付晓燕
- 作品数：7 被引量：10H指数：1
- 供职机构：潍坊医学院基础医学院山东省高校免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 补体C9缺陷对LPS诱导的小鼠早期肝脏炎症和损伤的保护作用及机制被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨补体C9基因缺陷对LPS诱导的小鼠早期肝脏炎症反应和损伤的作用及机制。方法:8~10周龄B6.WT和B6.C9^(-/-)小鼠均随机分为LPS组(n=5)和对照组(n=3),实验重复3次。LPS组腹腔注射LPS(0111:B4)5 mg/kg,对照组注射等体积生理盐水,处理12 h。酶法检测血清ALT、AST水平,HE染色观察肝脏病理学和炎症细胞浸润情况。ELISA检测血清和肝脏组织抽提物中IL-1β、IL-8、TNF-α水平以及血清中可溶型MAC(sMAC)水平。IF观察肝脏组织中巨噬细胞、中性粒细胞浸润及MAC沉积。qRT-PCR检测肝脏组织IL-1β、IL-8、TNF-αmRNA水平。FACS检测肝脏单个核细胞中巨噬细胞及中性粒细胞比例。结果:LPS刺激后,B6.C9^(-/-)小鼠血清中ALT、AST水平显著低于B6.WT小鼠(P<0.001),HE染色显示其肝脏组织中的病理损伤和炎症反应也明显轻于B6.WT小鼠。B6.C9^(-/-)小鼠血清中IL-1β(P<0.01)、IL-8(P<0.0001)、TNF-α(P<0.0001)水平均显著低于B6.WT小鼠。B6.C9^(-/-)小鼠肝脏中MAC沉积(P<0.01)及血清sMAC水平(P<0.05)低于B6.WT小鼠,肝脏组织抽提物中IL-1β(P<0.01)、IL-8(P<0.05)水平显著低于B6.WT小鼠,TNF-α水平无显著性差异。肝脏组织中IL-1β(P<0.05)mRNA水平低于B6.WT小鼠,而IL-8、TNF-αmRNA水平无显著差异。同时,肝脏单个核细胞中巨噬细胞及中性粒细胞比例也显著低于B6.WT小鼠(P<0.01)。结论:补体C9缺陷通过下调MAC沉积抑制巨噬细胞和中性粒细胞浸润对LPS诱导的早期肝脏炎症反应和损伤起保护作用。
- 吴艳红付晓燕于洋吴沛恩许虎房佩佩魏涛梁淑娟
- 关键词：LPS内毒素休克肝脏损伤
- 小鼠IL-35基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的构建小鼠IL-35基因靶向shRNA干扰的慢病毒表达载体，抑制小鼠肝癌细胞Hepal-6中IL-35的表达。方法设计合成IL-35EBl3亚基基因靶向shRNA序列，构建shRNA载体PLKO．1-IL-35EB13shRNA．GFP，测序正确后，三质粒病毒包装系统（质粒载体＋psPAX2＋pMD2．G）包装成表达干扰IL-35EB13shR-NA的慢病毒，慢病毒感染靶细胞Hepat-6，镟光显微镜下观察感染效率，以实时定量RT—PCR分析对Hepal-6细胞IL-35EBl3基因表达的干扰效果。结果测序证实，成功构建了真核表达干扰载体PLKO．1-IL-35EB13shRNA．GFP；并成功包装出表达干扰IL-35EBl3shRNA的慢病毒，以MOI值4．6pfu／细胞感染Hepal-6细胞，镜下显示感染效率约90％；RT-PCR结果表明所构建的3个慢病毒载体PLKO．1-IL-35EBl3shRNA—GFP均可以有效干扰IL-35EBl3的表达，其中E545干扰效率最高，为64％．结论成功构建IL-35EBl3亚基基因的shRNA慢病毒表达载体，该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。
- 刘义帅王洪伟邸大琳付晓燕吴国庆王丽娜鞠吉雨
- 关键词：IL-35SHRNA慢病毒
- 不同乳腺癌细胞体外侵袭力差异及影响因素被引量：1
- 2017年
- 目的探讨不同乳腺癌细胞系体外侵袭能力的差异并筛选其影响基因。方法以2种常见的乳腺癌细胞系MCF-7(低转移株)和MDA-MB-231(高转移株)为研究对象,通过细胞划痕实验、细胞黏附实验以及Transw ell侵袭实验分析2种乳腺癌细胞体外侵袭能力差异,实时荧光定量PCR筛选肿瘤侵袭转移相关基因在细胞间的表达差异并采用细胞免疫组化SP法进一步确认。结果 MDA-MB-231细胞24、48 h的平均迁移距离分别为(218.75±20.16)、(211.50±16.54)μm,明显高于MCF-7细胞的迁移距离[分别为(130±29.62)、(119.50±25.65)μm](P<0.01);MDA-MB-231细胞黏附能力明显高于MCF-7细胞;MDA-MB-231细胞24 h平均穿膜细胞数[(57.75±4.19)个]明显多于MCF-7细胞[(35.50±4.20)个](P<0.01);实时荧光定量PCR结果显示,与MCF-7细胞比较,MDA-MB-231细胞中细胞间黏附分子1(ICAM-1)及乳腺癌候选抑制蛋白1(BCSC-1)表达水平[分别为(0.09±0.01)、(0.15±0.03)]均明显降低(P<0.01),而基质金属蛋白酶14(MMP-14)表达水平(14.43±1.01)明显升高(P<0.01)。细胞免疫组化结果显示,MDA-MB-231细胞ICAM-1以及BCSC-1的表达水平明显低于M CF-7细胞,而M M P-14表达水平明显高于M CF-7细胞。结论乳腺癌细胞系M DA-M B-231的体外侵袭能力明显高于MCF-7细胞,细胞侵袭力可能与细胞内ICAM-1、BCSC-1低表达及MMP-14高表达有关。
- 邸大琳王丽娜付晓燕魏兵王会东鞠吉雨
- 关键词：乳腺癌
- 带有人红细胞生成素信号肽序列的IL-1β基因在HepG2细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的构建由经典分泌途径和非经典途径表达人IL-1β的慢病毒载体,制备慢病毒后,感染HepG2肝癌细胞,比较肝癌细胞中IL-1β表达的水平。方法分别以表达人IL-1β前体蛋白基因和人红细胞生成素(EPO)信号肽序列与IL-1β成熟蛋白融合基因的pIRES2-EGFP-proIL-1β和pIRES2-EGFP-epoIL-1β质粒为模板,PCR扩增获得人IL-1β全长基因和含有EPO信号肽与IL-1β成熟蛋白融合基因的序列,将其分别克隆入pLenti6/V5慢病毒载体中,构建由非经典途径和经典途径分泌IL-1β的pLenti6/V5-proIL-1β和pLenti6/V5-epoIL-1β慢病毒表达载体。利用三质粒包装体系在HEK293T细胞中包装生产慢病毒,随后感染HepG2肝癌细胞,双抗体夹心ELISA和Western blot法检测细胞质和培养上清中IL-1β的表达水平。结果构建了含有人IL-1β全长基因和含有EPO信号肽与IL-1β成熟蛋白融合基因的pLenti6/V5-proIL-1β和pLenti6/V5-epoIL-1β慢病毒载体,经双酶切和DNA测序证实与基因库中登录的人IL-1β以及EPO信号肽序列一致。利用三质粒系统包装制备经不同途径表达IL-1β的慢病毒,研究证实经由2条不同途径分泌表达人IL-1β的慢病毒感染HepG2细胞后,与转染空载体的对照细胞相比,细胞培养液上清和胞质中IL-1β的水平均显著升高(P<0.01),其中HepG2/epoIL-1β细胞培养液上清中成熟蛋白IL-1β的水平明显高于HepG2/proIL-1β细胞,而胞质中总IL-1β的水平HepG2/proIL-1β高于HepG2/epoIL-1β。结论构建的带有EPO信号肽序列的IL-1β基因的慢病毒载体,在HepG2细胞表达后,分泌成熟IL-1β的水平明显高于非经典途径分泌的表达载体。
- 李娜邸大琳肖伟玲付晓燕梁淑娟
- 关键词：慢病毒HEPG2细胞
- 对建设高质量医学免疫学实验课教学的探讨被引量：4
- 2010年
- 针对医学免疫学实验传统教学模式存在的弊端,笔者通过优化及合理安排实验内容,开设综合性、设计性实验,采用灵活多样的教学形式,加强实验考核等途径对实验教学内容、教学方法和考核方式等进行了改革探索,锻炼了学生的实践能力,培养了良好的科学素养,提高了实验教学质量,收到了良好的教学效果。
- 付晓燕魏志新付丽丽
- 关键词：医学免疫学实验课教学
- 羊肚菌的功效研究进展被引量：1
- 2009年
- 综述了羊肚菌的食用、药用价值及其利用方面的研究进展，提出了今后羊肚菌开发利用的侧重点。
- 付晓燕
- 关键词：羊肚菌化学成份
- 粗柄羊肚菌原生质体制备及再生技术被引量：1
- 2009年
- 通过实验确定了粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)原生质体制备的最佳条件,即:采用培养72 h的菌丝,以0.6 mol/L NaCl作为稳渗剂配制的4 mg/L蜗牛酶,5 mg/L溶壁酶的混合酶液为细胞壁降解酶液,30℃,50 rpm/min酶解3 h,可得原生质体最高产量为2.07×106个/100 mg/mL。以0.6 mol/LNaCl溶液做稳渗剂,MYG再生培养基上得到原生质体再生率为0.16%。
- 付晓燕范黎
- 关键词：原生质体酶解再生率
