王岗
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MHP 36神经干细胞体外经Ⅳ型胶原诱导向平滑肌细胞分化的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究MHP 36神经干细胞在体外经Ⅳ型胶原诱导向平滑肌细胞的分化潜能。方法体外培养MHP 36神经干细胞,采用Ⅳ型胶原在37℃培养箱促分化,在分化第1、2、4天分别收获细胞并通过PCR和Western免疫印迹分别检测平滑肌细胞特异性标志物(SMαA,SMMHC,SM22,Myocardin)基因和蛋白表达。最后对分化第4天的细胞进行细胞免疫荧光染色来鉴定SMαA、SMMHC的表达。结果 MHP36神经干细胞在37℃培养条件下从第2天开始逐渐变长、呈梭形,并在培养基中形成螺旋状结构。PCR及免疫印迹证实SMαA,SMMHC,SM22,Myocardin的基因和蛋白表达从分化第1天到第4天显著增加(P<0.05)。此外,分化第4天的细胞表达成熟的SMαA,SMMHC胞浆蛋白。结论 MHP36神经干细胞在体外经Ⅳ型胶原诱导可向平滑肌细胞分化,并表达平滑肌细胞的特异性标志物。
- 王岗彭丽媛巩守平魏瑾吴海琴
- 关键词：分化平滑肌细胞血管再生
- 一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞的分化
- 2012年
- 目的建立一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。方法使用鸡胚在体电转染的方法导入绿色荧光蛋白示踪或核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特异性吗啉基反义寡聚核苷酸(morpholino)干扰其基因表达。通过分析鸡胚的成活率及转染率确定在体转染的设备参数,之后将胚胎固定、包埋、冰冻切片并进行免疫组织化学染色,在荧光显微镜下观察神经嵴细胞的标记、迁徙及向平滑肌细胞的分化。结果转染电压为7.5V时胚胎成活率和转染率均较高,因此在本实验中作为标准电压。电转后6小时,右侧神经嵴细胞成功表达绿色荧光蛋白。第2天,神经嵴细胞开始向腮弓迁徙并达到第2、3鳃弓。hnRNPA2/B1特异性morpholino可以抑制hnRNPA2/B1的表达从而影响神经嵴细胞的迁徙和分化,导致鳃弓动脉平滑肌层形成障碍,最终破裂。结论鸡胚在体基因干扰技术被成功建立并可用来研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。
- 王岗闫斌巩守平高亚董新
- 关键词：神经嵴细胞HNRNPA2/B1
- 小鼠肠神经嵴干细胞体外神经元亚型分化的研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究胚鼠（E14-17）、新生鼠（P1、P5）肠神经嵴干细胞（GNCSCs）在体外培养中经诱导向一氧化氮合酶（NOS）和血管活性肠肽（VIP）神经元分化的特点；研究标本取材和细胞消化分离间隔时间对P5鼠收获GNCSCs克隆球数量和诱导分化能力的影响。方法分离并培养胚鼠、新生鼠GNCSCs，采用血清联合多聚赖氨酸或单纯多聚赖氨酸促分化，SABC法进行nNOS和VIP免疫细胞化学染色；将P5鼠按标本取材和细胞分离的间隔时间分为0、15、30、45、60min组，对培养72hGNCSCs克隆球进行计数，再采用血清联合多聚赖氨酸促分化，SABC法进行nNOS和VIP免疫细胞化学染色。结果血清联合多聚赖氨酸对胚鼠、新生鼠GNCSCs克隆球诱导分化作用明显强于单纯使用多聚赖氨酸（P〈0．05）；胚鼠、新生鼠GNCSCs经体外培养、血清联合多聚赖氨酸诱导，均可分化出nNOS和VIP阳性细胞；P5鼠0min组获得的GNCSCs克隆球数和经联合诱导分化出的阳性细胞数明显高于其他各组（P〈0．05），15、30min均明显高于45、60min组（P〈0．05）。结论血清联合多聚赖氨酸对GNCSCs向NOS和VIP神经元分化的诱导作用明显优于单纯使用多聚赖氨酸；胚鼠和新生鼠GNCSCs经体外培养、血清联合多聚赖氨酸的诱导，可分化出NOS和VIP神经元；P5鼠肠管获得GNCSCs数和NOS、VIP神经元分化能力随标本取材、细胞分离间隔时间延长而降低。
- 王岗肖莉高亚
- 关键词：巨结肠先天性神经嵴神经元肠神经系统
- 肠神经嵴干细胞发育与小生境被引量：5
- 2008年
- 随着先天性巨结肠（Hirschsprung disease，HD）病因学研究的不断深入，早期胚胎发育阶段肠神经嵴干细胞（gutneural crest stem cells，GNCSCs）和小生境（干细胞微环境，niche）相互作用的异常变化，导致肠神经系统（enteric nervous system，ENS）发育异常并引起HD的观点越来越受到人们的重视。很多学者认为GNCSCs与肠道小生境中各种因素的相互作用在决定其迁徙途径、分布以及最终分化上起主导作用。
- 王岗高亚
- 关键词：先天性巨结肠小生境神经嵴细胞发育细胞微环境肠神经系统
- 神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2和Bax的影响,探讨其神经保护作用的分子生物学机制.方法:72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组.应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型,TUNEL法检测各组动物海马区细胞凋亡数,免疫组化染色观察Bcl-2,Bax蛋白的表达.结果:与假手术组相比,新生大鼠HIBD后海马区存在不同程度的细胞凋亡,Bcl-2表达轻度升高,Bax表达明显升高.与HIBD组比较,NGF治疗后,凋亡细胞减少(P<0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),Bax表达下降(P<0.01).结论:HIBD后,新生大鼠海马区细胞存在细胞凋亡,NGF治疗增强Bcl-2表达,减少损伤基因Bax表达,抑制细胞凋亡,具有脑保护作用.
- 胡伟巩守平李文妍王岗黄绍平
- 关键词：神经生长因子凋亡相关蛋白
