李旭颖
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 嗜热菌Anoxybacillus sp.产淀粉酶培养基优化及产酶条件研究被引量：2
- 2016年
- 目的:对产淀粉酶嗜热菌Anoxybacillus sp.菌株进行培养基优化及产酶条件研究,以便提高菌株的产酶能力,并为下一步菌株的诱变育种研究提供基础。方法:常规方法液体培养菌株,用平板初筛和DNS法复筛选择产淀粉酶能力较高的菌株;单因素筛选培养基最适的碳源、氮源、Ca^(2+)浓度和Mg^(2+)浓度,对单因素筛选的最佳碳源、氮源、Ca^(2+)和Mg^(2+)的三个较佳浓度进行四因素三水平正交试验优化培养基;对培养基不同p H值及不同培养温度进行培养条件研究。结果:产淀粉酶菌株筛选结果显示:六株菌中淀粉酶酶活力值最大的是菌株DL4,差异有统计学意义(P<0.05)。培养基单因素筛选结果显示:最适碳源为麦芽糖、最适氮源为硝酸铵、最适Ca^(2+)、Mg^(2+)浓度均为0.02%,差异有统计学意义(P<0.05)。培养基优化结果显示:C源0.1%,N源0.2%,Mg^(2+)0.04%,Ca^(2+)0.04%为最佳的培养基成分组合。产酶条件筛选结果显示:培养基p H值为6、培养温度为55℃时菌株产酶水平最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:培养基的优化及最适的产酶条件能提高嗜热菌Anoxybacillus sp.DL4产淀粉酶能力,Ca^(2+)、Mg^(2+)离子对菌株产淀粉酶有促进作用。
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- 关键词：嗜热菌淀粉酶培养基优化产酶条件
- 嗜热菌Anoxybacillussp.DL3产蛋白酶条件及其酶学性质研究被引量：3
- 2013年
- 目的:对Anoxybacillus sp.DL3的产蛋白酶条件及其酶学性质进行研究,为下一步进行蛋白酶基因的克隆、表达提供依据。方法:应用常规方法液体培养细菌,研究温度、pH、培养基中碳源、氮源对菌株产蛋白酶的影响,硫酸铵盐析的方法提取酶液,并采用Folin法测酶活性。用紫外分光光度计在OD680 nm测吸光值。并对提取的蛋白酶液进行酶的最适温度、pH以及酶的热稳定性和pH稳定性研究,向酶液中添加金属离子和EDTA、PMSF,研究其对酶活性的影响。结果:在培养基初始pH是6.5,培养温度为40℃时菌株产酶酶活性最大;培养基中以乳糖为碳源,酵母膏和硫酸铵为氮源,碳源与氮源的比例为1:2时,酶活最大。酶学性质研究结果显示:该酶的最适反应温度是55℃,最适反应pH是7.0;在50℃保温20 min^80min内,酶活力下降幅度较小。60℃保温60min后,仍保持约60%的酶活。70℃保温60 min后,残余酶活为30%。该酶在pH为6.0~8.0范围内,相对酶活差别不是很大,下降趋势大致相同。在强碱条件下,相对酶活下降很明显。Fe2+、Cu2+和Hg2+对酶活性有明显的抑制作用;Ca2+、Mg2+、Mn2+等金属离子对酶活性有明显的促进作用;乙二胺四乙酸(EDTA)和苯甲基磺酰氟(PMSF)对酶活性也有一定抑制作用。结论:Anoxybacillus sp.DL3所产的蛋白酶为嗜热中性蛋白酶,此酶具有较好的热稳定性和pH耐受性,该菌株具有进一步开发、利用的价值。
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- 关键词：嗜热菌蛋白酶产酶条件酶学性质
- 产蛋白酶嗜热菌Anoxybacillus sp.紫外诱变研究被引量：1
- 2015年
- 目的对嗜热菌Anoxybacillus sp.进行紫外诱变,通过改变遗传性状获得产蛋白酶性能优良的嗜热菌株。方法用牛奶平板对嗜热菌株产蛋白酶能力进行初步判断;将菌悬液置于紫外灯下照射不同时间,分别进行菌落计数、计算致死率;以紫外诱变后致死率75%~85%的诱变时间处理菌悬液,采用Folin法对紫外诱变前后的菌株所产蛋白酶的活性进行检测比较;诱变处理的菌液连续传5代,每代检测蛋白酶的活性。结果嗜热菌Anoxybacillus sp.可在牛奶平板上产生清晰透明的蛋白水解圈;Anoxybacillus sp.DL4菌株经90s紫外照射处理后的致死率为81.46%;突变株的酶活性提高了17.33%;菌株传代5次,每代蛋白酶活性基本相同。结论紫外诱变能够明显提高嗜热菌Anoxybacillus sp.DL4的蛋白酶活性,且其遗传稳定性较好。
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- 关键词：嗜热菌蛋白酶紫外诱变
- 大庆林甸温泉嗜热菌分离及鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的对大庆林甸温泉嗜热菌进行分离、鉴定,并对其特性进行研究。方法应用常规的稀释涂布法分离和纯化嗜热菌,采用全菌体蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),结合细菌形态学及生理生化指标对分离的菌株进行鉴定,并对分离的菌株进行生长特性研究。结果分离纯化出的3株嗜热菌,均为革兰氏阳性菌,菌体杆状,直或接近直,均有芽孢、荚膜、鞭毛,V-P试验、触酶试验、氧化酶试验均阳性,均能降解淀粉。3株菌生长温度范围为35～65℃,pH值范围为4.5～11.5。结论 3株嗜热菌初步鉴定为芽孢杆菌属。
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- 关键词：嗜热菌温泉
