本研究采用16S r DNA PCR-RFLP、IGS PCR-RFLP和16S r DNA基因测序和系统发育分析等分子鉴定方法,对分离的汝州白三叶草共生根瘤菌进行了多样性研究。结果表明,21株供试菌株仅产生了一种16S r DNA酶切图谱组合类型,通过IGS PCR-RFLP又把所有的供试菌株分为了6种酶切图谱类型。经过对代表菌株的16S r DNA基因测序及系统发育分析,6个代表菌株之间具有99.9%~100%的相似性,且供试菌株与根瘤菌属的已知种群Rhizobium anhuiense和Rhizobium leguminosarum等也具有99.9%~100%的相似性,因此,分离自汝州的白三叶草根瘤菌属于根瘤菌属(Rhizobium)。
以云南产卡布里品种鹰嘴豆为原料,采用碱溶酸沉法提取鹰嘴豆蛋白,并分别通过单因素实验和响应面法对蛋白质的提取工艺条件进行优化,然后采用半微量凯氏定氮法测定所提取鹰嘴豆蛋白粉的纯度。结果表明,最佳工艺为液料比12∶1 m L/g,碱溶p H10,碱溶时间120 min,在此条件下,脱脂鹰嘴豆蛋白的得率达12.66%±0.14%,与理论值相差2.39%。经过凯氏定氮法测定,用本论文优化方法所提取鹰嘴豆蛋白粉的纯度为77.82%±0.53%,优于已有提取方法,表明利用该论文提出的优化条件可以获得更高纯度的鹰嘴豆蛋白粉。
