李凯
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 注射用重组新蛭素的质量控制研究
- 2016年
- 目的:建立注射用重组新蛭素原液、成品的质量控制方法及内控质量标准。方法:利用纤维蛋白凝块法测定注射用重组新蛭素的生物学活性,非还原SDS-PAGE和RP-HPLC测定纯度,SDS-PAGE和质谱法分析相对分子质量,免疫印迹验证目的蛋白,其余检测项目按《中华人民共和国药典》(2010年版三部)规定进行。结果:用建立的方法对注射用重组新蛭素3批原液和成品进行了检定,原液抗凝比活性均为512 ATU/mg,非还原型SDS-PAGE和HPLC检测3批原液的纯度结果均大于95%;质谱法分析3批原液相对分子质量符合7.3×103±0.7×103,SDS-PAGE分析3批原液相对分子质量符合13.2×103±1.3×103;免疫印迹表明检测条带为目的蛋白,能被抗水蛭素抗体特异性结合;其余各项指标均符合内控质量标准及《中华人民共和国药典》(2010年版三部)的要求。结论:建立的质量控制方法和内控质量标准可以用于注射用重组新蛭素的检定和质量控制。
- 毛赟赟李彦英董俏言赵宁李凯靳继德董晓杰
- 关键词：水蛭素生物学活性
- 西妥昔单抗注射液生物学活性分析被引量：2
- 2016年
- 目的:对自行开发的爱必妥类似物西妥昔单抗进行体内及体外活性分析。方法:采用表皮生长因子受体(EGFR)结合实验、表面等离子共振法(SPR)、磷酸化抑制实验及细胞生长抑制实验分析西妥昔单抗的生物学活性,通过小鼠异体移植肿瘤的抑制实验分析体外生物学活性与药效关系。结果:体外亲和力分析结果表明,西妥昔单抗可特异结合人EGFR,亲和力与爱必妥相当(P>0.05)。西妥昔单抗可抑制由表皮生长因子(EGF)引发的EGFR自体磷酸化,基于对EGFR磷酸化抑制而建立的西妥昔单抗生物学活性方法与西妥昔单抗的肿瘤细胞生长抑制作用进行了比较,结果显示西妥昔单抗抑制EGFR磷酸化的活性数值与其抑制细胞生长的活性一致。在鼠异体移植模型中,西妥昔单抗对A431细胞的肿瘤生长产生强烈抑制作用,对HT-29细胞的肿瘤生长也有剂量依赖性抑制。结论:采用的检测方法可用于西妥昔单抗的生物学活性分析,其体内与体外生物学效应与市售爱必妥没有差异。
- 毛赟赟张丽汪波李凯李彦英王笑非董晓杰
- 关键词：西妥昔单抗表皮生长因子受体生物学活性磷酸化
- 单克隆抗体纯化过程中内毒素去除方法分析被引量：2
- 2013年
- 目的：分析单克隆抗体纯化过程中，去除内毒素的不同方法的应用效果，并探讨它们应用于中试规模的可行性。方法与结果：比较了多聚赖氨酸型的内毒素去除填料、20nm膜过滤、将单抗附着在蛋白A柱上后使用精氨酸和组氨酸溶液冲洗等3种方法的内毒素去除效果，发现3种方法都可以将内毒素水平大幅降低，可分别将内毒素去除70％、88％和97％。因为单抗分子等电点较高，所获得的最低内毒素含量为0．2～0-3EU／mg。结论：3种方法均具有一定的工艺放大潜力，进一步提高内毒素去除效果将需要综合使用不同机理的去除技术。
- 李彦英王珙李凌瑞周振海李娜毛赟赟李凯王笑非董晓杰
- 关键词：组氨酸精氨酸
