田斌
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：黑龙江农垦总局科技攻关项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪传染性胃肠炎病毒S截短蛋白在干酪乳杆菌表面展示表达的研究
- 2013年
- 为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA)和流式细胞术(FACS)检测外源蛋白在干酪乳杆菌的表面表达与定位。IFA和FACS结果显示重组菌株pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei表面均能够检测到截短的S和PgsA融合表达蛋白与TGEV阳性血清的特异性荧光信号,而对照菌没有检测到荧光信号。表明本研究构建的的TGEV重组L.casei具有胞外展示表达TGEV抗原蛋白的功能,可以作为TGEV候选疫苗应用于动物试验研究。
- 田斌余丽芸侯喜林王桂华刘振格郭东伟刘秋晨齐浩林红丽
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒
- 截短NDVF蛋白的原核表达被引量：1
- 2013年
- 根据NDV LaSota株F基因已知的抗原表位,对F蛋白进行分段表达。应用RT-PCR方法分段扩增F基因,并将其克隆到pET30a(+)原核表达载体上,得到重组质粒pET30-F780和pET30-F760,将质粒导入BL21(ED3)感受态中,经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白通过SDS-PAGE和Westem-blotting方法进行鉴定。表达的两段蛋白大小约为31.1 kDa和27.9 kDa,与预期的蛋白分子量大小相符。Western blot分析表明重组蛋白可以和NDV抗体发生特异性反应。成功构建了原核表达质粒pETF780和pET-F760,并获得了高效表达,通过Western blot分析表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。
- 王杰王宇鹏刘振格杨鸣发林红丽田斌侯喜林
- 关键词：新城疫病毒F蛋白
- 锚定NDV HN蛋白重组干酪乳杆菌诱导雏鸡黏膜免疫应答被引量：4
- 2012年
- 以干酪乳杆菌作为呈递抗原活载体,表达新城疫病毒保护性抗原HN蛋白。重组干酪乳杆菌表达外源蛋白后,经SDS-PAGE、Western blot及间接免疫荧光分析,表明目的蛋白表达并展示到乳酸菌表面。将重组菌及空质粒菌株分别滴鼻、点眼免疫雏鸡,于不同时间检测血清样品中特异性IgG;于三免后不同时间采集雏鸡的泪液、气管洗液、胆汁和肠洗液样品,采用间接ELISA方法检测样品的特异性sIgA;用MTT法检测免疫鸡脾淋巴细胞增殖情况,结果显示重组干酪乳杆菌表达系统能刺激动物黏膜免疫反应和系统免疫反应。
- 孙景秀王桂华侯喜林余丽芸田斌侯瑞峰朱娉慧周婷婷齐浩
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白干酪乳杆菌黏膜免疫
- 牛冠状病毒DQ株感染BALB/c小鼠的敏感性研究被引量：5
- 2014年
- 为研究牛冠状病毒DQ株（BCoV-DQ）对BALB／c小鼠的敏感性，本研究将该病毒以不同剂量、不同途径感染小鼠，观察比较临床表现、体重变化、剖检及组织病理学变化。分别以100TCID50-700TCID50感染小鼠，结果显示300TCID50病毒可使试验小鼠出现明显的临诊症状和可见的病理变化。采用滴鼻、灌胃、腹腔注射三种途径感染小鼠，结果显示灌胃组个体变化差异大，组织器官病变明显，为最佳感染途径。取主要病变部位组织进行病毒基因组的RT—PCR扩增，证实该病毒可以在小鼠肠道内成功增殖。本实验表明BALB／c小鼠可以作为BCoV．DQ研究的替代动物。
- 刘振格侯喜林余丽芸王宇鹏王杰田斌
- 关键词：牛冠状病毒BALBC小鼠敏感性
- ETEC K99、K88菌毛蛋白抗原表位多肽的设计合成及免疫反应被引量：1
- 2013年
- 目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位多肽;采用腹腔注射的方式将合成的抗原表位多肽免疫小鼠,用ELISA法检测血清中产生的抗体,并对免疫小鼠进行了攻毒试验。结果:多肽免疫小鼠后均能诱导抗体产生,攻毒试验表明合成肽对小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。
- 余丽芸田斌温丽娟王桂华曹宁魏小曼郭东伟齐浩刘秋晨
- 关键词：ETECETEC抗原表位合成肽
