徐小洪
- 作品数：11 被引量：10H指数：3
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法
- 本发明属于禽病预防疫苗制备技术领域，具体涉及一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法的专利申请。该方法包括制备新城疫病毒样颗粒、制备GM‑CSF‑GPI锚定蛋白、嵌合型新城疫病毒样颗粒组装等步骤。利用本发明所制备的嵌合型新城...
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- 文献传递
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒
- 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒，属于病毒检测领域。本发明以NP蛋白为免疫抗原，以单克隆抗体为抗体诊断试剂，利用棋盘法对包被抗原及单抗浓度进行优化，对包被时间、一抗浓度及孵育...
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- 文献传递
- 一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用
- 本发明属于新城疫疫苗技术领域，具体涉及一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用的专利申请。该病毒样颗粒由新城疫病毒M蛋白、F蛋白、NP蛋白和HN蛋白自行组装形成的空心化结构的蛋白颗粒；其中M蛋白对应的M1基因的碱基序列如S...
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- 嵌合NDV-HA病毒样颗粒的制备与鉴定被引量：3
- 2017年
- 新城疫和禽流感是严重危害养禽业的两大动物疫病,其中基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)仍是当前的主要优势流行株。病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)是由病毒结构蛋白装配而成的空心颗粒,不携带核酸,具有良好的安全性和免疫原性。本试验将AIV HA胞外域与NDV F基因胞内、跨膜域融合构建FcH9融合序列;进一步通过利用昆虫杆状病毒表达系统构建含有FcH9序列的重组杆状病毒rBV-FcH9,与实验室已构建rBV-M和rBV-HN共感染Sf9细胞,收集感染细胞上清,经蔗糖密度梯度离心法纯化嵌合VLPs。血凝血抑试验结果显示嵌合VLPs中HN和HA效价均为28;Western blot分析表明该VLPs可以与特异性阳性血清发生反应;透射电镜观察该VLPs具有典型的病毒粒子结构正,形态大小与野生型NDV相似。结果表明:本试验成功制备了包含有HN和HA蛋白的嵌合VLPs,为研制新型NDV-AIV二联疫苗候选株奠定基础,并为当前新城疫与H9N2亚型禽流感的防控提供策略。
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- 关键词：新城疫禽流感
- GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装被引量：5
- 2017年
- 当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。
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- 关键词：嵌合
- 一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用
- 本发明属于新城疫疫苗技术领域，具体涉及一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用的专利申请。该病毒样颗粒由新城疫病毒M蛋白、F蛋白、NP蛋白和HN蛋白自行组装形成的空心化结构的蛋白颗粒；其中M蛋白对应的M1基因的碱基序列如S...
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- 文献传递
- 一种禽源外泌体的ELISA检测方法
- 本发明属于禽类疾病检测技术领域，具体涉及一种禽源外泌体的ELISA检测方法专利申请。所述禽源外泌体的ELISA检测方法，包括样本制备、包被、封闭、加样、检测、结果判定等步骤。现有技术中，基于外泌体的ELISA检测方法均以...
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- 文献传递
- 一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法
- 本发明属于禽病预防疫苗制备技术领域，具体涉及一种嵌合型新城疫病毒样颗粒的制备方法的专利申请。该方法包括制备新城疫病毒样颗粒、制备GM‑CSF‑GPI锚定蛋白、嵌合型新城疫病毒样颗粒组装等步骤。利用本发明所制备的嵌合型新城...
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- 新城疫病毒样颗粒对树突状细胞成熟的影响被引量：7
- 2017年
- 新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)是由基质蛋白(M)为病毒骨架,装配血凝素-神经氨酸酶和/或融合蛋白等。已有研究表明,NDV VLPs能诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答。然而,关于NDV VLPs如何激活天然免疫应答的研究尚无报道。树突状细胞(DCs)作为专职抗原递呈细胞,在连接天然免疫与适应性免疫之间具有独特功能。本试验以NDV VLPs与小鼠DCs为研究靶点,将NDV VLPs(M+HN)刺激DC以评价DC成熟表征。结果显示该颗粒可被DC有效吞噬并递呈给初始型T细胞,诱导DC表面MHCⅡ和共刺激分子显著上调以及促进DC分泌促炎性细胞因子。另外,还发现不同组装类型的NDV VLPs对诱导DC分泌炎性细胞因子水平不一。结果表明,NDV VLPs可诱导DC成熟,这对更好地理解VLPs激活的天然免疫应答奠定基础,并且为优选NDV VLPs候选株提供参考依据。
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- 关键词：新城疫病毒病毒样颗粒天然免疫
- 外泌体与新城疫病毒感染的双向调控机制
- 新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株感染家禽引起的急性、高度接触性传染病,对养禽业造成巨大经济损失。寻求防控ND的新途径已成为亟待解决的重大科学与生产实际问题。NDV强毒株...
- 徐小洪
- 关键词：新城疫病毒外泌体MRNA
