曲政
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院口腔医学研究所更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子Dlx1和Dlx2在成釉细胞中调控MMP20启动子转录活性的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系统分析不同剂量的Dlx1和Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;确定Dlx1和Dlx2有明显作用的启动子区段,用基因定点突变和双荧光素酶报告基因检测系统分析Dlx1、Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响,以及Dlx1、Dlx2在调控MMP20基因时的相互作用;最后观察Dlx1与Dlx2共转染时MMP20基因活性表达的变化。结果:Dlx1转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达上调,Dlx2转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达抑制;突变MMP20启动子的Dlx结合位点后,MMP20启动子的转录活性下降,而且Dlx1失去上调MMP20启动子转录活性的作用;当Dlx1与Dlx2共转染后,在Dlx1转染剂量不变的前提下,随着Dlx2转染量的增加,小鼠成釉细胞MMP20启动子转录活性显著增加。结论:Dlx1和Dlx2在釉质发育过程中有重要的生物学意义,对MMP20基因表达具有重要的调节作用。
- 袁杰刘晓影曲政孙岩张娟娟高玉光
- 关键词：DLX基因定点突变
- EGF/EGFR/ErbB2调控成釉细胞MMP-20基因表达的研究被引量：3
- 2013年
- 目的:研究EGF/EGFR/ErbB2信号通路对小鼠成釉细胞中基质金属蛋白酶-20(matrixmetalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用。方法:用定时定量RT-PCR、双荧光素酶报告基因检测系统分析EGF/EGFR/ErbB2调控MMP-20基因的表达、EGF调控MMP-20启动子的主要区域、MAPK信号通路阻断剂对EGF调控MMP-20转录活性的影响、转录因子Jun家族介导EGF/ErbB2对MMP-20转录活性的调控;用基因定点突变和双荧光素酶基因检测报告系统分析EGF/ErbB2、C-Jun对MMP-20基因启动子转录活性的影响。结果:成釉细胞经20 ng/mL EGF刺激后,MMP-20的基因表达上调(P<0.05),MMP-20启动子在(-157～+23)之前的区域转录活性增强(P<0.05);EGFR、ErbB2、ERK阻断剂均能抑制EGF对MMP-20基因表达的调控(P<0.05);转录因子C-Jun介导EGFR/ErbB2上调MMP-20基因的表达(P<0.05);突变MMP-20启动子的AP1结合位点后,MMP-20基因表达的水平下降(P<0.05),同时EGF/ErbB2也失去上调MMP-20基因表达水平的作用。结论:在成釉细胞中EGF通过EGFR/ErbB2～ERK～C-Jun信号通路对MMP-20基因的表达起到调控作用。
- 曲政王玉敏李博涵许针针袁杰高玉光
- 关键词：EGFEGFRERBB2
- MEF2C调控成釉细胞MMP-20基因启动子转录活性的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:通过研究MEF2C转录因子对小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,明确MEF2C的功能,为研究MEF2C在釉质形成中的作用奠定基础。方法:用RT-PCR的方法扩增小鼠MEF2C基因,并构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-MEF2C;对MMP-20基因启动子区域(-1197～+23)中MEF2C潜在的结合位点进行定点突变,并构建至荧光报告载体pGL3-Basic中;利用双荧光素酶基因报告系统分析MEF2C对MMP-20基因启动子转录活性的影响。结果:在成釉细胞中过量表达MEF2C能够明显提高MMP-20基因启动子的转录活性,而对定点突变后的MMP-20基因启动子转录调控作用减弱。结论:小鼠成釉细胞核中MEF2C可通过MMP-20启动子上MEF2C潜在的结合位点,上调MMP-20基因表达水平。
- 刘珩李伯翰韩婷婷李东亮王玉敏孙岩曲政高玉光
- 关键词：成釉细胞定点突变
- 甲状旁腺素1受体(PTH1R)调控成釉细胞MMP-20基因表达的分子机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的通过进行甲状旁腺素l受体(PTH1R)基因克隆以及真核表达载体的构建,分析PTH1R对成釉细胞MMP-20基因表达的影响.为进一步探讨PTH1R在牙釉质形成以及发育过程中的分子调控方面奠定基础。方法根据引物设计原则设计PTH1R基因的RT-PCR引物,用PCR法扩增得出含有EcoRⅠ和XhoL的PTH1R目的基因片段。通过T4连接酶连接到pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体上。并用双荧光素酶报告基因系统检测MMP-20启动子区域的转录活性。结果①经过PCR引物扩增得到1794BP的基因片段,将获得的重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-PTH1R双酶切分析鉴定,测序结果与GenBank登录基因完全一致。②经双荧光素酶报告基因系统检测得出PTH1R能够上调MMP-20基因的表达水平。结论成功实现了PTH1R基因克隆及真核表达载体的构建,初步证明了PTH1R可能调控MMP-20基因的表达。
- 曲政张世龙袁杰高玉光
- 关键词：RT-PCR
