汪镜
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
- 供职机构：红河学院生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 奶牛隐性乳房炎无乳链球菌16SrRNA的序列分析
- 2016年
- 为了从分子生物学水平鉴定引起奶牛隐性乳房炎的无乳链球菌,试验从新鲜奶样中分离病原菌,并对经生理生化初步鉴定的无乳链球菌提取DNA,PCR扩增无乳链球菌16S rRNA序列。结果表明:引起奶牛隐性乳房炎的无乳链球菌16S rRNA为1 541 bp,与Gen Bank登录的无乳链球菌16S rRNA同源性达99.25%,从而证实该目的菌为无乳链球菌。
- 谢昆蒋成砚刘杰周文树唐秀华汪镜
- 关键词：奶牛隐性乳房炎无乳链球菌RRNA同源性比较
- 奶牛隐性乳房炎大肠杆菌蜂胶灭活苗的制备及其免疫效果研究被引量：1
- 2017年
- 为了制备奶牛隐性乳房炎大肠杆菌蜂胶灭活疫苗,试验将菌液用甲醛灭活,以蜂胶为佐剂,灭活菌液与蜂胶佐剂按1∶1等体积混匀制成蜂胶佐剂灭活苗,并对灭活苗的物理性质、安全性及其免疫效果进行检测。结果表明:通过建立动物模型,小鼠接种0.25 mL灭活苗后没有出现不良反应,灭活苗具有较好的安全性且免疫效果好;通过攻毒试验,给小鼠注射奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的生理盐水重悬液0.25 mL,灭活苗的保护率达87.5%。说明制备的大肠杆菌蜂胶灭活疫苗免疫效果良好。
- 谢昆蒋成砚周文树王海荣唐秀华汪镜
- 关键词：大肠杆菌蜂胶灭活苗免疫效果隐性乳房炎奶牛
- 奶牛隐性乳房炎大肠杆菌16S rRNA序列分析
- 2018年
- 以笔者所在实验室提供,从新鲜奶样中初步分离并通过生理生化鉴定的大肠杆菌为研究对象,设计一对特异性引物,PCR技术检测分离的大肠杆菌。结果表明,扩增的16S rRNA序列大小为1 419 bp,与GenBank上发表的大肠杆菌16S rRNA序列核苷酸同源性为96%,从分子水平上确定分离的菌为大肠杆菌。这为奶牛隐性乳房炎的分子生物学鉴定奠定了基础。
- 谢昆蒋成砚蒋成砚李桥善周文树唐秀华汪镜
- 关键词：奶牛隐性乳房炎大肠杆菌PCR技术分子生物学鉴定
- 犬γ-干扰素基因的克隆、序列分析及蛋白质结构预测被引量：1
- 2016年
- 根据Gen Bank上犬γ-干扰素基因(IFN-γ)序列(序列号WO318193),利用Primer 5.0软件设计特异性引物,应用RT-PCR技术从100μg/ml Con A刺激24 h后的犬外周血淋巴细胞总RNA中扩增出γ-干扰素基因,测序后应用DNAStar软件对克隆的犬γ-干扰素基因进行序列分析,并与Gen Bank上发表的犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠等的IFN-γ基因序列进行同源性比较。结果显示,克隆的犬IFN-γ基因大小501 bp,编码166个氨基酸,与犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠IFN-γ基因的核苷酸序列同源性分别为98.4%、81.6%、26.1%、26.1%、22.7%、22.7%、80.8%、81.0%、28.5%和25.0%;氨基酸序列同源性分别为95.8%、72.5%、5.4%、5.4%、6.6%、6.6%、68.9%、69.5%、5.4%和5.4%。运用DNAstar软件对犬γ-干扰素进行蛋白结构预测的结果显示,犬γ-干扰素蛋白含有10个α-螺旋、9个β-折叠、11个β-转角和5个无规则卷曲。
- 谢昆蒋成砚唐秀华周文树王海荣汪镜
- 关键词：Γ-干扰素基因克隆蛋白质结构预测
- 奶牛隐性乳房炎乳房链球菌16S rRNA的序列分析被引量：2
- 2015年
- 为奶牛隐性乳房炎主要致病菌的检测提供参考,对采集于蒙自市奶牛养殖户的10头疑似乳房炎患病奶牛新鲜奶样20份,采用传统细菌分离鉴定方法和PCR技术鉴定奶牛隐性乳房炎的链球菌。结果表明:从传统方法分离菌中提取DNA,经PCR扩增测序为1 541bp,与GenBank数据库中收录的乳房链球菌(登录号:JF896457.1)的序列相似性达80.8%,且与Streptococcus uberis USC71-LHICA菌株的亲缘关系最近,相似性达100%,由此表明,分离菌为乳房链球菌。与传统的细菌培养方法确定细菌种类相比,PCR方法检测具有快速、准确、灵敏度高等特点。
- 谢昆蒋成砚王琴周文树唐秀华汪镜
- 关键词：乳房炎乳房链球菌RRNAPCR扩增
- 奶牛隐性乳房炎志贺氏菌16S rRNA的扩增及序列分析被引量：1
- 2018年
- 从牛奶中分离引起隐性乳房炎的病原菌,通过细菌培养、形态鉴定、生理生化试验等,对引起奶牛隐性乳房炎的病原菌进行分离及鉴定,并对分离病原菌16S rRNA序列进行PCR扩增及分析。结合传统生理生化试验和分子鉴定,并参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定为志贺氏菌。通过提取DNA及16S rRNA序列的分析,得到该分离菌与GenBank上发表的志贺氏菌同源性为99.9%。
- 谢昆蒋成砚蒋成砚李桥善周文树唐秀华汪镜
- 关键词：牛奶隐性乳房炎志贺氏菌RRNA
- 奶牛隐性乳房炎多价蜂胶灭活疫苗的制备及免疫效果研究被引量：1
- 2018年
- 为制备奶牛隐性乳房炎多价蜂胶灭活疫苗,研究多价蜂胶疫苗的免疫效果,试验将菌液用0.4%的甲醛灭活,以蜂胶作为佐剂,灭活菌液与蜂胶佐剂以1∶1的比例等体积混合制成多价蜂胶灭活疫苗,并对该疫苗的物理性质、安全性、免疫效果进行检测,通过构建小鼠模型设计浓度梯度,找出最佳免疫剂量。结果表明：通过攻毒试验,注射奶牛隐性乳房炎多价疫苗的混菌液,灭活疫苗的保护率达86.4%,免疫效果良好。说明制备的奶牛隐性乳房炎多价蜂胶灭活疫苗的混悬液具有良好的免疫保护效果。
- 李美荣蒋成砚刘杰李桥善周文树唐秀华汪镜谢昆
- 关键词：奶牛隐性乳房炎蜂胶灭活疫苗免疫效果
- 奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌分离鉴定及药敏试验被引量：3
- 2018年
- 从牛奶中分离引起隐性乳房炎的病原菌,通过细菌培养、形态鉴定、生理生化试验等,对引起奶牛隐性乳房炎的病原菌进行分离及鉴定,并对分离病原菌做药敏试验。采用传统的形态学和生理生化试验,并参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定得到金黄色葡萄球菌。通过药敏试验,得到该分离菌对头孢噻吩(抑菌圈15.6 mm)、万古霉素(抑菌圈16.0 mm)敏感性最强;其次是庆大霉素(菌圈12.0 mm)、红霉素(菌圈11.3 mm)、青霉素(抑菌圈10.5 mm);敏感低的是四环素(抑菌圈9.0 mm)和诺氟沙星(抑菌圈7.0 mm);最不敏感为环丙沙星(抑菌圈为3.0 mm)。
- 谢昆蒋成砚郑秋燕周文树唐秀华汪镜
- 关键词：奶牛葡萄球菌药敏试验
- 奶牛隐性乳房炎乳房链球菌巢式PCR检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 为研究巢式PCR检测奶牛隐性乳房炎链球菌的灵敏度,以本实验室从新鲜奶样中分离并经过生理生化鉴定的乳房链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为研究对象,提取细菌DNA,采用巢式PCR技术,根据细菌16S rRNA序列保守区设计通用引物进行第1次PCR扩增,再在乳房链球菌16S rRNA保守区内的可变区设计特异引物对4种病原菌进行第2次PCR检测。结果表明:巢式PCR技术能检测出乳房链球菌16S rRNA保守区的可变区序列,与生理生化鉴定结果一致。该方法能快速有效检测出奶牛隐性乳房炎乳房链球菌。
- 蒋成砚刘杰李桥善周文树唐秀华汪镜谢昆
- 关键词：奶牛隐性乳房炎乳房链球菌巢式PCR
- 奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：5
- 2016年
- 为了有效防治奶牛隐性乳房炎,从牛奶中分离得到4株病原菌,通过细菌培养、形态学鉴定、生理生化试验等,参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定为大肠埃希氏杆菌,并对分离的病原菌进行了药敏试验。结果表明:分离菌对庆大霉素、四环素和诺氟沙星高度敏感,对头孢噻吩和青霉素中度敏感,对万古霉素低度敏感,而对苯唑西林和红霉素不敏感。说明可以用庆大霉素、四环素和诺氟沙星进行奶牛隐性乳房炎的治疗。
- 谢昆蒋成砚刘杰李桥善周文树唐秀华汪镜
- 关键词：奶牛隐性乳房炎大肠杆菌药敏试验
