李金斗
- 作品数：11 被引量：13H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽腺病毒病四价嵌合病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 禽腺病毒病四价嵌合病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于病毒多价新型疫苗研发领域，该嵌合病毒样颗粒以新城疫病毒NA‑1株基质蛋白M为骨架，将Ⅰ群血清4型禽腺病毒的Fiber‑2蛋白及Ⅰ群血清8a型、8b型、11型禽腺病毒的F...
- 丁壮郭春红李金斗丁佳欣陈铭桦邹映雪陈凯楠付永恒
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒，属于病毒检测领域。本发明以NP蛋白为免疫抗原，以单克隆抗体为抗体诊断试剂，利用棋盘法对包被抗原及单抗浓度进行优化，对包被时间、一抗浓度及孵育...
- 丁壮林洪哲李金斗丁佳欣徐小洪钱晶尹仁福丁伟
- 文献传递
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒，属于病毒检测领域。本发明以NP蛋白为免疫抗原，以单克隆抗体为抗体诊断试剂，利用棋盘法对包被抗原及单抗浓度进行优化，对包被时间、一抗浓度及孵育...
- 丁壮林洪哲李金斗丁佳欣徐小洪钱晶尹仁福丁伟
- 文献传递
- 一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法
- 本发明属于禽病预防疫苗制备技术领域，具体涉及一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法的专利申请。该方法包括制备新城疫病毒样颗粒、制备GM‑CSF‑GPI锚定蛋白、嵌合型新城疫病毒样颗粒组装等步骤。利用本发明所制备的嵌合型新城...
- 丁壮徐小洪钱晶丁佳欣李金斗黄蕾尹仁福
- 文献传递
- 新流法腺四联病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 新流法腺四联病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于四联疫苗研发领域，制备方法包括：目的基因的优化及合成、重组穿梭质粒的构建、重组杆粒的构建、重组杆状病毒的拯救、嵌合病毒样颗粒的制备及纯化，最终获得嵌合病毒样颗粒NDV‑AIV...
- 丁壮李金斗丁佳欣邵亚男郭春红冯嘉轩辛梅
- 嵌合NDV-HA病毒样颗粒的制备与鉴定被引量：3
- 2017年
- 新城疫和禽流感是严重危害养禽业的两大动物疫病,其中基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)仍是当前的主要优势流行株。病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白装配而成的空心颗粒,不携带核酸,具有良好的安全性和免疫原性。本试验将AIV HA胞外域与NDV F基因胞内、跨膜域融合构建FcH9融合序列;进一步通过利用昆虫杆状病毒表达系统构建含有FcH9序列的重组杆状病毒rBV-FcH9,与实验室已构建rBV-M和rBV-HN共感染Sf9细胞,收集感染细胞上清,经蔗糖密度梯度离心法纯化嵌合VLPs。血凝血抑试验结果显示嵌合VLPs中HN和HA效价均为28;Western blot分析表明该VLPs可以与特异性阳性血清发生反应;透射电镜观察该VLPs具有典型的病毒粒子结构正,形态大小与野生型NDV相似。结果表明:本试验成功制备了包含有HN和HA蛋白的嵌合VLPs,为研制新型NDV-AIV二联疫苗候选株奠定基础,并为当前新城疫与H9N2亚型禽流感的防控提供策略。
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- 关键词：新城疫禽流感
- GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装被引量：5
- 2017年
- 当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。
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- 关键词：嵌合
- 一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法
- 本发明属于禽病预防疫苗制备技术领域，具体涉及一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法的专利申请。该方法包括制备新城疫病毒样颗粒、制备GM‑CSF‑GPI锚定蛋白、嵌合型新城疫病毒样颗粒组装等步骤。利用本发明所制备的嵌合型新城...
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- 新城疫病毒样颗粒对树突状细胞成熟的影响被引量：7
- 2017年
- 新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)是由基质蛋白(M)为病毒骨架,装配血凝素-神经氨酸酶和/或融合蛋白等。已有研究表明,NDV VLPs能诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答。然而,关于NDV VLPs如何激活天然免疫应答的研究尚无报道。树突状细胞(DCs)作为专职抗原递呈细胞,在连接天然免疫与适应性免疫之间具有独特功能。本试验以NDV VLPs与小鼠DCs为研究靶点,将NDV VLPs(M+HN)刺激DC以评价DC成熟表征。结果显示该颗粒可被DC有效吞噬并递呈给初始型T细胞,诱导DC表面MHCⅡ和共刺激分子显著上调以及促进DC分泌促炎性细胞因子。另外,还发现不同组装类型的NDV VLPs对诱导DC分泌炎性细胞因子水平不一。结果表明,NDV VLPs可诱导DC成熟,这对更好地理解VLPs激活的天然免疫应答奠定基础,并且为优选NDV VLPs候选株提供参考依据。
- 丁佳欣钱晶徐小洪李金斗秦岭松黄蕾武淑婷丁伟尹仁福丁壮
- 关键词：新城疫病毒病毒样颗粒天然免疫
- 新流法腺四联病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 新流法腺四联病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于四联疫苗研发领域，制备方法包括：目的基因的优化及合成、重组穿梭质粒的构建、重组杆粒的构建、重组杆状病毒的拯救、嵌合病毒样颗粒的制备及纯化，最终获得嵌合病毒样颗粒NDV‑AIV...
- 丁壮李金斗丁佳欣邵亚男郭春红冯嘉轩辛梅
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