王亚月
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院大连化学物理研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院“百人计划”国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 繁茂膜海绵共附生假单胞菌属菌株DEH138A中脱卤酶的分离纯化及性质表征被引量：2
- 2013年
- 用硫酸铵沉淀,Q-Sepharose HP离子交换层析,Superdex 200凝胶过滤层析和Mono-Q离子交换层析方法,对从大连潮间带繁茂膜海绵中分离得到的1株假单胞菌DEH138A(Pseudomonas sp.DEH138A)中的脱卤酶进行分离纯化和酶学性质表征。结果显示,假单胞菌菌株DEH138A中含有一种能降解L-2-氯丙酸的L-2-卤代酸脱卤酶(L-DEX)。经纯化后,L-DEX亚基分子量为27.8kDa,全酶分子量为42.5kDa,推测其为一个二聚体蛋白。L-DEX最适pH值及最适反应温度分别为10.0和30℃,Km值为0.63mmol/L。L-DEX能够作用于多种2-卤代酸,而且对单溴乙酸的脱卤效果最好。DTT和EDTA对L-DEX无抑制作用,Cu2+和Co2+对L-DEX有明显的抑制作用。L-DEX具有立体选择性等独特的酶学特性,在环境修复、精细化工等领域具有潜在的应用价值。
- 张锦友王亚月曹旭鹏薛松张卫杨艳坤
- 关键词：脱卤酶假单胞菌分离纯化
- 一种选择性地提高生产卤代酸脱卤酶的方法
- 本发明公开一种选择性地提高生产卤代酸脱卤酶的方法。本发明涉及利用假单胞菌DEH138菌株根据诱导物诱导微生物产生诱导酶的机理，选择适当的碳源并进行优化，特异性提高L-2-卤代酸脱卤酶的产量，即在分别含有辅助碳源(羟基乙酸...
- 薛松王亚月曹旭鹏
- 文献传递
- 底物诱导海洋假单胞菌DEH138A产生脱卤酶的研究
- 2014年
- 海洋假单胞菌Pseudomonas stutzeri DEH138A可以产生两种诱导型脱卤酶,即L-卤代酸脱卤酶(LDEX)和D-卤代酸脱卤酶(D-DEX)。用DL-2-氯丙酸(DL-2-CPA)、D-2-氯丙酸(D-2-CPA)和L-2-氯丙酸(L-2-CPA)3种诱导物分别作为种子培养与发酵培养碳源,诱导菌株DEH138A,通过HPLC检测反应体系中氯丙酸的剩余量来评估酶活性,研究底物对其酶活性的影响,并优化培养方式,实现单一构型卤代酸脱卤酶的定向诱导。结果表明:L-2-CPA可定向诱导L-DEX的产生,L-2-CPA作为唯一碳源诱导时得到的L-DEX酶活性是D-DEX酶活性的85倍,优化培养获得的LDEX和D-DEX最高酶活性分别为6.11×10-2、3.23×10-3U/mL(培养基),与DL-2-CPA作为诱导底物时相比较,分别提高了5.1倍和2.3倍。研究表明,L-2-CPA具有诱导专一性,实现了L-DEX的定向诱导,但对于D-DEX,则不能用L-DEX被相应构型底物诱导产生的机理解释,有待进一步研究。
- 王亚月信艳娟张锦友薛松
- 关键词：假单胞菌脱卤酶
