杨丹
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省农垦总局科技攻关项目黑龙江省杰出青年科学基金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猫传染性腹膜炎病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备
- 2023年
- 为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度为1 mmol·L^(-1)的IPTG在16℃诱导16 h后,SDS-PAGE检测表达产物,结果显示,在约69 kda处出现目的条带,且该蛋白主要以可溶形式表达。将重组N蛋白经Ni柱纯化后,按每只BALB/c小鼠免疫50μg,三免后7 d采血分离血清,经间接ELSA检测结果显示,获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到1∶12800。研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础。
- 赵飞宇杨丹赵鹏宇李梓健李璐孙东波
- 关键词：衣壳蛋白原核表达多克隆抗体
- 2015—2017年东北地区猪星状病毒ORF1b基因分子流行病学调查被引量：3
- 2019年
- 为了解2015—2017年东北地区猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)流行情况,试验采用半巢式RT-PCR方法对2015—2017年东北地区的122份仔猪小肠及粪便样品(107份来自腹泻仔猪,15份来自健康仔猪)进行PAstV检测,对阳性产物进行测序,并对测序结果进行同源性分析及构建系统进化树。结果表明:半巢式RT-PCR扩增得到大小约为422 bp的片段,样品总阳性率为9.02%(11/122),其中腹泻仔猪样品的阳性率为10.28%(11/107),健康仔猪样品的阳性率为0(0/15);有4株PAstV ORF1b基因测序成功;毒株间核苷酸同源性为99.1%~100%,氨基酸同源性为97.4%~100%;与PAstV 2型参考毒株核苷酸的同源性最高,为75.9%~92.3%;获得的4株PAstV均属于PAstV 2型。说明东北地区有PAstV的流行,且以PAstV 2型为主。
- 杨丹张备朱金海翟军军孔凡志孙东波
- 关键词：腹泻系统进化分析
- FASN基因的多态性及其与中国荷斯坦奶牛产奶性状的相关性分析被引量：3
- 2017年
- 为了分析脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)基因的多态性及其与中国荷斯坦奶牛产奶性状的相关性,试验选取230头荷斯坦奶牛,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(Restriction fragment length polymorphism-polymerase chain reaction,RFLP-PCR),对FASN基因3'-UTR区和外显子部分片段的多态性进行检测,并对突变位点与奶牛产奶性状的相关性进行分析。结果表明:在所分析的片段中,检测到3'-UTR区存在一个C→T碱基的置换突变(g.51403203C>T);该突变位点为Bam HⅠ酶的自然酶切位点,酶切后存在CC、TC、TT三种基因型,TT基因型的乳脂率和脂蛋白比显著高于TC基因型、CC基因型(P<0.05),而三种基因型间乳蛋白率和305 d产奶量差异不显著(P>0.05)。
- 贺一博潘琪琪姜宁杨丹刘雪婷刘晓军吴建民任娟李妍沈冰蕾
- 关键词：荷斯坦奶牛产奶性状多态性
