孙勇刚
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组PinX1真核表达载体的构建及其对胃癌MKN28细胞增殖的抑制作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨PinX1基因对胃癌MKN28细胞生长及周期的作用,初步探讨该基因用于胃癌治疗方面的可能性。方法构建重组PinX1真核表达载体,酶切及测序鉴定无误后,应用脂质体转染法转染入胃癌MKN28细胞,建立稳定转染PinX1基因的MKN28细胞系;应用Western blot技术从蛋白水平检测转染前后目标蛋白PinX1的改变;MTT法检测转染前后细胞生长曲线的变化;流式细胞仪检测转染目的基因后细胞生长周期的改变。结果成功构建重组PinX1真核表达载体;建立了稳定转染入PinX1基因的胃癌MKN28细胞系;转染PinX1基因后,胃癌细胞细胞生长明显减缓(P<0.05),增殖变慢(P<0.05),细胞生长阻滞于G0/G1期。结论PinX1基因可抑制胃癌MKN28细胞的生长和增殖。
- 王洪斌王伟强汪兴伟孙勇刚周钢杨仕明房殿春
- 关键词：胃癌细胞增殖
- PinX1可通过Mad1/c-Myc途径抑制端粒酶活性
- 2009年
- 目的探讨PinX1基因抑制端粒酶活性可能的新机制。方法设计针对靶基因的干扰序列和阴性对照序列,应用脂质体法导入胃癌细胞中,G418筛选出抗性克隆;结合前期已建立稳定表达PinX1基因的细胞系,检测各细胞系中PinX1、Mad1及c-Myc的表达;应用流式细胞技术检测转染入PinX1基因后,胃癌细胞凋亡的改变。结果转染入PinX1基因后,Mad1的水平发生上调性改变;反之,抑制PinX1基因的表达后,Mad1的水平发生下调性改变;而c-Myc的变化与之相反。转染入PinX1基因后,胃癌细胞发生早期凋亡的改变。结论PinX1基因能通过Mad1/c-Myc抑制端粒酶活性。
- 王洪斌汪兴伟孙勇刚王伟强周纲杨仕明房殿春
- 关键词：胃癌细胞端粒酶活性
