崔然
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：山东农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白分段表达及其生物学功能的鉴定被引量：4
- 2011年
- 为进一步研究PRRSV GP5蛋白的生物学功能,本研究将已分离的PRRSV北美洲型野毒株TA-12的GP5基因分为4段(79bp～207bp、133bp～330bp、229bp～492bp和382bp～603bp)分别克隆于pGEX-6p-1中,并转化E.coli BL21(Rosetta)细胞进行诱导表达。表达蛋白经纯化后,以间接荧光方法(IFA)检测它们与Marc-145细胞的相互作用。IFA检测结果表明GST-GP5-1和GST-GP5-2融合蛋白均能够与Marc-145细胞结合,而且其结合位点在27aa～110aa区域。本实验为进一步研究GP5蛋白生物学功能提供试验依据。
- 刘岳肖一红崔然刘宁宁邱洪凯周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白
- 猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2012年
- 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET-28a(+),转化入大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系。SDS-PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达;筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型;且均具有较高的特异性和敏感性;叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位。本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台。
- 姚永红崔然赵钦王刚肖一红周恩民
- 关键词：猪圆环病毒2型单克隆抗体
