高慧萍
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市科委重大科技攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗EGFRvⅢ/EGFR单抗9B9的制备和鉴定
- 2009年
- 目的:制备抗EGFRvⅢ/EGFR单克隆抗体,并探讨其对人肝癌细胞株Huh7-EGFRvⅢ和表皮癌细胞系A431裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:将稳转细胞株3T3-EGFRvⅢ免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,ELISA法筛选出EGFRvⅢ阳性的克隆株并命名为9B9。Western blotting和免疫荧光鉴定9B9抗体与EGFRvⅢ/EGFR抗原结合的特性。建立裸鼠人肝细胞癌和表皮细胞癌移植瘤模型,分别腹腔注射PBS、西妥昔单抗和9B9抗体,比较它们对各移植瘤模型的抑瘤效果。结果:通过杂交瘤制备单克隆抗体技术筛选获得一株单抗9B9,Western blotting和免疫荧光结果显示其既能识别EGFRvⅢ又能识别EGFR。9B9抗体和西妥昔单抗对人肝癌细胞Huh7-EGFRvⅢ移植瘤的抑瘤率分别46%和42%,对人表皮细胞癌移植瘤的抑瘤率分别为86%和85%。结论:制备获得的单克隆抗体9B9可显著抑制裸鼠人肝细胞癌以及表皮细胞癌移植瘤的生长,具有与西妥昔单抗相似的抑瘤效果。
- 高慧萍蒋华王华茂李宗海
- 关键词：表皮生长因子受体单克隆抗体肝肿瘤表皮肿瘤
- 抗上皮细胞粘附分子和T细胞抗原的双特异性抗体
- 一种双特异性抗体，其包含(1)结合EpCAM的第一功能域，(2)结合CD3的第二功能域，以及(3)连接所述第一和第二功能域的接头，所述第一功能域包含至少一个轻链可变区和至少一个重链可变区，所述轻链可变区包含如下三个互补决...
- 李宗海张鹏飞石必枝王华茂高慧萍
- 文献传递
- 抗上皮细胞粘附分子和T细胞抗原的双特异性抗体
- 一种双特异性抗体，其包含(1)结合EpCAM的第一功能域，(2)结合CD3的第二功能域，以及(3)连接所述第一和第二功能域的接头，所述第一功能域包含至少一个轻链可变区和至少一个重链可变区，所述轻链可变区包含如下三个互补决...
- 李宗海张鹏飞石必枝王华茂高慧萍
- 文献传递
- IGF-1R的真核表达和单克隆抗体的制备被引量：2
- 2008年
- 目的:IGF-1R稳定表达株的建立和抗IGF-1R单克隆抗体(mAb)的制备。方法:从cDNA扩增得到人全长IGF-1R基因,构建成含有E-Tag的质粒。用此质粒建立稳定表达IGF-1R的细胞株,并免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功构建IGF-1R病毒质粒,并筛选得到稳定表达IGF-1R的3T3细胞,该细胞免疫BALB/c小鼠后筛选得到6株稳定分泌抗IGF-1R抗体的杂交瘤细胞株,Western blot结果显示抗体8G3能特异性识别抗原。结论:成功制备了IGF-1R的mAb,为进一步研究IGF-1R在肿瘤治疗中的作用提供了有力的工具。
- 张翠珍余君铭周敏刘世国高慧萍田淑君李宗海
- 关键词：真核表达杂交瘤单克隆抗体
- 抗GRP78单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的:原核表达GRP78并制备抗GRP78的特异性单克隆抗体(mAb),并初步鉴定相应mAb的特性。方法:从肺癌患者组织中抽提总RNA,RT-PCR获得grp78全长基因,并通过原核重组表达GRP78蛋白;以纯化的GRP78蛋白免疫BALB/c小鼠,成功免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,筛选得到分泌特异性抗GRP78的mAb的杂交瘤细胞株;并通过Western blot及免疫组化初步鉴定其特异性。结果:成功构建重组表达质粒PET-28a-grp78并由大肠杆菌表达获得GRP78蛋白,被该蛋白免疫的BALB/c小鼠与Sp2/0细胞融合、筛选,获得3株稳定分泌抗GRP78抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A1、4B8和4A12。采用其中1株4A12 mAb对3个肺癌患者组织样本进行Western blot检测以及免疫组化分析,结果均显示4A12 mAb能够特异识别肺癌组织表达的GRP78。结论:成功制备了抗GRP78的mAb,并能够特异识别肺癌组织表达的GRP78,为进一步研究GRP78在肿瘤治疗中的作用提供基础。
- 高慧萍俞菁余君铭孔洁张翠珍王华茂龚波
- 关键词：GRP78杂交瘤单克隆抗体
- ERCC1的表达纯化及其单克隆抗体的制备被引量：2
- 2008年
- 目的:表达纯化ERCC1蛋白并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并原核表达ERCC1蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了ERCC1蛋白。SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为37000。获得了1株稳定分泌抗ERCC1抗体的杂交瘤细胞株(6F8),其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价为1∶1.5×106。Western blot结果显示抗ERCC1 mAb具有良好的特异性。结论:成功地表达纯化ERCC1蛋白并制备了1株抗ERCC1 mAb。
- 李晓杰蒋华高慧萍姚晓石必枝李宗海
- 关键词：ERCC1原核表达纯化单克隆抗体
- 抗CD19的人源化抗体以及靶向CD19的免疫效应细胞
- 本发明涉及从鼠源单克隆抗体制备得到的抗CD19的人源化抗体、包含该人源化抗体的嵌合抗原受体以及表达该人源化抗体的免疫细胞。本发明的人源化抗体不仅不会产生抗抗体反应(AAR)和人抗鼠抗体反应(HAMA)，其亲和力还优于鼠源...
- 王鹏高慧萍石志敏李宗海
- 文献传递
