卢志鹏
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广州市属高校科技计划项目广东省自然科学基金广东省大学生创新实验项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪PR-39抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达
- 2016年
- [目的]在毕赤酵母中表达抗菌肽PR-39基因,获得有抗菌活性的PR-39。[方法]根据酵母和猪密码子偏好性,对其密码子进行优化改造。将经SOE-PCR获得的PR-39基因与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建重组载体pPIC9K-PR-39。经SacⅠ线性化电击转化毕赤酵母GS115,取阳性克隆进行髙拷贝转化子筛选和诱导表达。[结果]pPIC9K-PR-39重组质粒构建成功,pPIC9K-PR-39菌株发酵产物检测结果对DH5α大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有抑菌效果。[结论]获得了PR-39基因的重组酵母,并用毕赤酵母系统成功地分泌表达了具有明显抗菌活性的抗菌肽PR-39。
- 江学斌陈嘉蔚杨军柯德森肖安吉卢志鹏楚品品黄朝远蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词：抗菌肽毕赤酵母抑菌活性
- 分离自婴儿粪便的嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的常温保存探究被引量：3
- 2015年
- 目的:试验不同的保护剂成分配方,探究分离自婴儿粪便的2种益生菌(嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌)在常温条件下保持较高活性的可行方法。方法:利用均匀设计实验方法设计保护剂配方,用于保存特定高活性高稳定性的菌种,在不同时间点检测活菌数,分析数据得出最佳保护剂成分比例。结果:嗜酸乳杆菌10A31保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶天冬氨酸=5∶24∶24;长双歧杆菌11A11保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶麦芽糖=34∶11∶10;用最佳保护剂配方保存后,嗜酸乳杆菌10A31在200 d时的菌落计数结果为3.87×109CFU/g,长双歧杆菌11A11在160 d时为1.53×109CFU/g,均具有较高的活性。结论:最佳保护剂配方使2个菌种常温保存期至160 d。
- 黄魁英肖安吉卢志鹏楚品品杜少平明飞平夏枫耿黄朝远杨军蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词：嗜酸乳杆菌长双歧杆菌常温保存益生菌
- 猪源抗菌肽PBD-1在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：7
- 2016年
- 本试验旨在实现猪β防御素1(poricine-β-defensin 1,PBD-1)在毕赤酵母中的表达,获得有抗菌活性的抗菌肽PBD-1。根据PBD-1的氨基酸序列和酵母密码子偏好性,设计优化其核苷酸序列,利用SOE-PCR技术获得PBD-1基因序列,克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-PBD-1,经SacⅠ线性化后转入毕赤酵母SMD1168中。PCR筛选得到阳性酵母表达菌株,经甲醇诱导后得到分子质量约4.5ku的抗菌肽PBD-1。抗菌特性研究结果表明,表达产物抗菌肽PBD-1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌均有较好的抑制效果。
- 江学斌陈嘉蔚杨军刘顺枝肖安吉卢志鹏楚品品黄朝远蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词：毕赤酵母PCR
- 猪Sirt5基因的克隆及其腺病毒载体的构建和鉴定被引量：1
- 2016年
- 为了从猪脑中克隆得到Sirt5基因,并构建腺病毒载体,提取长白猪脑组织总RNA,利用RT-PCR和PCR扩增得到Sirt5基因。再将此基因克隆至穿梭载体上,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-IRES-Sirt5。经酶切线性化,电击转化已含骨架载体pAdEasy-1DNA的BJ5183+感受态菌,得到重组腺病毒质粒Ad-Sirt5。重组腺病毒质粒经酶切线性化鉴定。结果本试验获得的Sirt5基因与NCBI公布序列一致。利用细菌同源重组技术构建重组腺病毒载体,经酶切鉴定正确。表明本试验成功克隆得到Sirt5基因,并成功构建Sirt5基因的腺病毒载体。
- 黄魁英冯永达明飞平肖安吉卢志鹏楚品品黄瀚威谭家裕夏枫耿黄朝远杨军蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词：腺病毒
- 猪PR39真核表达载体构建
- 2016年
- 为构建猪源抗菌肽PR39的高效表达真核载体pVAX1-PR39,通过猪股骨骨髓组织基因组RNA合成c DNA,根据PR39基因全长序列,设计高效表达启动子,利用PCR扩增获得PR39全长基因,连接到真核载体pVAX1,构建重组载体pVAX1-PR39。转化大肠杆菌DH5α后进行菌落PCR鉴定和测序,测序结果与NCBI网站上猪源抗菌肽PR39基因序列完全一致,表明已成功构建了猪PR39的真核表达载体,理论上所构建的PR39表达载体能够提高猪的免疫能力。
- 江学斌陈嘉蔚杨军胡位荣肖安吉卢志鹏楚品品张玲华
- 关键词：抗菌肽真核表达PVAX1
