许慧珍
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- miR172超表达载体的构建及其在micro-Tom番茄中的遗传转化
- 2014年
- 为了进一步阐明mi RNA在番茄不同生长发育阶段尤其是在果实成熟阶段的调控途径,利用聚合酶链式反应(PCR)从番茄(Solanum lycopersicum)的c DNA克隆出mi R172基因核心片段,将该基因片段,以及p CAMBIA1300-221载体通过特异性的限制性内切酶双酶切,然后将mi R172片段正向连接到载体上,转化大肠杆菌Trans5α,鉴定重组质粒正确后,利用冻融法将重组载体转入农杆菌EHA105中。再次回转大肠杆菌验证获得的重组载体,通过PCR以及双酶切鉴定是否符合预期结果,将测序结果与NCBI上的基因序列相比较,同源性高达100%。结果成功构建了适用于番茄农杆菌遗传转化的植物表达载体,继续进行转基因植株的培育和鉴定。为通过mi R172基因进一步研究果实成熟衰老机理奠定了物质基础。
- 许慧珍鞠正杨永芳田慧琴朱本忠
- 关键词：MI克隆转基因植株
