宝力德 作品数:17 被引量:75 H指数:5 供职机构: 内蒙古农业大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区自然科学基金 教育部“春晖计划” 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 化学工程 环境科学与工程 更多>>
Bacillus.sp.bs-1的内切葡聚糖酶在大肠杆菌中表达条件的优化及其活性分析 被引量:2 2013年 用两个不同的表达载体pET-30a-C和pET-28a-C进行了Bacillus.sp.bs-1的内切葡聚糖酶在大肠杆菌中的诱导表达,确定了最佳可溶性诱导表达条件。pET-30a-C表达的内切葡聚糖酶在25℃,用1mM的IPTG诱导3h就可以达到最佳可溶性表达量。pET-28a-C表达的内切葡聚糖酶在25℃,用0.8mM的IPTG诱导5h能够达到最佳可溶性表达量。对表达的内切葡聚糖酶活性进行了测定,并确定了最适反应条件。用Ni-NTA树脂纯化了表达的内切葡聚糖酶蛋白,得到单一的目的蛋白,并测定了纯化后的内切葡聚糖酶的比活力。pET-30a-C表达的内切葡聚糖酶的粗酶液活性为1489U/ml,比活力为723U/mg,pET-28a-C表达的内切葡聚糖酶的粗酶液活性为683U/ml,比活力为808U/mg。此结果为枯草芽胞杆菌内切葡聚糖酶在工业应用方面提供了理论依据。 宝力德 秦伟 杨嘉萌 邵影关键词:内切葡聚糖酶 纯化 不同作物中维生素E含量的测定和比较 被引量:11 2011年 该研究利用HPLC法测定了玉米、大豆和油菜不同品种籽粒中维生素E的含量,并对3种作物及每种作物不同品种之间的维生素E含量进行了比较分析。结果表明:3种作物的VE总量为油菜>大豆>玉米;活性最高的α-生育酚含量为油菜>玉米>大豆。每种作物不同品种间VE总量与α-生育酚含量比较发现,玉米不同品种间的变化最大,其VE总量与α-生育酚含量的变化范围分别在12.05~128.63mg/100g之间和0.93~52.01mg/100g之间。这些数据为将来的基因工程育种、食用油选购等提供依据。 李禄慧 徐妙云 张兰 宝力德 王磊关键词:玉米 大豆 油菜 Α-生育酚 内蒙古盐碱湖一株编码细菌视紫红质的嗜盐古菌bop基因全序列克隆及表达 2016年 细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin,BR)是由bop基因编码的唯一膜蛋白,具有光推动质子泵的作用,为生命活动提供所需要的能量。为了研究高表达且具有生物活性的BR蛋白,应用PCR扩增技术,从内蒙古额吉淖尔盐碱湖分离得到的一株嗜盐古菌中扩增得到bop基因全序列;并构建了具有His6标签的原核表达载体p ET28a-IM-1,转化到大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达BR;并对表达产物进行SDS-PAGE鉴定分析。结果显示获得的bop基因全序列开放阅读框为672 bp,编码223个氨基酸,含有重组质粒p ET28a-IM-1的阳性菌株在IPTG诱导下高效表达了分子量约为25 k Da的BR蛋白。同源性分析表明该BR蛋白结构在古菌与细菌中具有相对较高的保守性,这与其质子泵功能密切相关。该BR蛋白为新发现的细菌视紫红质,其基因序列已递交Gen Bank,其登录号为KT873301。 王海娟 呼都特 刘超群 宝力德关键词:细菌视紫红质 SDS-PAGE 内蒙古额吉淖尔盐碱湖一株产视紫红质的极端嗜盐古菌的分离及其bop基因核心序列及最适生长条件的分析 被引量:1 2014年 从内蒙古额吉淖尔湖分离得到一株产视紫红质的极端嗜盐古菌,初步鉴定为属于Natrinema属,并扩增出了其bop基因,该bop基因序列已在Genbank中注册,编号为KF863690,分析了其核心序列。结果表明bop基因开放阅读框为303 bp,编码101个氨基酸。blastp结果表明该蛋白属于Bac-rhodopsin蛋白家族,具有典型的细菌视紫红质蛋白结构域。利用BLAST进行相似性分析发现bop编码蛋白氨基酸序列与Genbank中编号AAS87571.1、WP-007110705和AFB77278.1的视紫红质蛋白相似性达到98%以上。此结果表明视紫红质蛋白在细菌及古菌中结构上具有很高的保守性,与其质子泵功能紧密相关。。最后分析了该菌株的最适生长条件。该菌株在分离培养基中适宜生长的NaCl浓度范围为1.0~3.0 mol/L,适宜生长pH为6.5~8.5,适宜生长镁离子浓度为0.4~0.8 mol/L。通过分析比较得出该嗜盐古生菌株生长最适NaCl盐浓度为1.5 mol/L,最适pH为7.5,最适镁离子浓度为0.4 mol/L。该实验结果为今后进一步研究产视紫红质的极端嗜盐古生菌株的生理生化特征及遗传学特征奠定了基础。 宋倩 韩瑞 宝力德关键词:极端嗜盐古菌 细菌视紫红质 柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的克隆及表达分析 被引量:3 2017年 为研究胚胎发育晚期蛋白(LEA)在柠条中的生物学功能,从已构建的柠条锦鸡儿干旱胁迫抑制削减杂交文库中筛选到一条LEA蛋白编码基因,并采用RT-PCR法进行克隆。所得LEA基因的开放阅读框(ORF)长1 119 bp,编码373个氨基酸的蛋白质,命名为CkLEA4-1。结合序列比对与系统进化分析结果,推断CkLEA4-1属于5族LEA蛋白。利用实时荧光定量PCR技术对CkLEA4-1在干旱、高盐等逆境胁迫条件下的表达情况进行初步研究,结果表明,CkLEA4-1受到不同程度的诱导,推测该基因可能与柠条锦鸡儿响应逆境胁迫有关。研究还成功构建了CkLEA4-1的过表达载体p Can G-CkLEA4-1,得到转基因纯合体株系,为进一步研究柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的功能提供了材料。 滑璐玢 于秀敏 杨杞 王瑞刚 宝力德关键词:柠条锦鸡儿 LEA 基因克隆 国内细菌纤维素酶基因的克隆进展 被引量:8 2010年 随着能源问题日益突出,各国逐渐把对纤维素的降解研究作为一项重要的研究课题。而纤维素的酶降解是利用纤维素的一个有效途径。目前主要对真菌纤维素酶的研究日趋成熟,且真菌纤维素酶的活性比较高,像里氏木霉、绿色木霉、康氏木霉等。对细菌纤维素酶基因克隆方面的研究也有很多报道,但普遍认为细菌纤维素酶活性比真菌纤维素酶的活性低。而细菌作为世界分布最广的生物具有非常大的开发价值空间。文章主要介绍目前对细菌纤维素酶基因的克隆领域的研究现状,并作了一个简要的概括和分析。 孙麟 宝力德关键词:细菌 纤维素酶 基因克隆 31份苜蓿种质材料的遗传多样性及亲缘关系分析 被引量:11 2013年 运用RAPD分子标记技术,对31份苜蓿材料的遗传多样性及亲缘关系进行检测。样品采用单株取样法(每个样本取11个单株),31份苜蓿材料共计341个单株,选用8个RAPD引物,共扩增出条带123条,其中多态性条带为121,占总位点的98.37%。Shannon信息指数为0.4572,Nei’s基因多样性指数为0.2967,种群间遗传分化系数为0.2697,说明苜蓿的遗传变异主要发生在种群内。供试31份种质材料根据遗传距离聚类可分为5类,其中种群25与种群42亲缘关系最近;种群2和种群17亲缘关系最远。种群27为1份特异的紫花苜蓿材料;种群2为1份特异的黄花苜蓿材料。 陈冬立 宝力德 杜建材 王照兰 胡卉芳 米超关键词:苜蓿 种质资源 基因组 RAPD分子标记 泉古菌Pyrobaculum calidifontis的QueF-like酶诱导表达条件的优化 古菌又称为古细菌、太古菌、太古生物或者古核生物。古菌又分为两类:泉古菌(Crenarchaeota)和广古菌(Euryarchaeota)。 刘超群 宝力德SV40启动子在烟草体内的驱动特性研究 被引量:1 2015年 根据SV40启动子序列设计引物,PCR扩增该启动子后,成功构建了具有SV40启动子和GUS报告基因的植物表达载体pLpPSG,并将重组质粒转化到烟草叶片中.通过SV40启动子驱动的GUS基因在烟草叶片内的瞬时性表达,研究了该启动子在植物基因表达中的驱动特性.结果表明:SV40启动子可启动GUS基因在烟草体内的表达,其提高基因表达水平达到2×35S启动子的(88.5±19.2)%. 宝力德 邸娜 于秀敏 刘福军 王瑞刚关键词:烟草 GUS基因 采油污水对斑马鱼SOD活性的影响 2016年 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是生物防御系统中重要的一种酶。通过研究采油污水对生物体内SOD活性的影响,可以判断采油污水对生物体产生的毒害以及对环境产生的污染。本实验采用斑马鱼为实验材料,通过比色法和酶液提取技术,以不同浓度的采油污水胁迫培养斑马鱼,然后测定斑马鱼的头部、肌肉和内脏中SOD活性。实验结果显示,在采油污水胁迫培养的斑马鱼体内的SOD活性的变化与污水的浓度也就是污染物胁迫强度有着一定的关系。其中以斑马鱼头部的SOD活性变化最为显著,在无采油污水胁迫的对照组中斑马鱼头部的SOD活性为16.73U/mg,而在采油污水稀释浓度为0.03的全致死组中培养的斑马鱼头部的SOD活性为239.09U/mg。说明在没有采油污水污染的情况下斑马鱼的SOD基础活性比较低,在全致死浓度时其活性在斑马鱼头部中上升了14倍左右,变化非常明显。因此可以通过检测斑马鱼头部的SOD活性的变化去判断斑马鱼是否受到水中污染物的毒害,进而判断环境污染的程度,为环境检测提供实验依据,为采油污水的综合化处理和环境污染的治理提供简便的检测手段。另外本研究发现在大庆地区采油污水中斑马鱼全致死浓度为该污水的33倍稀释浓度,反映出目前大庆地区的水源被采油污水污染较严重。采油污水的排放质量不达标,急需加强对采油污水的排放进行治理,改善大庆地区水源环境质量。 刘超群 吴杨 张薇 徐长君 宝力德关键词:采油污水 斑马鱼 SOD 环境污染