蔡敬敬
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：扬州大学旅游烹饪学院乳品研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 不同来源鼠李糖乳杆菌的随机扩增多态DNA分析被引量：1
- 2008年
- 【目的】建立鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus，Lr）菌株之间的分子鉴别方法并分析不同分离株之间的遗传多样性。【方法】从56份采集自中国新疆和田和广西巴马瑶族自治县的长寿老人粪便样本中分离得到的乳酸菌中，经生理生化分析和API 50CHL试验条鉴定，获得10株Lr。对10株Lr分离株和1株Lr标准株ATCC7469进行了随机扩增多态DNA分析，从50条随机引物中筛选到5条在菌株水平上具有鉴别力的引物P14、OPG28、OPG25、P7和P4并建立和优化了Lr菌株RAPD指纹图谱扩增方法。根据RAPD结果计算菌株间的遗传相似系数并进行聚类分析。【结果】获得了清晰稳定的DNA指纹图谱，扩增产物大小在100～2000bp之间，菌株间呈现显著的DNA多态性，不同来源的Lr分离株的遗传相似系数在0．581-0．935之间，在相似系数0．80水平上可以将11株Lr菌株分为5个类群，其中分离自新疆和田的Lr菌株归在类群B和类群C，而分离自广西巴马瑶族自治县的Lr菌株归在类群D和类群E。【结论】应用RAPD方法对Lr菌株进行分子鉴别是可行的，不同来源的Lr之间存在着较大的种内遗传多态性和不同的亲缘关系。
- 顾瑞霞杨振泉蔡敬敬李正华陈顺利罗珍兰
- 关键词：鼠李糖乳杆菌指纹图谱多态性聚类分析
- 长寿老人体内分离的鼠李糖乳杆菌RAPD体系优化研究被引量：2
- 2008年
- 采用CTAB改良法提取11株鼠李糖乳杆菌的基因组DNA,对其完整性进行了测定,并以此为模板进行RAPD反应。优化的RAPD反应体系为:模板50ng,Taq酶2U,dNTPs 3.25mmol/L,随机引物5mmol/L,10×PCR缓冲液2.5μl,Mg2+7.5mmol/L,反应总体积为25μl;PCR扩增参数:93℃2min,36℃1min,72℃2min1次循环;93℃1min,36℃1min,72℃2min,40次循环;93℃1min,36℃1min,72℃10min1次循环。
- 顾瑞霞蔡敬敬王琴杨振泉任远庆
- 关键词：鼠李糖乳杆菌RAPD
