许维嘉
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：西南交通大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家级大学生创新创业训练计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 决明胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其原核表达载体构建被引量：1
- 2015年
- [目的]克隆决明胰蛋白酶抑制剂全长cDNA序列,并构建原核表达载体。[方法]从决明种子中提取胰蛋白酶抑制剂总RNA,通过RT-PCR得到胰蛋白酶抑制剂cDNA,纯化后与PMD19-T载体连接,转化至大肠杆菌DH5α,获得了决明胰蛋白酶抑制剂基因的全长序列,并将该序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/COTI。[结果]决明胰蛋白酶抑制剂基因核苷酸长度为630bp,编码一条长度为209个氨基酸的多肽。决明胰蛋白酶抑制剂与不同植物来源的Kunitz蛋白酶抑制剂有高度的同源性,表明其属于Kunitz蛋白酶抑制剂家族成员。所获重组质粒pET-28a(+)/COTI经过双酶切鉴定,其含有目的片段,且重组质粒构建正确。[结论]克隆了决明胰蛋白酶抑制剂的全长cDNA序列,并成功构建了含有该基因的原核表达载体,这为该基因的进一步表达及功能鉴定奠定了基础。
- 李洋洋阿尔古丽俞继华吴鹏飞许维嘉李娟娟刘祖碧王万军周嘉裕谭睿廖海
- 关键词：决明克隆原核表达载体
