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王东亮: 作品数：16 被引量：114H指数：5; 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>; 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省教育厅重点项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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PCV2 Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结...; 王乃东张素姣王东亮杨毅湛洋余婉婷蒋一凡王爱兵; 文献传递

猪圆环病毒2型衣壳蛋白Loops结构及病毒样颗粒制备的研究进展被引量：11: 2018年; 病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）是某种病毒的1种或几种结构蛋白在体外组装而成，由于VLPs不包含病毒基因组，在宿主细胞q-不能自我复制，因此VLPs在亚单位疫苗应用中具有较高的生物安全性。自猪圆环病毒2型（poreine circovirus type2，PCV2）在世界范围内流行以来，已经给全球养猪业带来巨大经济损失，因此PCV2的致病机理和疫苗研究具有重要现实意义。PCV2Cap蛋白（capsid protein）是病毒唯一的衣壳蛋白，也是主要的免疫原性蛋白，60个Cap蛋白亚基在体外能自行组装成PCV2VLPs，该VLPs因与天然病毒粒子形态相似并保留了病毒完整的构象表位，已经在PCV2组装和侵染机理研究、亚单位疫苗的研发及其相关性系统疾病（PCV2-systemic disease，PCV2-SD）的预防研究中得到广泛应用。本文主要对PCV2Cap蛋白的Loops结构及其VLPs的制备研究进展进行阐述，为PCV2侵染机理与亚单位疫苗的研发等提供参考。; 王东亮湛洋胡意雷昕诺庞培张素娇王爱兵杨毅王乃东; 关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒亚单位疫苗

猪细小病毒7型研究进展被引量：7: 2021年; 猪细小病毒(PPV)是引起母猪繁殖障碍的常见重要病原体之一,且存在众多基因型,对养猪业造成严重损失。2016年在美国首次发现新型猪细小病毒PPV7,随后该病毒陆续在中国、波兰、韩国、瑞典和巴西等国家被检出,并在我国多个地区广泛流行。本文综述了PPV7在病原学和流行病学等方面的研究进展,同时结合本课题组的生物信息学分析对PPV7基因组遗传多样性进行阐述与分析,以更加全面地了解PPV7的分子结构和潜在致病性,为PPV7的深入研究和防治提供科学有效的参考。; 麦金辉王东亮谭磊谭磊; 关键词：病原学流行病学

猪圆环病毒2型全基因组序列分析及Cap蛋白CTL表位预测: 2023年; 【目的】监测当前湖南省猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株及其衣壳蛋白(capsid protein,Cap)变异情况,并预测Cap蛋白细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,为新型PCV2疫苗研制和病毒净化提供参考依据。【方法】本研究对2019-2021年于湖南省6个地区收集的17份PCV2阳性组织样品进行PCV2全基因组序列扩增及测序分析,绘制系统进化树,利用生物信息学方法分析Cap蛋白氨基酸变异情况,并预测CTL表位。【结果】系统进化树显示,获得的17株PCV2全基因组序列中,1株PCV2a、7株PCV2b和9株PCV2d。Cap蛋白氨基酸序列比对分析发现,共有16个氨基酸残基突变位点位于病毒Cap蛋白表面,且有11个突变位点参与构象型表位的形成。此外,共预测出9个PCV2 Cap蛋白潜在的CTL表位,其中4个表位(16-24、28-36、136-144和179-187位氨基酸)在GenBank的1610株PCV2不同基因型毒株中高度保守。通过TCR-pMHC复合物3D结构对4个保守性表位进一步分析,结果显示,这4个肽段均能与MHCⅠ分子和TCR形成稳定的TCR-pMHC复合物。【结论】本研究结果表明,PCV2b和PCV2d为当前湖南省主要流行的基因型,且表现出高度变异;预测的CTL表位可作为候选抗原表位。; 周文锋张英婕白一涵张露华麦金辉王乃东杨毅杨毅王东亮; 关键词：CAP蛋白 CTL表位

猪圆环病毒3型检测及其Cap结构序列和抗原性预测分析被引量：82: 2017年; 近期报道在美国多个州的养猪场发现了一种新型的猪圆环病毒3型毒株(porcine circovirus 3,PCV3)。为了确定PCV3是否已经在我国南方部分省份的猪场中广泛存在,并对目前PCV2疫苗是否对PCV3感染具有交叉保护作用作出科学预测,笔者对我国南方几个省份疑似猪皮炎肾病综合征的病猪组织样品进行PCV3巢式PCR检测及其核衣壳蛋白质(capsid protein,Cap)结构的PyMol和抗原表位服务器在线模拟分析。结果首次在这些病料中检测到PCV3的存在,部分病料表现为PCV2和PCV3共感染的特性。对其Cap结构及抗原性分析发现,PCV2和PCV3表现出很大的差异。因此,推测PCV2和PCV3不具有交叉免疫保护的特性,新的疫苗研究和开发,对于将来控制PCV3流行是必要的。; 湛洋王东亮王乃东蒋一凡黄坤崔尚金姜平杨毅; 关键词：皮炎肾病综合征巢式PCR

PCV2 Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用: 本发明公开了一种PCV2Loop EF区的突变体、引物及其制备方法和应用，PCV2Loop EF区的突变体，其Loop EF区第133位丙氨酸形成供外源表位替换和/或插入的可突变位点以便在体外组装成完整的VLPs。电镜结...; 王乃东张素姣王东亮杨毅湛洋余婉婷蒋一凡王爱兵

PCV2a-ORF3基因缺失株感染性克隆的构建被引量：7: 2017年; 为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析Gen Bank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料中提取的DNA为模板,利用PCR方法扩增PCV2全长基因序列并进行测序。利用分子生物学软件对测序结果分析,结果表明所获得的克隆为PCV2a-2A基因型。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增病毒全长基因组DNA,克隆于p SP72载体中构建野生型PCV2a病毒株感染性克隆。此外,采用SOE-PCR方法,缺失野生型PCV2a感染性克隆中的阅读框3(ORF3),并将这两种重组质粒分别转染PK15细胞,盲传6代后经PCR和间接免疫荧光方法检测显示,构建的PCV2a病毒株与PCV2a-ORF3突变株克隆均具有感染性。本研究为进一步探究ORF3基因对PCV2致病机理和免疫原性的影响奠定了基础。; 湛洋胡意王东亮蔡杰邓治邦; 关键词：PCV2 ORF3基因基因缺失重叠延伸PCR

湖南地区猪圆环病毒2型的分离与鉴定被引量：5: 2019年; 为分离鉴定湖南地区2个猪场的猪圆环病毒2型(PCV2),从临床表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)猪体采集组织病料,验证为PCV2感染的病料,用无污染猪肾细胞系(PK15)细胞分离培养。采用间接免疫荧光试验(IFA)、分子克隆及生物信息学等方法对分离病毒进行分析。结果显示,分别获得了2株PCV2:1株为PCV2d(命名为ChenZ-2-1,GenBank号MH718995),另1株为PCV2b(命名为Yi Y-3-27,GenBank号KU317482),且两分离株的病毒效价TCID50分别为1×10^(5.66)/mL和1×10^(5.5)/mL。本研究有利于提高PCV2的诊断水平,对深入研究PCV2的发病机理及开发PCV2新型疫苗奠定基础。; 贺延峰王东亮邹亚文邹亚文王乃东湛洋; 关键词：猪圆环病毒2型

融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、突变型感染性克隆及其制备方法和应用: 本发明公开了一种融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒、感染性克隆及其制备方法和应用。融合RGD的猪圆环病毒2型病毒样颗粒，RGD短肽融合于PCV2 Cap蛋白上。本发明的融合RGD的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒，...; 王乃东蒋一凡王东亮湛洋李周勉袁晓民; 文献传递

PCV2和PEDV嵌合型病毒样颗粒的分子设计与免疫原性研究: 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪圆环病毒相关性疾病(Porcine circovirus associated diseases,PCVAD)的主要病原体,临床上PC...; 王东亮; 关键词：分子设计猪细小病毒猪流行性腹泻病毒

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