达Run X2的MCF-7细胞活力增加,移动能力增强。结论构建的Run X2真核表达载体能促进乳腺癌细胞的增殖和迁移。
- 赵明范楚玲郭强汪思应李菲菲
- 关键词：RUNX2乳腺癌
- 苹果皮提取物及有效成分C3G对小鼠乳腺恶性肿瘤生长的影响
- 2015年
- 目的探讨苹果皮提取物及其有效成分矢车菊-3-葡萄糖苷(C3G)对乳腺恶性肿瘤生长的影响。方法建立E0771小鼠乳腺癌移植瘤模型,观察饮用苹果皮汁对小鼠乳腺恶性肿瘤生长的影响。免疫组化法分析饮用苹果皮汁与饮用普通无菌水组小鼠恶性肿瘤组织中CD31表达差异。HPLC法分析苹果皮提取物中的化学成分。3D Matrigel胶血管形成实验探讨苹果皮成分C3G对小鼠乳腺恶性肿瘤血管形成的影响。MTT法和Transwell实验观察C3G对血管内皮细胞SVEC增殖和迁移能力的影响。结果饮用含有1%和2%浓度的苹果皮汁无菌水对乳腺恶性肿瘤生长起到抑制作用。免疫组化法染色显示饮用苹果皮汁肿瘤中CD31表达低于未饮用苹果皮汁组。HPLC法分析显示C3G是苹果皮提取物的有效成分之一。3D Matrige胶实验显示C3G抑制小鼠乳腺癌细胞E0771血管生成。C3G血管形成抑制小鼠内皮细胞SVEC的迁移能力。结论苹果皮提取物及其有效成分C3G抑制小鼠乳腺癌生长,该作用可能通过抑制血管生成而实现。
- 郭强汪心怡朱其苹范楚苓朱佩任海风李菲菲汪思应
- 关键词：乳腺癌苹果皮
- 人miR-100-3p抑制序列慢病毒载体及其稳定表达的小鼠胚胎成纤维细胞的建立被引量：1
- 2017年
- 目的构建携带针对人miR-100-3p抑制序列的慢病毒载体,建立稳定表达的该载体的小鼠胚胎成纤维(MEF)细胞。方法设计并合成特定的miR-100-3p抑制序列克隆入载体h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin构建重组载体,将该载体与p Helper1.0载体和p Helper2.0载体三质粒共感染293T细胞得到所需的病毒液,最后感染MEF细胞,并通过嘌呤霉素筛选出稳定感染的细胞株。检测MEF细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达和hsa-miR-100-3p在MEF细胞中的表达水平,验证慢病毒在MEF细胞中的抑制表达效果。结果测序结果证明成功构建了重组质粒,并成功的包装成慢病毒,所得病毒液感染MEF细胞并筛选出稳定细胞株。流式分析提示,带有绿色荧光蛋白的目的重组质粒在小鼠胚胎成纤维细胞细胞中的表达(显著抑制miR-100表达)达到了97.4%和95.1%,PCR进一步验证这一结果。结论 hsa-MiR-100-3p抑制序列慢病毒沉默载体及抑制miR-100-3p表达的MEF细胞可被成功构建,为后续miR-100的功能研究奠定基础。
- 朱其苹郭强邓瑞晴董伟任海风倪芳汪思应
- 关键词：慢病毒
