朱琳颖
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大肠杆菌表达的TaqDNA聚合酶的纯化被引量：1
- 2012年
- Taq DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的热稳定DNA聚合酶之一,与其他热稳定DNA聚合酶具有相似的特征,其纯化策略不但有潜在的应用前景,也对同类聚合酶的分离具有指导意义。已报道的适宜大量制备Taq酶的方案所需成本较高,而文章介绍了一种利用国产阳离子交换树脂廉价制备Taq酶的方案。在本方案中,采用热变性、(NH4)SO4沉淀与724离子交换层析分离大肠杆菌表达的Taq酶,约18 g Na型树脂干粉一次可回收比活约8 131.98 U/mg、总酶活2.2×105U、近27.07 mg Taq酶。纯化的产率可达48.92%,纯化倍数约59.35。所制酶SDS-PAGE电泳只检测到94 kDa单一蛋白条带,未检测到DNA核酸酶污染,与商品酶的PCR扩增能力无区别。此纯化方法成本低,适合实验室一般性的制备和生产应用。
- 刘天磊薛守斌王芳朱琳颖梁微微曲圣轩蔡文博
- 关键词：TAQDNA聚合酶
