张洋
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：辽宁省研究生教育创新计划资助项目国家公益性行业科研专项辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 海参溶菌酶C端多肽的异构肽酶活性
- 2016年
- 海参溶菌酶C端多肽与5种异构肽酶的氨基酸残基序列比对发现,其具有较高同源性,维持异构肽酶活性的两个关键位点组氨酸(His)和丝氨酸(Ser)也高度保守。水解底物L-γ-Glu-pNA生成4-硝基苯胺的实验结果表明,C端多肽具有异构肽酶活性。丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF能有效破坏蛋白酶活性,表明Ser是异构肽酶rSjLys-C的关键活性位点,即rSjLys-C属于丝氨酸蛋白酶。确定最适催化条件为37℃、pH 7.4、NaCl 50 mmol/L。rSjLys-C的酶促反应动力学参数Vmax为1.446×10^(-5) mmol/(L·s),K_m为0.395 7mmol/L,k_(cat)为1.509×10-3 s^(-1),k_(cat)/K_m为23.813L/(mol·s)。
- 牛庆昌李成梁雯婧马俊随瑞瑞张洋丛丽娜
- 关键词：海参溶菌酶活性位点
- 海参i-型溶菌酶在毕赤酵母基因工程菌中优化表达及纯化被引量：1
- 2016年
- 将实验室已构建的毕赤酵母基因工程菌(p PIC9K-Sj Lys/GS115)作为海参i-型溶菌酶生产菌株,本研究分别从甲醇浓度、培养基p H、温度和诱导时间对其产酶发酵条件进行优化。实验得出甲醇诱导浓度为1.0%,发酵培养基初始p H 6.0,温度30℃,培养96 h为最佳目的蛋白表达条件,其发酵液中海参i-型溶菌酶含量达10.63 mg/L。将发酵液经离心和超滤浓缩后得到上清液,再经离子交换和凝胶过滤层析纯化获得海参i-型溶菌酶产品,其酶活力达826.44 U/mg。经测定该酶对革兰氏阳性菌溶壁微球菌和革兰氏阴性菌副溶血弧菌均具有明显的抑菌作用。
- 马俊张洋丛丽娜李成
- 关键词：毕赤酵母发酵条件优化酶活性
